【正文】 ｊ 2 調(diào)節(jié)根瘤的形成。對(duì)這一現(xiàn)象的解釋有待進(jìn)一步研究。 國(guó)內(nèi)外大多數(shù)研究表明 :大豆抗花葉病毒的遺傳是由單顯性基因控制的。 大豆花葉病毒病 (ＳｏｙｂｅａｎＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓ ,簡(jiǎn)稱ＳＭＶ )是危害大豆的世界性病害之一 ,在世界各大豆產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生 ,發(fā)病率為 30%～ 60%,嚴(yán)重時(shí)甚至造成大面積絕產(chǎn) [1]。結(jié)果表明 :大豆對(duì) 5 個(gè)ＳＭＶ株系的抗性均受一對(duì)顯性基因控制。 高感 , 30 個(gè)以上 [46. 我國(guó)的鑒定標(biāo)準(zhǔn)基本與美國(guó)一致 , 按根上孢囊數(shù)分為 5 級(jí) : 免疫 , 0。據(jù)報(bào)道 , 抗病品種在病區(qū)連續(xù)種植幾年后 , 抗性逐漸消失 , 這可能是產(chǎn)生了新的小種所致 . 因此 , 種植抗病品種必須交替使用不同品種 , 以防止新小種的產(chǎn)生 , 延長(zhǎng)抗病品種的使用年限。Ｍａｔｔｈｅｗｓ [39]等依據(jù)ＰＢＬＴ 65 兩端序列設(shè)計(jì)了兩個(gè)ＰＣＲ引物 ,將ＲＦＬＰ標(biāo)記轉(zhuǎn)化為ＰＣＲ標(biāo)記 ,并且驗(yàn)證了ＰＣＲ標(biāo)記在抗性鑒定中是非常有效的。(2)抗性鑒定工作量大 。Ｒｉｇｇｓ等建立的生理小種鑒定模式雖被廣泛采用 ,但鑒別寄主中抗性基因的重疊引起 研究者的爭(zhēng)議。 大豆胞囊線蟲 (H eterodera glycines)病是世界上為害大豆生產(chǎn)最嚴(yán)重的病害之一。 與此相反 , 還在一定程度上增加了 G. m osseae 產(chǎn)孢數(shù)量 , 這是十分有趣的 , 對(duì)于 AM 真菌和 SCN 二者之間的生物學(xué)內(nèi)在作用特點(diǎn)值得進(jìn)一步探討。 Gi. m argarita 和 G. intraradices 能降低根上或根圍土壤中的胞囊數(shù)量、根圍土壤中的 2 齡幼蟲數(shù)量及平均每個(gè)胞囊里的卵量 。然而 , 也有部分研究結(jié)果表明所試驗(yàn)的 AM 真菌沒(méi)有顯著抑制植物病原線蟲 , 甚至在一定程度上加重病害 [4 。 Gederm ann 及 G. versif orm e Berch 和 或 大 豆 胞 囊 線 蟲 SCN , H eterodera (g ly cines 4 號(hào)生理小種。 由發(fā)病率、病級(jí)和自接種至最高病情的天數(shù)三個(gè)因子構(gòu)成綜合病情指數(shù) (ＳＤＩ )與聚類和判別分析的分類效果基本一致。 在本試驗(yàn)中 ,免疫、高抗和高感 3種類型兩種方法分級(jí)結(jié)果一致 ,中抗、中間和中感三種類型包括與臨界標(biāo)準(zhǔn)稍有差異的 2個(gè)品種 ,共 7個(gè)品種在兩種分級(jí)方法間存在差異。由發(fā)病率、病級(jí)和自接種至最高病情的天數(shù)三個(gè)因子構(gòu)成的綜合病情指數(shù) (ＳＤＩ )為 ＳＤＩ =(ＩＳ /Ｔ )/(ＩＳ /Ｔ ) 其中分子項(xiàng)Ｉ、Ｓ、Ｔ分別為待鑒定品種的發(fā)病率、病級(jí)以及接種至最高病情所經(jīng)歷天數(shù)。