取小鼠腦組織(完整版)
【正文】 縮（這是因為蛋白變性所致），一般看起來像動物活過來了一樣。如果肝素的純度不高，或過期，所用的劑量應增大2～3倍。每瓶500ml的生理鹽水加入80mg的肝素鈉，肝素鈉要避光保存，而且必須使用前臨時加入到生理鹽水中。另：開胸時動作盡量要快；針頭可以不插入主動脈，留置于左室也行。（小鼠的用量沒這么多）8）沒有灌流器的用注射器或者吊瓶都可以。具體操作如下：實驗操作步驟：1)先麻醉小鼠剪開胸腔，找到心臟，從心尖入針，剪開右心耳先用生理鹽水灌注直到從心耳流出來的水清亮了再改用固定液（一般是4%多聚甲醛）灌注至小鼠四肢僵硬小鼠只需要用注射器就行了，我做的25～35g的小鼠一般用50mLNS+30mL多聚甲醛。丁香園上面總結的方法，排版有點亂。具體步驟：常規(guī)麻醉小鼠，將其固定，用剪刀剪開胸部皮膚，暴露出皮下組織，剪開時注意鈍性分離，以免誤傷。解剖小鼠，暴露心臟。6)試劑名稱：4%多聚甲醛磷酸二氫鈉/氫氧化鈉所需藥品及劑量：A液：多聚甲醛 40g 蒸餾水 400ml B液：Na2HPO4肝素鈉生理鹽水需要用4度預冷。用于試管內(nèi)抗凝時，一般可配成1%肝素生理鹽水溶液，加熱80℃烘干，每管能使5～10 ml血液不凝固。隨后就可以將動物的頭斷掉，來取腦了。我個人感覺每個濃度需要沉糖48h。至于不灌注，存留的血液可能會影響結果，我一般斷頭后用生理鹽水把血液沖洗干凈，然后再敲開露骨取腦，這樣，效果會好些。這是別人介紹的，個人沒有試過。冰凍切片方面：灌注沖血可以用生理鹽水、 （注意調(diào)pH值）。關于多聚甲醛灌注以后，確實對于石蠟切片可以固定很久，但是如果做組化的話，一般都是24小時，時間長的話，比如超過1周，可能抗原就會丟失，不容易出結果。第五：可否不進行灌注和固定，直接動物麻醉，斷頭處死，然后直接80度冰箱，用的時候取出，OCT包埋，切完片子后丙酮固定510min啊，我做心肌組織的時候就是這樣做的，結果非常好。但是看文獻上好像做腦的組化都進行了灌注固定，不知其中有何奧秘？？內(nèi)容總結
（1）丁香園上面總結的方法，排版有點亂
（2）用于試管內(nèi)抗凝時，一般可配成1%肝素生理鹽水溶液，加熱80℃烘干，每管能使5～10 ml血液不凝固
（3）作全身抗凝時，一般劑量為：～3 mg因為沒有做過大腦，所以我的問題是：第一：蔗糖溶液是否需要和多聚甲醛溶液一樣一般是20倍體積于組織？第二：這個時候的腦組織是否是和石蠟塊里的腦組織一樣，保存時間可以很長，會不會很快出現(xiàn)抗原丟失的問題?？焖贈_到肝臟變白或者右心耳流出的液體變白為止。脫水不好的話會使片子出現(xiàn)冰晶。你在斷頭后用生理鹽水把血液沖洗干凈，然后再敲開
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