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微生物實(shí)驗(yàn)三ppt課件(完整版)

  

【正文】 大量的 脂質(zhì),主要是分枝菌酸 ,它包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色,要經(jīng)過(guò) 加熱和延長(zhǎng)染色時(shí)間 來(lái)促使其著色。 背景及非抗酸性細(xì)菌呈 蘭色 。 二、實(shí)驗(yàn)原理: 三、實(shí)驗(yàn)材料: 細(xì)菌: 卡介苗 ( Bacillus CalmetteGuerin, BCG) 染液:石炭酸復(fù)紅液、 3%鹽酸酒精、堿性美蘭溶液 其它:接種環(huán)、酒精燈、載玻片等 四、實(shí)驗(yàn)方法: 細(xì)菌涂片標(biāo)本的制備 涂片 干燥 固定 染 色 1)初染: 用玻片夾夾持涂片標(biāo)本,滴加 石炭酸復(fù)紅23滴 ,在火焰高處徐徐加熱, 切勿沸騰 , 出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)離開 ,若染液蒸發(fā)減少,應(yīng)再加染液,以免干涸, 加熱 35分鐘 , 待標(biāo)本冷卻后用水沖洗 。 在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的細(xì)菌的生長(zhǎng)被抑制,形成透明的 抑菌圈 。 SS平板上菌落( 黑色或無(wú)色菌落,以及粉紅色大菌落 )與血清混合成均勻乳狀 (注意:取菌量不宜過(guò)多,使懸液呈輕度乳濁即可 )。 H2S試驗(yàn)[結(jié)果 ] 沿穿刺線部位呈黑褐色, 表明有硫化氫產(chǎn)生,為陽(yáng)性以“ +” 表示, 不變色者為陰性,以 “ ” 表示。 確定細(xì)菌是否生長(zhǎng) 產(chǎn)酸,則培養(yǎng)基指示劑(溴甲酚紫)變?yōu)辄S色,以 “ +”表示。 生化反應(yīng) 碳水化合物 代謝試驗(yàn) 各種酶類試驗(yàn) 抑菌試驗(yàn) 糖發(fā)酵試驗(yàn) 甲基紅試驗(yàn) VP試驗(yàn) 蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn) 硫化氫試驗(yàn) 吲哚試驗(yàn) 碳源和氮源 利用試驗(yàn) 枸櫞酸鹽利用試驗(yàn) IMViC試驗(yàn) 糖發(fā)酵試驗(yàn) ?[原理 ] 根據(jù)細(xì)菌分解利用糖能力的差異表現(xiàn)出是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作為鑒定菌種的依據(jù)。硫化氫遇培養(yǎng)基中的鉛鹽或鐵鹽,形成黑色的硫化鉛或硫化亞鐵沉淀物。 ? 試劑與器材 ? 沙門氏菌屬 A— E群多價(jià) O血清, ? SS平板上菌落, ? 玻片、消毒缸、酒精燈,記號(hào)筆等。 液體仍然混濁,無(wú)凝集塊出現(xiàn)者為陰性。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名 抗酸染色 。 六、注意事項(xiàng): 無(wú)菌操作
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