如在同一植株上同時(shí)出現(xiàn)花葉、壞死二種癥狀 ,病級(jí)取級(jí)別高者。而最近的研究發(fā)現(xiàn) ,大豆中不但存在對(duì)ＳＭＶ的質(zhì)量抗性 ,也存在對(duì)ＳＭＶ的數(shù)量 (程度型 )抗性 [1,2]。推廣數(shù)量抗性品種 ,以 5%以下的產(chǎn)量損失 ,換取抗性的穩(wěn)定 ,理論上是可行的 ,今后的問(wèn)題在于盡快培育具有較好數(shù)量抗性的大豆品種。 以往抗大豆花葉病毒 (ＳｏｙｂｅａｎＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓ ,ＳＭＶ )育種著重在抗感染的質(zhì)量抗性 [1]。說(shuō)明株系致病力存在強(qiáng)弱之別， SC N3 株系侵襲力較強(qiáng)， Sa、 N1 株系侵襲力相對(duì)較弱。顯而易見(jiàn)，那些潛育期大于 20 d 的長(zhǎng)潛育期數(shù)量抗性品種將被劃為質(zhì)量抗性品種，如 AGS1邳縣 茶豆過(guò)去認(rèn)為對(duì) Sa 為質(zhì)量抗性，其實(shí)是長(zhǎng)潛育期的數(shù)量抗性品種。美國(guó)弗吉尼亞理工大學(xué)植物病理學(xué)系 Tolin 等也發(fā)現(xiàn)這些現(xiàn)象（個(gè)人交流）。數(shù)量抗性對(duì)病原物的選擇壓力較小，不易引起由優(yōu)勢(shì)小種變更而導(dǎo)致的品種抗性喪失，因而抗性穩(wěn)定而持久。 1 大豆抗病育種 摘要：在發(fā)現(xiàn)大豆對(duì) ＳＭＶ 具有數(shù)量抗性的基礎(chǔ)上，選用 ９６ 份大豆品種材料研究其在接種 Ｓａ、ＳＣ８、Ｎ１、Ｎ３等 ４ 個(gè) ＳＭＶ 株系條件下的發(fā)病率、病級(jí)、潛育期和病害擴(kuò)展速度等４ 個(gè)數(shù)量抗性組分的變異。而數(shù)量抗性則表現(xiàn)為抗擴(kuò)展，病原物可以完成侵染過(guò)程、建立寄生關(guān)系，但潛育期長(zhǎng)、發(fā)病率低、病原繁殖率低、病程發(fā)展慢，最終病情較輕，產(chǎn)量影響較小。試驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)除了不同時(shí)期反應(yīng)型上的差異外，在發(fā)病率、嚴(yán)重度和病情發(fā)展速度上品種間也存在差異。另外在過(guò)去的抗性鑒定中，從接種后的 7 d 開始調(diào)查病情，一般到 20 d左右結(jié)束，在此之前顯癥的判為感病品種，否則為抗病品種。接種 SC8 株系與接種其他株系相比，發(fā)病率、病級(jí)及病情擴(kuò)展速度最高，潛育 6 期最短 , N3 其次， N1 和 Sa 最低。說(shuō)明選育數(shù)量抗性品種對(duì)控制ＳＭＶ危害有實(shí)質(zhì)性意義。這是在人工接種ＳＭＶ的條件下的產(chǎn)量損失 ,在田間自然發(fā)病條件下 ,一般感病品種的產(chǎn)量損失在 15%左右 ,因此可 以推測(cè)數(shù)量抗性品種的產(chǎn)量損失應(yīng)該在 5%以下。以往對(duì)ＳＭＶ質(zhì)量或反應(yīng)型 (免疫 )抗性進(jìn)行了廣泛研究。病級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)按智海劍等 [2]的方法 ,將花葉、壞死二種類型分別考慮 ,各分為 5級(jí)。