菌種分離篩選ppt課件(完整版)
【正文】 主要步驟 ? 調(diào)查研究及查閱充分的資料 ↓ 設(shè)計實驗方案 ↓確定采集樣品的生態(tài)環(huán)境 采樣 ↓確定特定的增殖條件 增殖培養(yǎng) ↓確定特殊的選擇培養(yǎng)基及可能的 ↓定性或半定量快速檢出法 平板 分離 ↓ ? 原種斜面 ↓確定發(fā)酵培養(yǎng)基礎(chǔ)條件 篩選 ↓ 初篩（ 1株 1瓶） ↓ 復(fù)篩（ 1株 3～ 5瓶） ↓結(jié)合初步工藝條件摸索 再復(fù)篩（ 1株 3～ 5瓶） ↓ 3～ 5株 ↓ 單株純種 分離 ↓ 生產(chǎn)性能試驗 ↓→毒性試驗 菌種鑒定 第二節(jié) 分離樣本的 采樣 一、采樣對象以采集土壤為主。 這樣對下階段的純種分離就會順利得多 。 據(jù)有的國家規(guī)定 ，微生物中除啤酒酵母 、 脆壁酵母 、 黑曲霉 、 米曲霉和枯草桿菌作為食用無須作毒性試驗外 ，其他微生物作為食用 ， 均需通過兩年以上的毒性試驗 。 ? 樣本采集時所需的工具通常有無菌刮鏟 、 土樣采集器 、 鑷子 、 解剖刀 、 手套 、 無菌小塑料袋和塑料瓶等 。 二、 分離 ? 目的微生物不純，需 分離 純化。 用剛果紅染色法鑒定篩選降解纖維素的菌株 羧甲基纖維素鈉作培養(yǎng)物 抗生素篩選 檢定菌培養(yǎng)，加上發(fā)酵液 五、放線菌的分離培養(yǎng)基的組成原則 ? 大多數(shù)放線菌的分離培養(yǎng)是在貧脊或復(fù)雜底物的瓊脂平板上進行的 。 ? 水中放線菌的分離： 為使所要分離的放線菌的數(shù)量種類增多，一般將水樣離心或濾紙過濾，取 離心沉積或濾紙表面沉積 進行系列稀釋和涂布。 有時 ， 真菌子實體形成必須有光線 ， 這在分離培養(yǎng)時應(yīng)加以考慮 。 ? 子實體直接分離培養(yǎng)擔(dān)子菌：新采集的子實體組織植入平板內(nèi)或在放于液體培養(yǎng)基表面放一小塊無菌濾紙上培養(yǎng) 。 ? 方法二的優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點是由于實驗材料和瓊脂都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。 ? 纖維素分解菌（ 混合 ）的選擇培養(yǎng)基 : 纖維素粉 5g、 NaNO3 1g、 Na2HPO3 、 KH2PO3 、 MgSO4 、 KCl 、酵母膏 、水解酪素、以上物質(zhì)溶解后蒸餾水定容到 1000ml 、 鑒別及純化培養(yǎng)基（半固體） ? 鑒別培養(yǎng)基的成分 :(NH4)2SO4 2 g， MgSO4 g，K2HPO4 1 g， NaCl g，剛果紅 g，水 1000 mL，瓊脂 5g 、 自然 pH 值 、 剛果紅 、濾紙片（去淀粉） 。將純培養(yǎng)接種到無菌試管斜面上保藏． 。 實驗方法與步驟 : ? 取樣 →菌懸液的制備 →將菌懸液涂布到有選擇與鑒定作用的培養(yǎng)基（含剛果紅）上 →挑選單菌落純培養(yǎng) →對純培養(yǎng)物制片鏡檢 (有條件的話查出菌的種屬類別 ) →將純培養(yǎng)接種到無菌試管內(nèi)保藏。短時間培養(yǎng)也無大礙。 ? ：練習(xí)科研過程中查閱資料、設(shè)計實驗方案、動手實施方案、綜合安排實驗、解決臨時實際困難等方面的基本能力，認(rèn)識科研程序，感受科研樂趣和困難。 富集可以是種水平的，如通過營養(yǎng)
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