【正文】 2. 切片常規(guī)脫蠟至水。將一側(cè)睪丸和附睪放入多聚甲醛固定液中固定，另一側(cè)睪丸和附睪放入20℃冰箱中凍存用于標(biāo)志性酶活性的測(cè)定。Annanie等（1988）報(bào)道TBT對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)的影響，并發(fā)現(xiàn)氯化二丁基錫影響最大[20]。防御體系各成分之間相互起到了協(xié)同作用，以及代償作用與依賴作用[14]。精子細(xì)胞靠近管腔，細(xì)胞質(zhì)少，核圓形，染色較深，它不再分裂，經(jīng)過復(fù)雜的形態(tài)演變后形成精子。生精小管在近睪丸縱隔處變?yōu)槎潭钡闹本」埽本」苓M(jìn)入睪丸縱隔相互吻合形成睪丸網(wǎng)。附睪是精子濃縮、成熟、貯藏和轉(zhuǎn)運(yùn)的部位。對(duì)人的毒性，局部對(duì)皮膚、呼吸道、角膜的刺激作用，通過皮膚或腦水腫會(huì)引起全身中毒甚至死亡。進(jìn)入機(jī)體的有機(jī)錫主要經(jīng)肝微粒體酶脫烷基二代謝轉(zhuǎn)化，最后大部分經(jīng)腎和消化道排出，本類物質(zhì)也可從唾液、乳汁排出，四乙基錫還可經(jīng)呼吸道黏膜排出[11]。 有機(jī)錫化合物對(duì)機(jī)體的毒性作用有機(jī)錫化合物作為一種防污涂料被廣泛應(yīng)用于船體和海洋建筑的同時(shí)對(duì)環(huán)境的污染日趨嚴(yán)重，也導(dǎo)致海產(chǎn)品中殘留了大量的有機(jī)錫化合物。 有機(jī)錫化合物的污染現(xiàn)狀防污涂料的釋放是有機(jī)錫進(jìn)人海洋環(huán)境的直接來源，國(guó)內(nèi)外大量相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)，有機(jī)錫化合物的環(huán)境污染及其分布有一定的規(guī)律，各水域之間的濃度水平有很大差別，在同一地區(qū)也不盡相同。通式RnSnX4（n=1～4，R為烷基或芳香基），有烷基錫化合物和芳香基化合物兩類。s body weight, the weight of testis and epididymis were weighted, testis and epididymis index were calculated。河南科技大學(xué)畢 業(yè) 設(shè) 計(jì)（論 文）地塞米松磷酸鈉對(duì)雄性小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)的影響姓 名 孫坤杰 院 （系）動(dòng)物科技學(xué)院 專業(yè)班級(jí) 動(dòng)物藥學(xué)091 指導(dǎo)教師 位 蘭 2013年6月6日畢 業(yè) 設(shè) 計(jì)（ 論 文 ）任 務(wù) 書（指導(dǎo)教師填寫） 填表時(shí)間： 2011年 1月 12日學(xué)生姓名李偉 專業(yè)班級(jí)動(dòng)植檢072指導(dǎo)教師位蘭課題類型論文設(shè)計(jì)（論文）題目環(huán)境水平三苯基錫對(duì)雄性SD大鼠生殖毒性的研究主要研究?jī)?nèi)容本試驗(yàn)以青春期SD大鼠作為研究對(duì)象，采用低水平（、50 μg/kg）的三苯基錫（Triphenyltin，TPT），進(jìn)行54 d的暴露，比較對(duì)照組和各濃度暴露組大鼠體重、睪丸重、附睪重、睪丸指數(shù)和附睪指數(shù)，確定TPT對(duì)睪丸發(fā)育的影響；將附睪內(nèi)的精子進(jìn)行涂片觀察并計(jì)算精子畸形率、精子相對(duì)數(shù)；檢測(cè)各組大鼠睪丸酶堿性磷酸酶（AKP）、γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT）和總抗氧化能力（TAOC）水平，并采用石蠟切片和HE染色技術(shù)觀察各試驗(yàn)組睪丸和附睪組織結(jié)構(gòu)的變化，以初步探討TPT對(duì)雄性大鼠生殖的毒性作用及機(jī)理，為分析預(yù)測(cè)環(huán)境TPT污染對(duì)動(dòng)物以及人類健康的影響提供依據(jù)。