品種抗性的好壞最終體現(xiàn)在產(chǎn)量損失上 ,產(chǎn)量損失實(shí)際上是各個(gè)抗性組分綜合作用的結(jié)果 ,但產(chǎn)量損失需要一個(gè)完整的生長(zhǎng)季才能鑒定 ,而且容易受環(huán)境因素的影響 ,所以產(chǎn)量損失不作為綜合病情指數(shù)的構(gòu)成因子。感 。該種方法在小麥慢條銹性鑒定中曾有報(bào)道 [7],這種方法也可用于大豆對(duì)ＳＭＶ?jǐn)?shù)量抗性的鑒定。 Sm ith、 G. m osseae N ico lson amp。我國(guó)也相繼觀察到 AM 真菌的數(shù)個(gè)菌種能在 SCN胞囊內(nèi)產(chǎn)孢 , 并有菌絲分布 [3 。本試驗(yàn)表明 G. f asiculatum 能有效地減少胞囊、卵和幼蟲數(shù)量 。在本試驗(yàn)條件下 SCN 似乎不影響 AM真菌在根內(nèi)的泡囊發(fā)育狀況 , 僅 抑制了少數(shù)供試 AM 真菌的侵染 。 —— 李海燕 , 劉潤(rùn)進(jìn) , 束懷瑞，叢枝菌根真菌與大豆胞囊線蟲相互作用研究初報(bào)，植物病理學(xué)報(bào)， 2020， 32（ 4）： 356360 摘要 : 概述了大豆胞囊線蟲生理小種的研究簡(jiǎn)史 , 從鑒別寄主、鑒別寄主生長(zhǎng)環(huán)境、接種物的制備、調(diào)查時(shí)期、方法和鑒定標(biāo)準(zhǔn)等幾個(gè)方面對(duì)大豆 胞囊線蟲生理小種的鑒定技術(shù)進(jìn)行了論述 , 并綜述了掃描電鏡、生物技術(shù)在大豆胞囊線蟲生理小種鑒定上的應(yīng)用進(jìn)展。但由于抗性鑒定工作量大、易受環(huán)境因素影響以及大豆胞囊線蟲群體本身的異質(zhì)性 ,各個(gè)研究者的結(jié)果差異很大 ,具有抗源和組合特異性。但是 ,由于受以下幾個(gè)因素的影響 ,遺傳研究進(jìn)展緩慢 :(1)大豆對(duì)胞囊線蟲的抗性受多對(duì)基因控制 ,環(huán)境變異大 。Ｗｅｉｓｅｍａｎｎ等 (1992)[3 38]找到了一個(gè)與Ｉ位點(diǎn)相距 標(biāo)記ＰＢＬＴ 65。 我國(guó)抗 SCN 育種起步較晚 . 20 世紀(jì) 80 年代以來(lái) , 黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大豆所首先開展了抗大豆孢囊線蟲 3 號(hào)小種的抗源篩選 , 并篩選出抗源哈爾濱小黑豆 [43. 近十幾年來(lái) , 也育成推廣了一批抗或耐病的品種 , 如黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院的“墾豐 1 號(hào)”、吉林白城地區(qū)農(nóng)科所的“白城 2 號(hào)”、山西的“晉豆 11 號(hào)”、河南的“商丘 7608”、山東的“躍進(jìn) 5 號(hào)” [43. 此外黑龍江省大慶市農(nóng)科所以哈爾濱小黑豆為親本 , 選育出高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、適應(yīng)性廣的抗線蟲大豆新品種 —— 慶豐 1 號(hào) [29. 