王鏡巖生物化學(xué)課件ppt-第14、15章核酸的物理化學(xué)性質(zhì)(完整版)
【正文】 粘度和酸堿性質(zhì)Chapter13 核酸的物理化學(xué)性質(zhì) 分子量在數(shù)百至數(shù)百萬(wàn)之間；微溶于水，不溶于有機(jī)溶劑；變性時(shí)粘度降低；核酸的堿基、核苷和核苷酸均能發(fā)生解離。n 能夠引起核酸變性的因素很多。因而測(cè)定 Tm值，可反映 DNA分子中 G, C含量，可通過(guò)經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算：n （ G+C)%=() 影響 DNA Tm大小的因素： DNA的均一性； G—C 的含量；介質(zhì)中的離子強(qiáng)度。 分子量越大復(fù)性越難。分離 DNA常用氯化銫密度梯度；分離 RNA常用蔗糖密度梯度；應(yīng)用啡啶嗅紅 氯化銫密度梯度平衡超離心可將不同構(gòu)象的 DNA、 RNA及蛋白質(zhì)分開(kāi)，是實(shí)驗(yàn)室最常用的純化質(zhì)粒 DNA的方法請(qǐng)看 515頁(yè)Chapter13 核酸的物理化學(xué)性質(zhì)六、核酸的凝膠電泳 瓊脂糖凝膠電泳： 分析分子量大于 1000bp的 DNA片段請(qǐng)看 516頁(yè) 聚丙烯酰胺凝膠電泳：分析分子量小于 1000bp的 DNA片段七、 DNA的固相合成 520頁(yè)八、 DNA的限制酶圖譜限制性內(nèi)切酶 來(lái)源于細(xì)菌，高度專一地識(shí)別外源 DNA上的特定位點(diǎn)，并將其切斷，形成形成粘性末端或平齊末端。因?yàn)樵谧陨硐鄳?yīng)位點(diǎn)上經(jīng)甲基化修飾而受到保護(hù)。此外， DNA的復(fù)性也與它本身的組成和結(jié)構(gòu)有關(guān)。n DNA變性后，它的一系列性質(zhì)也隨之發(fā)生變化，如紫外吸收 (260 nm)值升高 , 粘度降低等。 變性與降解的區(qū)別：是否涉及共價(jià)鍵的斷裂和
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