11dna重組技術(shù)的基本工具1(完整版)
【正文】 重組技術(shù)。 ( 2 ) 種類 ?? 重點(diǎn) : 基因重組技術(shù)所需的三種基本工具。 難點(diǎn) : 基因工程載體需要具備的條件。 ?? ?? ?? ?? DN A 連接酶 : 從 大腸桿菌 中分離得 到 , 只連接互補(bǔ)的 黏性 末端T4DN A 連接酶 : 從 T4噬菌體 中分離出來 , 對(duì) 于兩種末端都能連接 , 但對(duì) 平末端 連接效 率比較低 3 .載體 —— “ 分子運(yùn)輸車 ” ( 1 ) 最常用的載體是 質(zhì)粒 , 它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌 擬核 DN A 之外 , 并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀 D N A 分子。 DNA 體外重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)。 ? 什么叫基因工程？ 基因工程又叫 基因拼接技術(shù) 或 DNA重組技術(shù) 。 ?如果把兩種來源不同的 DNA用同一種限制酶來切割，會(huì)怎樣呢？ 會(huì)產(chǎn)生 相同的黏性末端 ，然后讓兩者的黏性末端 黏合 起來，就似乎可以合成重組的DNA分子了。限制性核酸內(nèi)切酶能夠識(shí)別雙鏈 DNA分子的某種特定核苷酸序列 ,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開 ,因此具有專一性。E ? 外源基因 (如抗蟲基因 )怎樣才能導(dǎo)入受體細(xì)胞 (如棉花細(xì)胞 )？ 導(dǎo)入過程需要運(yùn)輸工具 —— 運(yùn)載體 。 5) 載體 DNA分子大小應(yīng)適合 ,以便提取和在體外進(jìn)行操作 ,太大就不便操作 . — ”分子運(yùn)輸車” 常用的運(yùn)載體主要有兩類： 1）細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)的 質(zhì)粒 2） λ噬菌體 的衍生物 或某些 動(dòng)植物病毒 質(zhì)粒： 質(zhì)粒是染色體外能夠進(jìn)行 自主復(fù)制 的遺傳單位，包括真核生物的細(xì)胞器和細(xì)菌細(xì)胞中核區(qū)外的 DNA分子。二是利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行復(fù)制。②有一個(gè)或多個(gè) 限制酶 切割位點(diǎn) ,便于供源 DNA的插入 . ③具有 標(biāo)記 基因 ,供重組 DNA的鑒定和選擇 . 1 . 基因工程的最終目的是 ( ) 。一般來說 ,質(zhì)粒的存在與否對(duì)宿主細(xì)胞的生存沒有決定性作用。 答案 : B 5 . 下表關(guān)于基因工程中有關(guān)的名詞及對(duì)應(yīng)的內(nèi)容 , 正確的組合是 ( ) 。可見 ,基因工程的目的是定向地改造生物的遺傳性狀。天然質(zhì)粒 D NA 分子都要經(jīng)過人工改造 ,才能用作基因工程的載體。 質(zhì)粒 是基因工程 最常用的運(yùn)載體 。 作用二： 利用運(yùn)載體在受體細(xì)胞 (棉花細(xì)胞 )內(nèi)， 對(duì)外源基因 (抗蟲基因 )進(jìn)行 大量復(fù)制 。 5 . DNA 連接酶與 DN A 聚合酶是一回事嗎 ? 為什么 ? 提示 :兩者不是一回事 ,它們的主要差別表現(xiàn)在 : ( 1 ) DNA 聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的 DNA 片段的 339。 DNA 分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的 DNA 片段末端通常有兩種形式 —— 黏性末端和平末端。 1 .你能推測限制酶在原核生物中的作用是什么嗎 ? 提示 :原核生物容易受到自然界外源 DNA 的入侵 ,但是 ,生物在長期的進(jìn)化過程中形成了一套完善的防御機(jī)制 ,以防止外來病原體的侵害。 （一）基因工程的概念 基因拼接技術(shù)或 DNA重組技術(shù) 生物體外 基因 DNA分子水平 人類需要的基因產(chǎn)物 剪切 拼接 導(dǎo)入 表達(dá) 基因重組 ? 基因工程培育抗蟲棉的簡要過程： 普通棉花 (無抗蟲特性 )
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