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物所以北京小黑豆、哈爾濱小黑豆為 抗源 , 選育高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)抗線蟲品種 —— 齊黃 25 號(hào)和早熟、高產(chǎn)抗線蟲品種黑豆 2 號(hào)、黃種皮新抗源 40A、 42A 系列品系 , 還選育出農(nóng)藝性狀優(yōu)良、高抗 SCN 褐色種皮的齊茶豆 1 號(hào) (濟(jì) 3045)等茶豆系列品系 [42, . 遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所以遼豆 10(感病 )為母本 , Frankling(抗病 )為父本進(jìn)行有性 43 ]雜交 , 選育出在疫區(qū)比對(duì)照品種增產(chǎn) 25% 以上 , 高抗 1 號(hào)、 3 號(hào)生理小種的品系各 5 個(gè) [3. 王連錚等 [44 進(jìn)行了大豆抗孢囊線蟲 4 號(hào)生理小種 的品種選育 , 初步育成了 RN 01 和中作 RN 05 等農(nóng)藝性狀表現(xiàn)良好的抗病品種 . 這些抗病或耐病品種在發(fā)病條件下比生產(chǎn)上的常規(guī)品種一般增產(chǎn) 10% 30%。 中抗 , 6 10 個(gè) 。 感病 , 大于 60%. 中國(guó)最龐大的資料庫(kù)下載 常規(guī)的鑒定方法依賴于根上的孢囊數(shù) , 其鑒定的原則是準(zhǔn)確、快速 , 但鑒定環(huán)節(jié)最佳化 , 包括鑒定期間寄主和寄生物生長(zhǎng)環(huán)境最適化 , 均勻一致有強(qiáng)感染力的同質(zhì)接種物的制備方法和簡(jiǎn)便、快速、定量的接種技術(shù)是當(dāng)前常規(guī)鑒定方法的技術(shù)關(guān)鍵 [47. 如果在常規(guī)鑒定的同時(shí)能結(jié)合生化和分子生物學(xué)的方法進(jìn)行 ,對(duì)于獲得準(zhǔn)確的鑒定結(jié)果將有極大的幫助 . Pavlova [51 ]根據(jù)抗感品種根部 POD 和 SOD 活性研究認(rèn)為 , 呼吸酶的差異可作為抗線蟲品種選擇的一個(gè)因子 . Kim et al [52 ]報(bào)道了過(guò)氧化物同工酶酶譜與抗孢囊線蟲的關(guān)系 , 抗病品種的第 5 條譜帶較厚而感病品種則較薄 . 這表明與抗性相關(guān)的酶活性及同工酶譜的變化 , 可作為抗性篩選的生化標(biāo)記 . 分子生物學(xué)的發(fā)展 , 尤其是 DNA 分子標(biāo)記的出現(xiàn) , 為分子標(biāo)記輔助育種的抗性鑒定方法提供了更廣闊的前 景 . 這一部分已在“ 1. 2”中詳細(xì)論述 . 此外 , 郭金平 [53 利用 PCR 技術(shù)對(duì)甘薯的抗感線蟲病基因進(jìn)行了分子檢測(cè) , 發(fā)現(xiàn)經(jīng)線蟲病常規(guī)鑒定的甘薯品種出現(xiàn)特異條帶 , 而經(jīng)常規(guī)鑒定為感病的甘薯品種不出現(xiàn)特異條帶 , PCR 檢測(cè)結(jié)果與線蟲病常規(guī)鑒定基本一致 , 吻合度達(dá) 90. 91%. 目前利用抗線蟲病基因同源特異序列的 PCR 技術(shù)進(jìn)行大豆抗孢囊線蟲的分子鑒定在國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道 . —— 陳觀水，陸熙園，吳揚(yáng)等，大豆抗孢囊線蟲病育種研究進(jìn)展，福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)， 2020，32（ 2）： 156161 14 此資料來(lái)自企業(yè) —— 宛煜嵩，王珍，中國(guó)大豆孢囊線蟲抗性研究進(jìn)展，分子植物育種，2020， 2（ 5）： 609619 摘 要 :以科豐 1 號(hào)南農(nóng) 1138 2 為親本構(gòu)建的ＲＩＬ群體ＮＪＲＩＫＹ為材料 ,對(duì)群體進(jìn)行了 5 個(gè)ＳＭＶ株系 (Ｓａ、Ｓｃ Ｓｃ Ｎ Ｎ 3)的抗病性鑒定。