細胞工程第4章(3)動物細胞培養(yǎng)工程4(完整版)
【正文】 4bp， 14個外顯子 ， 13個內(nèi)含子 ， tPA由 527個氨基酸 ， 單鏈糖蛋白 ， 開始 酵母表達 ， 不能分離純化 tPA突變體，由雙鏈糖蛋白， 現(xiàn)用 CHO細胞高效表達成功（參見下圖） B、 β干擾素（ IFNβ） 最早 ， 為一種在同種細胞上具有廣譜抗病 毒活性的蛋白質(zhì) ， 普遍存在于個體脾 、 肝 、 腎 、 淋巴細胞 、 骨髓 ， 被多因素誘發(fā) ， 現(xiàn)為 一組多功能細胞因子 ， 具有抗病毒 、 腫瘤活 性 ， 調(diào)節(jié)免疫反應 ， 控制細胞生長與分化 ， 天然 IFNβ—— 刺激體外培養(yǎng)人成纖維細胞 ， 大腸桿菌表達 ， 活性低 ， 不穩(wěn)定 ， Cys17形成二硫鍵 ， 缺少 NMet， 無糖基化 重組 IFNβ 點突變改造 ， 使 Cys17變?yōu)橹行园被?， 如：絲 、 酪氨酸 ， 商品名為： IFNβ1b CHO細胞表達，與天然一樣，天然糖基化， 分離簡單。 B、主要內(nèi)容： 生產(chǎn)工藝的放大、生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性和重復性?；虻霓D(zhuǎn)移可通過物理或化學的方 法，也可通過各種病毒或非病毒載體的介導， 還可通過改造細胞（造血干細胞、成纖維細 胞、骨髓肌細胞、肝細胞、神經(jīng)細胞）進行 細胞治療。 4． 6． 2 基本原理 A、代謝網(wǎng)絡理論 ? 細胞代謝網(wǎng)絡由上萬種酶催化的系列反應系 統(tǒng)、膜傳遞系統(tǒng)、信號傳遞系統(tǒng)組成，并且既受 精密調(diào)節(jié)，又互相協(xié)調(diào)； ? 代謝網(wǎng)絡分泌處的代謝產(chǎn)物稱為節(jié)點。 C、初步研究： 首先必須較快建立一個基本（不要求是最優(yōu)）的細 胞培養(yǎng)工藝。 A、神經(jīng)系統(tǒng)疾病的基因或細胞治療： B、造血干細胞治療癌癥 HSC基因（參見下圖） 胰島素依賴型 （ I） C、 細胞 、 基因 代謝 治療糖尿病 紊亂
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