儀器分析紫外-可見分光光度法(完整版)
【正文】 物質(zhì)對(duì)光的吸收具有選擇性 完全吸收 完全透過 吸收黃色光 光譜示意 表觀現(xiàn)象示意 復(fù)合光 溶液對(duì)光的吸收與溶液顏色的關(guān)系 1） 若溶液透明 、 均勻 ， 人眼看到的溶液顏色是 由透射光的波長(zhǎng)決定的 。 （二）、能力目標(biāo) 利用物質(zhì)對(duì) 紫外 可見光 的 選擇性吸收 ，用 紫外 可見分光光度計(jì) 測(cè)定物質(zhì)對(duì)紫外 可見光的吸收程度并進(jìn)行 定性、定量 分析。 根據(jù) E=hc/? 可知 能 量 小 大 紫、藍(lán)、青、綠、黃、橙、紅 可見光波長(zhǎng)范圍 400760nm 波 譜 分 區(qū) 書上 P5 光 譜 分 區(qū) 能 量 小 200nm 400nm 760nm 大 波 長(zhǎng) 光譜區(qū)域 紫外光區(qū) 可見光區(qū) 中紅外 分析方法 紫外 可見分光光度法 25um 紅外光譜法 紫、藍(lán)、青、綠、黃、橙、紅 各種可見光的波長(zhǎng) 顏 色 波 段（ nm） 紫 藍(lán) 青藍(lán) 青 綠 黃綠 黃 橙 紅 400~450 450~480 480~490 490~500 500~560 560~580 580~600 600~650 650~760 單色光、復(fù)合光與光的互補(bǔ) 復(fù)合光： 由不同波長(zhǎng)的單色光按一定比例 組成的光，如白光。 ? T透過率 ?A吸光度 ? b液層厚度（光程長(zhǎng)度） ?c被測(cè)物濃度 ?k吸光系數(shù) 吸光度 A：表征物質(zhì)對(duì)光吸收程度的量 。 ε 105：超高靈敏 ε =(6～ 10) 104：靈敏 ε104：不靈敏 例： 用 1,10二氮菲光度法測(cè)定鐵 ， 已知 Fe2+濃度為 ， 比色皿厚度 2厘米 ， 在?=508nm測(cè)得配合物吸光度 A = ， 求 ? 。 如何評(píng)價(jià)？ 標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性 如何保證？ 線性相關(guān)系數(shù) 儀器、 濃度范圍、 基本操作 通過人眼比較溶液顏色深淺來測(cè)定其中待測(cè)物質(zhì)含量 比色管架 目視比色法 四、紫外 可見分光光度法分類 （ 1） 優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備簡(jiǎn)單 、 操作快速 、 靈敏度較高 。 ? 單色器組成： 由入射狹縫、準(zhǔn)光器（透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光）、色散元件、聚焦元件和出射狹縫等組成。 ? 信號(hào)處理及顯示系統(tǒng) 各部件作用及材料 光源 單色器 吸收池 檢測(cè)器 材料 氫燈 /氘燈 鎢絲燈 棱鏡（玻璃、石英） 光柵 比色皿（玻璃、石英） 光電管 光電池 光電倍增管 作用 發(fā)出連續(xù)光源 將復(fù)合光分為單色光 盛放 溶液 將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào) 型號(hào) 波長(zhǎng) /nm 分光器件 數(shù)據(jù)處理 指示 產(chǎn)地 721 3401000 光柵 微機(jī) 數(shù)顯 上海天普 722 3251000 光柵 微機(jī) 數(shù)顯 上海天普 S22PC 340～ 1000 光柵 微機(jī) 數(shù)顯 上海棱光 755B 1901100 光柵 微機(jī) /打印 數(shù)顯 上海天普 T6系列 1901100 光柵 微機(jī) /打印 數(shù)顯 北京普析 UV2300 200~800 光柵 微機(jī) 液晶顯示器 上海天美 U1800 1901100 光柵 微機(jī) 液晶顯示器 日本日立 UV2450 190～ 900 衍射光柵 微機(jī) /打印 液晶顯示器 日本島津 常用紫外可見分光光度計(jì) 721型分光光度計(jì) 722型分光光度計(jì) 分光光度計(jì)的使用 ? 預(yù)熱 20min。 濃度 ?（ mg/L） 標(biāo)準(zhǔn)系列 吸光度 A 未知樣 吸光度 A 記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) ? 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 ? 查出測(cè)定液的濃度并計(jì)算 濃度（ c） 吸光度 A Goback 數(shù)據(jù)處理 ? 設(shè)工作曲線方程為 y = a + bx ? x為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度； y為相應(yīng)的吸光度； a、 b稱回歸系數(shù)。 若吸收光譜重疊 ， 即 ? ?2下 x、 y均有吸收 。
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