關(guān)鍵詞：環(huán)境水平，三苯基錫，雄性大鼠，生殖毒性文獻(xiàn):中華男科學(xué),2003年二月陳蕾蕾\姚兵 綜述黃宇烽審校REPRODUCTIVE TOXICITY OF ENVIRONMENTAL TRIPHENYLTIN ON MALE SD RATSABSTRACTTo study the effects of environment level triphenyltin (TPT) on mammalian male reproductive toxicity, 20 healthy SD adult male rats were randomly divided into four groups. Different doses of triphenyltin (TPT) (0, , 5 and 50 μg/kg) were administrated to the rats every 3 days for 54 days. The mouses were killed when they were anesthetized with 10% chloral hydrate after the last test substance given for 24 h. Each rat39。 the level of γGT and TAOC in testis of rats in low dose increased significantly, that in middle dose group did not change significantly, that in high dose group was significantly decreased (P). This experiment confirms TPT influences rat reproductive organs development and sperm growth, we presume TPT may have reproduction toxic to male mammals. KEY WORDS: Environmental level，Triphenyltin，Male Rat，Reproductive toxicity目 錄1 前 言 1 有機(jī)錫化合物的性質(zhì)與應(yīng)用 1 有機(jī)錫化合物的污染現(xiàn)狀 1 有機(jī)錫化合物對(duì)機(jī)體的毒性作用 1 睪丸結(jié)構(gòu)及精子的生成 3 睪丸標(biāo)志性酶的功能 3 本試驗(yàn)的目的及意義 42 材料與方法 4 試驗(yàn)動(dòng)物及處理取材 4 試驗(yàn)儀器與試劑 5 5 5 檢測(cè)項(xiàng)目及方法 睪丸、附睪、睪丸指數(shù) 5 5 5 6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 63 結(jié)果 6 TPT暴露后SD大鼠體重、睪丸和附睪重量及其臟器指數(shù)的變化 6 TPT暴露后SD大鼠精子形態(tài)的變化 8 TPT暴露后SD大鼠睪丸和附睪組織結(jié)構(gòu)的變化 9 TPT暴露后SD大鼠睪丸標(biāo)志性酶的變化 134 討論 14 TPT對(duì)SD大鼠生殖器官生長(zhǎng)發(fā)育的影響 14 TPT對(duì)SD大鼠睪丸標(biāo)志性酶的影響 155 結(jié)論 16參考文獻(xiàn) 17致 謝 20外文資料譯文 211 前 言 有機(jī)錫化合物的性質(zhì)與應(yīng)用 有機(jī)錫化合物是錫和碳元素直接結(jié)合所形成的金屬有機(jī)化合物。