細(xì)胞工程第4章(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)工程4(完整版)
【正文】 4bp， 14個(gè)外顯子 ， 13個(gè)內(nèi)含子 ， tPA由 527個(gè)氨基酸 ， 單鏈糖蛋白 ， 開始 酵母表達(dá) ， 不能分離純化 tPA突變體，由雙鏈糖蛋白， 現(xiàn)用 CHO細(xì)胞高效表達(dá)成功（參見下圖） B、 β干擾素（ IFNβ） 最早 ， 為一種在同種細(xì)胞上具有廣譜抗病 毒活性的蛋白質(zhì) ， 普遍存在于個(gè)體脾 、 肝 、 腎 、 淋巴細(xì)胞 、 骨髓 ， 被多因素誘發(fā) ， 現(xiàn)為 一組多功能細(xì)胞因子 ， 具有抗病毒 、 腫瘤活 性 ， 調(diào)節(jié)免疫反應(yīng) ， 控制細(xì)胞生長(zhǎng)與分化 ， 天然 IFNβ—— 刺激體外培養(yǎng)人成纖維細(xì)胞 ， 大腸桿菌表達(dá) ， 活性低 ， 不穩(wěn)定 ， Cys17形成二硫鍵 ， 缺少 NMet， 無糖基化 重組 IFNβ 點(diǎn)突變改造 ， 使 Cys17變?yōu)橹行园被?， 如：絲 、 酪氨酸 ， 商品名為： IFNβ1b CHO細(xì)胞表達(dá)，與天然一樣，天然糖基化， 分離簡(jiǎn)單。 B、主要內(nèi)容： 生產(chǎn)工藝的放大、生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性和重復(fù)性。基因的轉(zhuǎn)移可通過物理或化學(xué)的方 法，也可通過各種病毒或非病毒載體的介導(dǎo)， 還可通過改造細(xì)胞（造血干細(xì)胞、成纖維細(xì) 胞、骨髓肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞）進(jìn)行 細(xì)胞治療。 4． 6． 2 基本原理 A、代謝網(wǎng)絡(luò)理論 ? 細(xì)胞代謝網(wǎng)絡(luò)由上萬種酶催化的系列反應(yīng)系 統(tǒng)、膜傳遞系統(tǒng)、信號(hào)傳遞系統(tǒng)組成，并且既受 精密調(diào)節(jié)，又互相協(xié)調(diào)； ? 代謝網(wǎng)絡(luò)分泌處的代謝產(chǎn)物稱為節(jié)點(diǎn)。 C、初步研究： 首先必須較快建立一個(gè)基本（不要求是最優(yōu)）的細(xì) 胞培養(yǎng)工藝。 A、神經(jīng)系統(tǒng)疾病的基因或細(xì)胞治療： B、造血干細(xì)胞治療癌癥 HSC基因（參見下圖） 胰島素依賴型 （ I） C、 細(xì)胞 、 基因 代謝 治療糖尿病 紊亂
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