【正文】 ，χ和ψ亞基組成γ復合體，其功能是幫助β亞基夾住DNA，故稱為夾子裝置器。→339。 滯后鏈的合成：產(chǎn)生Okazaki fragments，消除RNA引物并由DNA pol I補上這一小段DNA序列，由DNA Ligase把兩個片段相連。OriC中有11個GATC回文結(jié)構(gòu)（一般說來，256bp才應有一個GATC重復）。p）生成磷酸二酯鍵。大腸桿菌DNA的復制需要有20種左右的酶和蛋白質(zhì)因子參與，整個DNA復制機器被稱之為DNA replicase system或replisome。如肌紅蛋白的三級結(jié)構(gòu)有8段α螺旋區(qū)每個α螺旋區(qū)含7～24個氨基酸殘基，有1～8個螺旋間區(qū)肽鏈拐角處為非螺旋區(qū)（亦稱螺旋間區(qū)），包括N端有2個氨基酸殘基，C端有5個氨基酸殘基的非螺旋區(qū)內(nèi)部存在一口袋形空穴，血紅素居于此空穴中。αα常是由2股平行或反向平行的右手螺旋相互纏繞而成的左手卷曲螺旋。它們的基因編碼細胞其專一的蛋白質(zhì)并自我復制。小雞的卵清蛋白基因中至少含7個內(nèi)含子。這個學說打破了過去關(guān)于基因是突變、重組、決定遺傳性狀的“三位一體”概念及基因是最小的不可分割的遺傳單位的觀點，從而認為基因為DNA分子上一段核苷酸順序，負責著遺傳信息傳遞，一個基因內(nèi)部仍可劃分若干個起作用的小單位，即可區(qū)分成順反子、突變子和重組子。從遺傳學的角度看，基因是生物的遺傳物質(zhì)，是遺傳的基本單位——突變單位、重組單位和功能單位；從分子生物學的角度看，基因是負載特定遺傳信息的DNA分子片段，在一定條件下能夠表達這種遺傳信息，變成特定的生理功能。2）基因—位于染色體上的遺傳功能單位1909年丹麥遺傳學家約翰遜在提出“基因”概念，以此來替代孟德爾假定的“遺傳因子”。從此根據(jù)基因功能把基因分為結(jié)構(gòu)基因、調(diào)節(jié)基因和操縱基因。為此，這位“玉米夫人”榮獲了1983年度諾貝爾獎。α螺旋的特征是：①—般為右手螺旋；②，螺旋上升1圈的距離(螺距)=；③螺旋之間通過肽鍵上的C＝O和NH間形成氫鍵以保持螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定；④影響α螺旋形成的主要因素是氨基酸側(cè)鏈的大小、形狀及所帶電荷等性質(zhì)。MOTIF: 就是在許多轉(zhuǎn)錄因子的序列中,僅含一小部分蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),亮氨酸拉鏈等都是MOTIF。根據(jù)反應階段和所需的不同酶類，DNA的復制可被分為三個階段，即復制起始、延伸和終止。DNA polymerases，合成新生DNA鏈，切除RNA引物。整個DNA復制過程中，只有復制起始受細胞周期的嚴格調(diào)控。2. DNA子鏈的延伸主要包括兩個不同但相互有聯(lián)系的事件，即前導鏈和滯后鏈的合成。DNA pol Ⅲ是是多亞基組成的蛋白質(zhì),是合成DNA新鏈的主要復制酶，它在細胞中含量很少,但是催化效率高，異二聚體，全酶由α、β、γ、δ、ε、θ、τ、δ’、χ、ψ 10個亞基組成。θ 亞基使核心酶相互連接，組裝核心酶的功能。這個過程存在于某些噬菌體的營養(yǎng)復制過程和結(jié)合質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移復制過程。A蛋白與環(huán)化有關(guān)。端粒是真核細胞染色體末端的特殊結(jié)構(gòu)，由端粒DNA和與端粒DNA特異結(jié)合蛋白組成的核蛋白復合物，廣泛存在于真核生物細胞中，具有特殊的功能。它能利用端粒3′端單鏈為引物，自身的RNA為模板合成端粒重復序列添加到染色體末端，從而延長端粒的長度。對于各種不同類型的堿基損傷都有特異的糖基酶加以識別。SOS修復。RceA蛋白具有鏈交換，ATP酶及蛋白酶活性。ruvC，編碼了一個末端核酸酶，它能確精地辨認出Holliday結(jié)合處，結(jié)合到Holliday中間產(chǎn)物上，將這樣的結(jié)合處分開。10. 原核生物啟動子所組成的保守序列和終止子特異序列是什么？啟動子是指RNA聚合酶識別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列。所有的原核生物的終止子在終止點之前均有一個回文結(jié)構(gòu)，其產(chǎn)生的RNA可形成莖環(huán)構(gòu)成的發(fā)夾結(jié)構(gòu)。RNA 聚合酶Ⅰ需要UBF1和SL1兩個輔助因子。近啟動子有輔助因子UBFl識別，遠啟動子有SL1識別。具有選擇定位轉(zhuǎn)錄點的功能，作為定位因子起作用的eg2: GC box通常在起始位點上游4070bp處，但在每一個啟動子中，GC盒前后的情況是不一樣的。