目前主要用作農(nóng)作物殺蟲劑和海洋防污涂料?！庇纱丝梢?，國(guó)際上對(duì)于有機(jī)錫潛在和存在的污染是高度重視的。研究發(fā)現(xiàn)，三乙基錫進(jìn)入大鼠機(jī)體后，約50%能與血紅蛋白結(jié)合，肝和血液的濃度最高，腎、脾、心、腦和骨骼肌較少，經(jīng)口也呈類似分布。 有機(jī)錫化合物對(duì)生物體的主要損害為：中樞神經(jīng)系統(tǒng)會(huì)造成腦白質(zhì)水腫，細(xì)胞能量利用中氧化磷酸化過程受障，胸腺和淋巴系統(tǒng)的抑制作用，細(xì)胞免疫性受妨害，激素分泌抑制引起糖尿病和高血脂病等。睪丸為雄性的主要性器官，具有生精和內(nèi)分泌功能?？v隔的結(jié)締組織呈放射狀伸入睪丸實(shí)質(zhì)把睪丸分隔為多個(gè)分隔間，形成小葉隔，分隔間充滿了彎曲的上皮性管道，稱為曲細(xì)精管。由于次級(jí)精母細(xì)胞存在的時(shí)間短，在切片中較少見。這個(gè)體系的防護(hù)氧化作用主要通過三條途徑：（1）消除自由基和活性氧以免引發(fā)脂質(zhì)過氧化：（2）分解過氧化物，阻斷過氧化鏈；（3）除去起催化作用的金屬離子。Sherman等（1988）發(fā)現(xiàn)高劑量三丁基錫和二丁基錫化合物引起小鼠胸腺和脾臟萎縮，小鼠體重降低；低劑量TBT對(duì)淋巴細(xì)胞功能也有抑制作用[19]。末次染毒24 h后用10%的水合氯醛麻醉動(dòng)物，眼眶采血后處死，取雙側(cè)睪丸，稱重，分別進(jìn)行睪丸的形態(tài)學(xué)觀察。撈片后置烤箱5860oC,3060min以使切片緊密粘附。6. 滴加稀釋50倍的一抗（小鼠IgG），37oC 。脫水，透明，封片。睪丸指數(shù)和附睪指數(shù)與對(duì)照組相比，低劑量和中劑量組的睪丸指數(shù)較對(duì)照組大，高劑量組較對(duì)照組減小（圖1），附睪指數(shù)相比沒有明顯變化，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析沒有顯著性差異（P）（圖2）。177。TPT μg/kg51000177。具體為：低劑量組大多數(shù)曲細(xì)精管排列正常，基膜正常，支持細(xì)胞正常，少數(shù)曲精小管的各級(jí)生精細(xì)胞數(shù)目減少；中劑量組大多數(shù)曲精小管排列正常，少數(shù)稀疏，間質(zhì)較正常組增寬，各級(jí)生精細(xì)胞數(shù)目減少，管腔內(nèi)精子數(shù)減少；高劑量組曲精小管排列稀疏，間質(zhì)較正常組明顯增寬，部分基膜脫落，曲精小管的各級(jí)生精細(xì)胞數(shù)目呈不同程度的減少，嚴(yán)重時(shí)只有一層，管腔內(nèi)精子數(shù)明顯減少（圖6 B1～D2）。TPT μg/kg5 177。177。本試驗(yàn)中，低劑量和中劑量組的體重及睪丸系數(shù)較對(duì)照組大，高劑量組低于對(duì)照組；附睪系數(shù)變化不明顯。本試驗(yàn)結(jié)果顯示暴露組大鼠附睪內(nèi)精子的畸形率呈上升趨勢(shì)，并且與TPT劑量有嚴(yán)格的依賴性，精子數(shù)量隨著藥物劑量的增加明顯減少，表明TPT干擾精子正常生長(zhǎng)與成熟，對(duì)精子生成具有潛在的不利影響。由于酶的催化是能量產(chǎn)生不可缺少的重要條件，因此正常的精子數(shù)量和質(zhì)量有賴于生精過程中各種酶活性的維持[33]。正常機(jī)體內(nèi)存在一套有效的抗氧化防御系統(tǒng)，可以清除氧自由基及其代謝產(chǎn)物。在此論文撰寫過程中，要特別感謝我的導(dǎo)師——位蘭老師。 謝謝我的父母，沒有他們辛勤的付出也就沒有我的今天，在這一刻，將最崇高的敬意獻(xiàn)給你們！本文參考了大量的文獻(xiàn)資料，在此，向各學(xué)術(shù)界的前輩們致敬！李 偉2011年6月6日外文資料譯文21