鎂離子濃度對細胞融合效果的影響(文件)
【正文】 數(shù)100Fig1: Microscopy of Cell fusion，Magnification 100Note: A. Hanks (CK)；B. 10 mmol/L Mg2+；C. 20 mmol/L Mg2+；D. 50 mmol/L Mg2+；E. 80 mmol/L Mg2+ 3討論和分析 細胞融合過程不存在有性雜交過程中的種性隔離機制的限制，為遠緣物種間的遺傳物質(zhì)交換提供了有效途徑，這對于種質(zhì)資源的開發(fā)和利用具有深遠的意義。由于Mg2+濃度對于細胞融合效果的影響目前尚未有報道，關(guān)于 Ca2+濃度對于細胞融合的影響，劉哲等證實50 mmoL/L的 Ca2+濃度可以有效促進細胞融合，并在實驗中指出 100 mmol /L的 Ca2+會導致細胞破裂，我們在實驗中發(fā)現(xiàn) Mg2+的濃度為80 mmol /L時細胞表現(xiàn)為皺縮變形，死亡數(shù)量增加，表現(xiàn)為細胞質(zhì)Janus greenB 染液著色[10]。另外，細胞融合的影響因素還有很多，如PH、溫度、葡萄糖、稀釋的細胞濃度等。因此，PEG化學融合法也在未來不斷被涉及其他方面的研究，更好的提高細胞融合率，也是細胞融合發(fā)展的一個新方向，一個為社會更好的研究。在這寶貴的四年生活中，首先我要感謝我的老師楊杰。但我知道，我人生的角色該轉(zhuǎn)換了，我該走出校園了，在這轉(zhuǎn)變發(fā)生之前我有楊老師給我的如此多的指導，就將使我在面對以后的工作和生活有可以借鑒的資本。我愛你們，愛我們的家！一個人的成長絕不是一件孤立的事，沒有別人的支持與幫助絕不可能辦到。“君子和而不同”，我們正是如此！愿我們以后的人生都可以充實、多彩與快樂！感謝我的舍友，謝謝你們給予我的幫助！感謝我的朋友，感謝你們在我失意時給我鼓勵，在失落時給我支持，感謝你們和我一路走來，讓我在此過程中倍感溫暖！感謝我的家人：我的父母、姐姐和弟弟。畢業(yè)論文的每一個過程都凝結(jié)著楊老師的心血，論文的每一步，都離不開老師悉心的指導，楊老師對我的影響是巨大而深刻的，這種影響不是一朝的迸發(fā)，而是日積月累的滲透，在這點滴匯聚中使我逐漸形成正確、成熟的人生觀、價值觀。四年，一段不短的時間，四年的光陰讓我成長，讓我從青澀走向成熟。隨著科技的發(fā)展，細胞融合會有更大的突破，更大的應(yīng)用，未來科學家會將細胞融合的效率會提高的更好，研究更徹底，使其日益完善，為社會做出貢獻。因此，對PEG介導細胞融合的最適條件探究顯得尤為必要。活細胞是一個完整的滲透系統(tǒng)，當細胞處于不同濃度的溶液中時,必定會發(fā)生不同的變化，因此我們通過PEG介導的細胞融合，改變其鎂離子濃度來更好的完善細胞融合效率。，不同鎂離子細胞濃度對應(yīng)不同細胞融合速率通過顯微鏡的觀察，我們可以清清楚楚的看到染色后細胞融合的現(xiàn)象，并且它們?nèi)诤蟼€數(shù)依次減小，通過可以圖1看到。其公式如下:融合率=融合細胞核數(shù)/總細胞核數(shù) 100% 取細胞懸液1~2滴依次制成臨時制片，以Janus green B 染色3min，在普通光學顯微鏡下觀察細胞融合的過程[8]。然后分別滴加10種 50%PEG的細胞融合液 ，混勻，37℃水浴中靜置 30 min 進行融合?！∮脺缇淖⑸淦魑?8 g/L的檸檬酸鈉2ml，從用75%酒精消過毒的雞翼靜脈處采取靜脈血轉(zhuǎn)入事先裝有38g/L的檸檬酸鈉的燒杯中使檸檬酸鈉與血液的體積比為1：4，放入4℃冰箱中保存，可使用3到4天。6H2O g， mL，CaCl2（無水），蒸餾水 mL將兩種液體混合后，加水至 mL，濾紙過濾， ℃； 乙液：Na2HPO4為此我們以雞紅血細胞為材料，探討了Mg2+濃度對細胞融合的影響，以期確定獲得較高細胞融合率的各項指標的數(shù)據(jù)范圍，進一步擴寬PEG誘導細胞融合的應(yīng)用范圍。其中 PEG 介導細胞融合法是動物細胞融合最簡單最常用的方法，具有操作簡便，不需復雜儀器，容易獲得融合，并且融合效果好等優(yōu)點而被廣泛應(yīng)用。
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