免疫組織化學(xué)技術(shù)-免疫組織化學(xué)方法(完整版)
【正文】 放 20℃ 保存。 (4)切片刀要快 (5)編上號(hào) (6)切片可在 4℃ 保存數(shù)年 冰凍切片： (1)冰凍切片分固定和新鮮組織，固定組織需經(jīng)庶糖處理 24h，冰凍切片。 ? 大組織： 75％乙醇 30～ 120min， 85％乙醇 30～120min， 95％醇 Ⅰ 2h ， 95％乙醇 Ⅱ 2h ， 95％乙醇Ⅲ 過(guò)夜，無(wú)水乙醇 Ⅰ30 ～ 60min，無(wú)水乙醇 Ⅱ30 ～60min，無(wú)水乙醇 Ⅲ60min ～ 120min，二甲苯 Ⅰ 、 Ⅱ和 Ⅲ 各 15min（可視觀察結(jié)果而定），石蠟 Ⅰ30min石蠟 Ⅱ1 ～ 2h，石蠟 Ⅲ2 ～ 3h。 （ 4） 固定劑兼有硬化作用、使組織硬化、增加組織硬度、便于制 片。 （ 2） 使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖和酶等各種抗原成份轉(zhuǎn)變成不溶 性物質(zhì)，以保持它原有的結(jié)構(gòu)與生活時(shí)相仿。 (7)PLPD固定液 取 PLP固定液 25ml，加入 %重鉻酸 25ml。 （ 3）鉻礬明膠液：鉻礬 明膠 5g H2O2 1000ml （ 4）甲醛明膠液： 40％甲醛 明膠 H2O2 100ml ? 切片： 石蠟切片： (1)連續(xù)切片按序貼在玻片的下 1/3。 細(xì)胞涂片制作 ? 離心將細(xì)胞收集出來(lái)，用預(yù)冷的 PBS洗2－ 3遍，最后用 PBS將細(xì)胞重懸。 ④ （ ），真空負(fù)壓干燥箱預(yù)先調(diào)至 95℃ ，真空負(fù)壓處理 10分鐘。 ② %H2O2甲醇處理切片 10分鐘。 ④切片放入 （ ）中，邊同容器一起放入水溶鍋中加熱，其間應(yīng)不斷用溫度計(jì)測(cè)其溫度，待抗原修復(fù)液的溫度達(dá)到有效溫度后（ 92℃↑ ）。 ? 胃蛋白酶消化法： ①切片脫蠟至水。 ② %H2O2甲醇處理切片 10分鐘。 PBS或抗體稀釋液稀釋的抗體：一般 只可放置 12個(gè)月。 孵育時(shí)間太短，或孵育溫度太低。 11:23:1311:23:1311:23Friday, February 10, 2023 1乍見(jiàn)翻疑夢(mèng)，相悲各問(wèn)年。 :23:1311:23Feb2310Feb23 1世間成事，不求其絕對(duì)圓滿，留一份不足，可得無(wú)限完美。 11:23:1311:23:1311:232/10/2023 11:23:13 AM 1越是沒(méi)有本領(lǐng)的就越加自命不凡。 上午 11時(shí) 23分 13秒 上午 11時(shí) 23分 11:23: MOMODA POWERPOINT Lorem ipsum dolor sit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis amet, consectetur adipiscing eli
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1