鎂離子濃度對(duì)細(xì)胞融合效果的影響(完整版)
【正文】 ……………………………………………………………4 在適宜條件下，不同鎂離子濃度對(duì)應(yīng)不同細(xì)胞融合效率 ……………………………43討論和分析………………………………………………………………………………5 參考文獻(xiàn)……………………………………………………………………………………5致謝…………………………………………………………………………………………6Mg2+ 濃度對(duì)細(xì)胞融合效果的影響張菲菲（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物制品專業(yè)，甘肅蘭州，730070）摘要：細(xì)胞融合是細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域近30年來(lái)得到迅速發(fā)展的一項(xiàng)新興技術(shù)手段，因其操作簡(jiǎn)便、人工可控等優(yōu)點(diǎn)在研究核質(zhì)互作、腫瘤發(fā)生、疫苗研發(fā)和培育新型生物品種等方面均有廣泛應(yīng)用。Red blood cell前言細(xì)胞工程是四大生物工程之一，細(xì)胞融合技術(shù)作為細(xì)胞工程的一項(xiàng)核心基礎(chǔ)技術(shù)已在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)保等領(lǐng)域取得了開(kāi)創(chuàng)性的研究成果,而且應(yīng)用領(lǐng)域不斷擴(kuò)大。PEG細(xì)胞融合法也有很多影響因素：如PEG分子量與濃度，PEG的PH值，融合時(shí)的溫度和PEG的處理時(shí)間[4]等等。12H2O ， g，葡萄糖 ， mL，濾紙過(guò)濾，加入 % 酚紅 mL，加水至 mL， ℃。融合完成后，緩慢滴加 相應(yīng) Hanks 緩沖液以終止 PEG 的作用，在37℃水浴內(nèi)靜置5分鐘。由表1可知，可以確定在鎂離子濃度在10 mmol/L~30 mmol/L范圍類細(xì)胞融合效率最大，融合效果最好。鎂離子濃度對(duì)細(xì)胞融合能產(chǎn)生影響，在實(shí)驗(yàn)中我們需要調(diào)節(jié)鎂離子濃度為10 mmol/L～30 mmol/L范圍類，可以促進(jìn)細(xì)胞的融合。特別是，在大四時(shí)，讓我的人生有了不同的軌跡。沒(méi)有你們，就不會(huì)有今天的我！我一直感恩，感恩于我可以擁有一個(gè)如此溫馨的家庭，讓我所有的一切都可以在你們這里得到理解與支持，得到諒解和分擔(dān)。為此，我常常慶幸于我的幸運(yùn)——有這樣的導(dǎo)師是我學(xué)生生涯的一大幸事！遺憾的是，畢業(yè)在即，能夠在楊老師身邊學(xué)習(xí)的日子已屈指可數(shù)，多么希望時(shí)間可以再多些，日子可以再長(zhǎng)些，讓我可以有更多的時(shí)間、更多的機(jī)會(huì)向楊老師再多學(xué)一點(diǎn)。PEG介導(dǎo)的細(xì)胞融合會(huì)更好，畢竟PEG法以便宜的價(jià)格和高的細(xì)胞融合率被廣泛應(yīng)用。在實(shí)驗(yàn)中，我們可以觀察和CK組對(duì)照，鎂離子濃度越大，細(xì)胞融合的也越來(lái)也少，呈梯度變化，并且在10 mmol/L～30 mmol/L范圍類，細(xì)胞融合最多，且數(shù)量最大。2結(jié)果通常細(xì)胞膜有內(nèi)外兩層，細(xì)胞融合首先發(fā)生在外層，然后再到內(nèi)層，由此就出現(xiàn)了兩種融合通道，細(xì)胞體內(nèi)物質(zhì)通過(guò)這兩種通道轉(zhuǎn)移。 50%PEG的配制用MgSO4調(diào)節(jié)Hanks 溶液 Mg2+離子濃度分別為：10 mmol/L，20 mmol/L，30 mmol/L，40 mmol/L，50 mmol/L，60 mmol/L，70 mmol/L，80mmol/L，90mmol/L；Hanks 原液作為CK對(duì)照管；共10種只有Mg2+含量不同的 Hanks緩沖液。1材料與方法 實(shí)驗(yàn)材料 試劑公雞靜脈血，檸檬酸鈉，PEG（MW=6,000），MgSO4（國(guó)藥集團(tuán)）， %生理鹽水，Hanks溶液，Janus green B 染液（Solarbio 公司）。細(xì)胞融合在植物育種方面已經(jīng)成功的有蘿卜+甘藍(lán)、粉藍(lán)煙草+郎氏煙草、番茄+馬鈴薯等等；在動(dòng)物方面重要應(yīng)用就是制備單克隆抗體。以雞紅細(xì)胞為材料,以PEG(Mw= 6000)為誘導(dǎo)劑，研究Hanks溶液中不同的鎂離子濃度相對(duì)應(yīng)的細(xì)胞融合率，確定細(xì)胞融合率適宜的鎂離子濃度范圍。通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定鎂離子濃度在10～30 mmol/L范圍類細(xì)胞融合率最大。單克隆抗體可以用作診斷試劑，治療疾病和運(yùn)載藥物，具有準(zhǔn)確，高效，簡(jiǎn)易，快速等優(yōu)點(diǎn)，因此探究影響細(xì)胞融合的因素也已越來(lái)越重要。Hanks 緩沖液配方： 甲液：NaCl g ，KCl g，MgSO4稱取 g PEG （M
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1