它們與Ｒｎ Ｒｎ 3 的距離分別為 15 04ｃＭ、17 82ｃＭ、 15 37ｃＭ和 16 14ｃＭ、 17 82ｃＭ、 16 58ｃＭ。 χ ｃ 2=Σ (｜Ｏ Ｅ｜ 0 5)2 /Ｅ )Ｏ為觀察值 ,Ｅ為理論值。特別是Ｒｓａ ,在連鎖分析時(shí) ,它與兩個(gè)ＲＦＬＰ標(biāo)記Ｗ 051Ｈ、Ｗ 052Ｈ都不連鎖。Ｒｍｄ抗白粉病 (Ｍｉｃｒｏｓｐ ｈａｅｒａｄｉｆ ｆｕｓａ )。 寄主對(duì)病原物的抗性可分為質(zhì)量抗性和數(shù)量抗性。 １．２ 試驗(yàn)方法 １．２．１ 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 2020 年將供試品種播于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)站防蟲網(wǎng)室，完全隨機(jī)排列， 2 次重復(fù)。 花葉型： 0 級(jí)：免疫、無(wú)癥狀或僅在接種葉上出現(xiàn)局部枯斑； 1 級(jí)：輕花葉； 2 級(jí)：黃斑花葉、葉片輕度皺縮； 3 級(jí)：重花葉、葉片皺縮卷曲； 4 級(jí)：葉片嚴(yán)重皺縮且植株矮化。另外在過(guò)去的抗性鑒定中，從接種后的 7 d 開始調(diào)查病情，一般到 20 d 左右結(jié)束，在此之前顯癥的判為感病品種，否則為抗病品種。接種 SC8 株系與接種其他株系相比，發(fā)病率、病級(jí)及病情擴(kuò)展速度最高，潛育期最 短 , N3 其次， N1 和 Sa 最低。因此 ,對(duì)抗擴(kuò)展育種應(yīng)予以重視。它實(shí)際上反映在抗 SMV 擴(kuò)展方面數(shù)量上的差異。通過(guò)簡(jiǎn)單雜交或回交結(jié)合鑒定選擇即可把抗性基因?qū)胄碌拇蠖蛊贩N。在沒(méi)有系統(tǒng)鑒定大豆花葉病毒株系以及明確大豆對(duì) SMV 的抗性遺傳之前 ,育種工作者 所采取的育種策略是在自然條件下選擇田間抗病性相對(duì)優(yōu)良的品種做親本 ,在雜交后代中在選擇農(nóng)藝性狀的同時(shí) ,選擇抗性較好的個(gè)體以及家系形成新的品種。韓國(guó) 抗 SMV 品種便經(jīng)歷了一個(gè)從抗病到感病的興衰循環(huán)過(guò)程。由于抗病品種對(duì)株系的選擇以及病原物可能產(chǎn)生的致病性突變 ,株系結(jié)構(gòu)處于不斷變化過(guò)程中。因此 ,選育和推廣抗侵染大豆品種要承擔(dān)導(dǎo)致SMV 流行的風(fēng)險(xiǎn)。 5 品種更替速度與抗 SMV 育種方案的選擇 大豆花葉病毒流行的初侵染來(lái)源主要是帶病毒種子長(zhǎng)出的病苗 ,再侵染則依靠介體蚜蟲的傳播。 隨著對(duì)不同抗性基因分子標(biāo)記研究的深入以及株系變化監(jiān)測(cè)水平的提高 ,轉(zhuǎn)移一個(gè)抗病基因的難度和所需時(shí)間將大大下降。 6 綜合兩類抗性的育種方法 抗侵染育種通過(guò)抗源親本與農(nóng)藝親本的雜交或回交 ,分離世代在人工接種主要流行株系的條件下鑒定選擇。結(jié)果表明，花葉抗病組合接種 SC8 株系后， F1 表現(xiàn)