人骨形成蛋白-7成熟肽cdna的克隆和序列測(cè)定(精)(完整版)
【正文】 family〔J〕 . EMBO J, 1990。為進(jìn)一步闡明BMP?7結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系，研究其在腎臟、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育及造血系統(tǒng)中的作用，克隆BMP7成熟肽基因很有必要。②能抑制胚胎癌性細(xì)胞(ECC)的增殖，誘導(dǎo)其分化，可能對(duì)一些干細(xì)胞腫瘤有治療價(jià)值。 2 結(jié)果 ，利用自行設(shè)計(jì)的一對(duì)引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增hBMP7成熟肽基因。PCR擴(kuò)增引物自行設(shè)計(jì)，由上海生物工程中心合成。由于hBMP?7在神經(jīng)系統(tǒng)及造血組織中的特殊作用，故其在基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用中具有廣闊的前景。我們采用自行設(shè)計(jì)合成的一對(duì)特異性引物，以骨肉瘤的λgt11噬菌體表達(dá)文庫(kù)為模板，通過(guò)PCR擴(kuò)增到hBMP?7成熟肽的cDNA。引物的序列如下： P1：5′TTTAAATGTCCACGGGGAGCAAAC3′。經(jīng)兩段反應(yīng)共35個(gè)循環(huán)后，用15g/L瓊脂糖凝膠電泳鑒定，獲得約440bp的特異條帶，與預(yù)期的大小相一致(1)。③對(duì)牙齒的修復(fù)、形成有重要作用?！ ∥覀円怨侨饬黾?xì)胞U2OS的λgt11噬菌體表達(dá)文庫(kù)為模板，利用自行設(shè)計(jì)的一對(duì)引物，僅一輪擴(kuò)增即得到單1條帶。 9: 2085－ 2093. 〔3〕 Reissmann E, Ernsberger U, Francis? West PH, et al. Involvement of BMP4 and BMP7 in differentiation of the adrenergic phenotype in developing sympathetic neurons〔J〕 . Development, 1996。 69(2):129－ 137. 〔5〕 Arkell R, Beddington RS. BMP? 7 influences pattern and growth of the developing hind? brain of mouse embryos〔J〕 . Development, 1997。將擴(kuò)增產(chǎn)物以平端克隆入載體pGEM?3zf()，可避免由于酶切處
醫(yī)療健康相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1