【正文】 小而亮，遠(yuǎn)離光軸方向形成逐漸增寬且亮度減弱的模糊尾部，形如彗星，稱為彗差。 透 鏡 的 畸 變 (二 )、 色 差 色差 (chromatic aberration )是一種由白光或復(fù)色光經(jīng)透鏡成像時(shí)，會(huì)因各種色光存在著光程差而造成顏色不同、位置不重合、大小不一致的不同成像效果，從而造成像和物的較大失真。 誘發(fā)熒光：一些細(xì)胞成分本身經(jīng)紫外線照射后不發(fā)熒光，但用熒光染料（酸性品紅、甲基綠、吖叮橙等熒光色素）進(jìn)行活體染色或固定后切片染色，就能在熒光鏡下看見熒光，這種熒光叫誘發(fā)熒光。 如相板的環(huán)形區(qū)使直射光滯后 1/4λ，加上開始直射光超前的 1/4λ，兩者相抵直射光不發(fā)生變化，直射光和偏折光無相位變化，形成的合成波振幅增加，產(chǎn)生明反差。 利用它可以清楚地觀察到纖維絲、紡錘體、膠原、染色體、卵巢、骨骼、毛發(fā)、活細(xì)胞的結(jié)晶或液晶態(tài)的內(nèi)含物、神經(jīng)纖維、肌肉纖維、植物纖維等的細(xì)微結(jié)構(gòu)，從而可以分析細(xì)胞、組織的變化過程。 在顯微鏡載物臺(tái)上加一個(gè)微量步進(jìn)馬達(dá)，使載物臺(tái)上下移動(dòng)，改變焦平面，不同層次的光切面圖像經(jīng)計(jì)算機(jī)圖像三維重組，就能獲得樣品的立體結(jié)構(gòu)圖像。 最后光束穿過第二個(gè)偏振裝置 (檢偏器 )，檢偏器將兩束垂直的光波組合成具有相同偏振面的兩束光，使二者發(fā)生干涉。 近場(chǎng)掃描光學(xué)顯微鏡技術(shù)將對(duì)研究活體中的病毒和染色體等生物物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和形態(tài)發(fā)揮作用。 常用的電子槍由常用的是熱陰極三極電子槍，它由發(fā)夾形鎢絲陰極、柵極帽和陽極組成。 (三 ) 供 電 系 統(tǒng) 供電系統(tǒng)包括高壓電源、真空系統(tǒng)供電電源、透鏡電源、輔助電源及安全保護(hù)系統(tǒng)的電源等。透射電子顯微鏡分辨本領(lǐng)的高低主要取決于物鏡。 3. ＴＥＭ的結(jié)構(gòu) —— 成像系統(tǒng) 投影鏡的作用是把經(jīng)中間鏡放大（或縮?。┑南襁M(jìn)一步放大，并投影到熒光屏上，它和物鏡一樣，是一個(gè)短焦距的強(qiáng)磁透鏡。 消像散器 4. 透 射 電 鏡 的 主 要 部 件 在透射電子顯微鏡中有許多固定光闌和可動(dòng)光闌，它們的作用主要是擋掉發(fā)散的電子，保證電子束的相干性和照射區(qū)域。針尖的大小、形狀和化學(xué)同一性不僅影響著掃描隧道顯微鏡圖像的分辨率和圖像的形狀，而且也影響著測(cè)定的電子態(tài)。 (一 ) 油鏡的使用： 用低倍鏡看清圖像后，將所要觀察的結(jié)構(gòu)移至視野中央，在標(biāo)本所要觀察的部位滴一滴鏡油，旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，將油鏡頭對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)孔，使油鏡頭下端與鏡油接觸，然后，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)螺旋，即可看清物像。 ，應(yīng)該用擦鏡紙擦，不允許用口吹、手指抹，或用其它紙、布擦。 五、顯微攝影的三大技術(shù)要領(lǐng) 1. 取景對(duì)焦 2. 正確曝光 3. 增強(qiáng)反差 1. 取 景 對(duì) 焦 顯微攝影通過取景器的測(cè)視目鏡，確定拍攝的范圍及物體影像在底片上的大小。因此，在光路中通過增加濾色鏡來控制照明光線以及增加底片上的反差是很有必要的。 2. 正 確 曝 光 曝光是顯微攝影中的重要關(guān)鍵。 利用顯微攝影裝置拍攝顯微鏡 (或解剖鏡 )視野中物像的技術(shù)稱為 顯微攝影 。 用完油鏡后，必須用擦鏡紙蘸清洗劑，將鏡頭和玻片擦凈。 ⑤ 配合掃描隧道譜可以得到有關(guān)表面結(jié)構(gòu)的信息 (四 ) 超高壓電子顯微鏡 第四節(jié) 顯微鏡的維護(hù)、常見故障及其排除 一、顯微鏡的使用 二、顯微鏡的維護(hù) 三、顯微鏡的常見故障及排除 四、顯微鏡拆裝的注意事項(xiàng) 五、電子顯微鏡的維護(hù) (一 ) 低倍鏡的使用： ：轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)螺旋，降低載物臺(tái)；旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，使 10倍物鏡頭對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)孔；然后升高聚光鏡，打開光圈，將反光鏡的凹面對(duì)準(zhǔn)光源，直至視野明亮為止。 （二） 掃描電子顯微鏡 （ Scanning electron Microscope， SEM ） 1. 掃 描 電 鏡 的 工 作 原 理 掃描電子顯微鏡的工作原理是用一束極細(xì)的電子束掃描樣品，在樣品表面激發(fā)出次級(jí)電子，次級(jí)電子由探測(cè)體收集，并在那里被閃爍器轉(zhuǎn)變?yōu)楣庑盘?hào)，再經(jīng)光電倍增管和放大器轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)來控制熒光屏上電子束的強(qiáng)度，顯示出與電子束同步的掃描圖像。因?yàn)槌上耠娮邮M(jìn)入投影鏡時(shí)孔鏡角很小，因此它的景深和焦距都非常大。欲獲得物鏡的高分辨率，必須盡可能降低像差。 (五 ) 觀 察 顯 示 系 統(tǒng) 觀察顯示系統(tǒng)由熒光屏和照相室兩部分組成。一般都采用雙聚光鏡系統(tǒng)。這就需要一種更大分辮力的儀器來觀察比?m更小的物體的微細(xì)結(jié)構(gòu)。于是在灰色的背景上，標(biāo)本結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)明暗差。 偏振器直接裝在聚光系統(tǒng)的前面，使光線發(fā)生線性偏振。即光源前有偏振片（起偏器），使進(jìn)入顯微鏡的光線為偏振光，鏡筒中有檢偏器（一個(gè)偏振方向與起偏器垂直的起偏器）。 倒置顯微鏡 五、暗 場(chǎng) 顯 微 鏡 暗視野顯微鏡（ dark field microscope）的聚光鏡中央有檔光片，使照明光線不直接進(jìn)入物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡，因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。 活細(xì)胞和未染色的標(biāo)本由于光的波長和振幅不發(fā)生變化，人眼看不到，但其相位有變化，因此利用光的干涉和衍射效應(yīng)把透過標(biāo)本不同區(qū)域的光波光程差轉(zhuǎn)變成振幅差，使細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間呈現(xiàn)清晰可見的明暗對(duì)比。來自物鏡的光線經(jīng)棱鏡組分光成兩束平行光束，進(jìn)入目鏡，雙目顯微鏡必須滿足分光后兩束光的光程必須相同和兩束光的光強(qiáng)度大小一致這兩個(gè)基本要求。 一般來說，透鏡像散隨透鏡形狀、光闌位置而異，可以用正、負(fù)透鏡適當(dāng)組合而消除。 一般情況下，物鏡的數(shù)值孔徑赿大，其工作距離赿小。 （ 2）用短波長的光照射 如紫外光顯微鏡，電子顯微鏡。第一章 顯微鏡技術(shù)和顯微鏡 掌握常用顯微鏡的結(jié)構(gòu)及性能特點(diǎn) 熟悉顯微 技術(shù)的基 礎(chǔ)理論， 顯微鏡的 應(yīng)用 了解顯微鏡的維護(hù)，顯微技術(shù)的進(jìn)展 教 學(xué) 基 本 要 求 內(nèi) 容 提 要 第一節(jié) 光學(xué)顯微鏡 第二節(jié) 光學(xué)顯微鏡的分類及其應(yīng)用 第三節(jié) 電子顯微鏡 第四節(jié) 顯微鏡的維護(hù) 、常見故