12第六章-細胞培養(yǎng)(完整版)
【正文】 培養(yǎng)單細胞的培養(yǎng)基將細胞密度調(diào)至最終培養(yǎng)時的 植板密度的兩倍 . (3)將與上述液體培養(yǎng)基成分相同但加入 %～ 1%瓊脂的 培養(yǎng)基加熱 ,使瓊脂融化 ,然后冷卻至 350C恒溫水 浴中保溫 . (4).將這種培養(yǎng)基與上述細胞懸浮培養(yǎng)液等體積混合 均勻 .迅速注入并使之平展于培養(yǎng)皿中 (約 1mm厚 ).封口 . (5).將培養(yǎng)皿置于顯微鏡下觀察 .標記各單個細胞 .一般 分離出純單細胞無性系 .培養(yǎng) . 植板效率 =形成的細胞團數(shù) /植板的細胞總數(shù) 100% 最適密度 臨界密度 幾個相關(guān)概念： 利用生長的愈傷組織所產(chǎn)生的物質(zhì)來培養(yǎng)單細胞 或者異種愈傷組織等方法 . 是指人工制造一個微室 ,將單細胞培養(yǎng)在微室中的少 量培養(yǎng)基中 ,使其分裂增殖形成細胞團的方法 . 優(yōu)點 :在培養(yǎng)過程中可以連續(xù)進行觀察 ,將 1個細胞的生長 、分裂和形成細胞團的全部過程記錄下來 . (二 )影響單細胞培養(yǎng)的因素 培養(yǎng)基的成分（ KM8P） 細胞植板密度 (104～ 105細胞 /ml) 原理 :細胞可合成分裂所需物質(zhì) ,當(dāng)此物質(zhì) 達到一定濃度 (臨界值 )細胞才能分裂 . 故 密度高 達到平衡快 (早 ) 細胞分裂快 密度低 慢 慢 三 .細胞懸浮培養(yǎng) 是指游離的單細胞或細胞團按照一定的細胞密度懸浮 在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的方法。 特點 :提高同步化分裂、增殖速度。 CO2也對誘導(dǎo)細胞分裂有重要意義 (一 ).培養(yǎng)方法 :是指將一定量的細胞或細胞團分散在
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