有關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子包括TFⅢA 、TFⅢB、 TFⅢC。有些snRNA的基因由RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄，究竟是由RNA聚合酶II還是Ⅲ轉(zhuǎn)錄，似乎由TATA礦的序列決定。另外，；使用融合蛋白表達方法高效表達和純化重組蛋白；利用分子伴侶共表達，促進蛋白質(zhì)翻譯后正確折疊；尋找合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法等都有助于實現(xiàn)真核蛋白基因的高效表達。剪切位點及一個共同的339。16. 請闡述核酶概念及應用的研究進展。設計核酶抑制耐藥相關(guān)基因的表達，使耐藥的腫瘤細胞重新獲得對化療藥物的敏感性。②抗乙肝病毒HBV：核酶能特異地切割HBV前基因組RNA , 使其喪失模板活性, 如針對HBcAg mRNA 設計的核酶, 可有限的剪切HBV mRNA。它們各不相同，各負其責，使一種氨基酸與其相應的一套tRNA分子結(jié)合。多數(shù)多順反子的翻譯獨立發(fā)生；但在某些細菌中，mRNA相鄰順反子翻譯直接相連，可由一個核糖體翻譯。大腸桿菌乳糖操縱子包括三個結(jié)構(gòu)基因：Z，Y和A，以及啟動子，控制子和阻遏子等。阻遏物有無活性又受乳糖這種小分子誘導物的影響。分析gal操縱子PO區(qū)的DNA序列發(fā)現(xiàn)，該操縱子存在兩個相距僅5bp的啟動子，可以分別起始mRNA的合成。如果只有S1一個啟動子，那么由于這個啟動子的活性依賴于cAMPCRP，當培養(yǎng)基中有葡萄糖存在時就不能合成異構(gòu)酶。經(jīng)過磷酸化修飾，HSF三聚體向核內(nèi)轉(zhuǎn)移并結(jié)合至HSP基因啟動子區(qū)的HSE，激活HSP基因的轉(zhuǎn)錄，使HSP產(chǎn)生增多。分子伴侶的作用是介導蛋白質(zhì)正確折疊；蛋白酶的作用則是降解受到熱損傷而又不能修復的蛋白質(zhì)。在正常條件下，rpoH mRNA核糖體結(jié)合位點，包括SD序列和起始密碼子參與了二級結(jié)構(gòu)的形成，妨礙了核糖體與mRNA的結(jié)合。真核生物基因表達受到多級調(diào)控系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，可以包括：轉(zhuǎn)錄前水平調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)、翻譯水平調(diào)節(jié)、翻譯后水平調(diào)節(jié)等。推測所刪除的DNA僅對生殖細胞是必需的。如抗體基因的準連轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)過不同的拼接方式可以經(jīng)翻譯形成兩種抗體分子：分泌型和膜結(jié)合型抗體。 真核生物可以通過異染色質(zhì)化而關(guān)閉某些基因的表達。轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)包括染色質(zhì)的活化和基因的活化。另一方面，在熱激條件下σ32的穩(wěn)定性也增加了。熱激蛋白基因的啟動子被σ32而不是通常的σ70識別。當環(huán)境溫度升高時，維持蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)的力量會遭到破壞，蛋白質(zhì)開始伸展開來。無論從必要性或經(jīng)濟性考慮，都需要一個依賴于cAMPCAP的啟動子（S1）對高水平合成進行調(diào)節(jié)，以及一個不依賴于cAMPCAP的啟動子（S2）進行本底水平的永久型合成。從S1起始的轉(zhuǎn)錄只有在培養(yǎng)基中無葡萄糖時，才能順利進行，RNA聚合酶與S1的結(jié)合需要半乳糖、CAP和較高濃度的cAMP。在酶誘導合成的這個調(diào)節(jié)系統(tǒng)中，阻遏蛋白是主要的作用因子，而誘導物可以影響阻遏蛋白的活性，只有阻遏物被誘導失活，結(jié)構(gòu)基因才得以表達。轉(zhuǎn)錄從啟動區(qū)開始，按Z》Y》A方向進行，每次轉(zhuǎn)錄出來的一條mRNA上都帶有這三個基因。成熟mRNA上只含一條多肽鏈的遺傳信息，合成蛋白質(zhì)時只有一個合成的啟動點，一個合成的終點。18. 在翻譯水平上解釋為何真核生物通常具有單順反子結(jié)構(gòu)，而原核生物卻具有較多的多順反子結(jié)構(gòu)。從而起到抗病毒的作用。而當細胞惡變時, 端粒酶則被激活, 使端粒酶長度不隨細胞分裂而丟失, 從而使細胞逃避老化死亡, 保持無限復制與增殖。自美國科學家Cech 和Altman 等發(fā)現(xiàn)核酶至今的20多年來,人們利用核酶可以特異性地切割靶RNA序列的特點,通過