【正文】 Franklin）。因此生成 4組放射性標(biāo)記的分子，從共同起點(diǎn)（放射性標(biāo)記末端）延續(xù)到發(fā)生化學(xué)降解的位點(diǎn)。cAMP屬于放大激素作用信號(hào)， cGMP屬于縮小激素作用信號(hào)。 167。2 39。 ? 1944年 Avery等人證實(shí) DNA是遺傳物質(zhì) 。 ? 20年后 R. Altmann分離到 不含蛋白質(zhì)的核酸，提出“核酸”這一名詞 。 真核生物 原核生物 DNA 細(xì)胞核 98% 細(xì)胞質(zhì)少量 線粒體少量 葉綠體少量 類核區(qū) 質(zhì)粒 病毒 DNA RNA 細(xì)胞質(zhì) 90% 核仁少量 細(xì)胞質(zhì) 病毒 RNA 7 核苷酸 (nucleotide) 核酸的化學(xué)組成 The Chemical Components of Nucleic Acid 8 核酸的基本組成 ? 基本元素： C、 H、 O、 N、 P (9～ 10%) ? 基本單位：核苷酸 ? 核酸的酸解過程： 核酸 核苷酸 核苷 磷酸 戊糖 堿基 9 堿基 嘌呤 嘧啶 堿基 腺嘌呤（ A） 鳥嘌呤（ G） 胞嘧啶（ C） 胸腺嘧啶（ T） 尿嘧啶（ U） DNA、 RNA均有 DNA有 （某些 RNA中有少量存在） RNA有 10 嘌呤 腺嘌呤 (6氨基嘌呤 ) 鳥嘌呤（ 2氨基 6氧嘌呤） 11 嘧啶 胸腺嘧啶 （ 5甲基 2， 4二氧嘧啶） 胞嘧啶 2氧 4氨基嘧啶 尿嘧啶 2， 4二氧嘧啶 12 稀有堿基 大多 甲基化 堿基， tRNA含量豐富 (高達(dá) 10％ ) 13 戊糖 βD核糖 βD脫氧核糖 14 核苷 ? 堿基和核糖（或脫氧核糖）通過 CN 糖苷鍵 連接形成 核苷 （或脫氧核苷）。 167。 cGMP） ? 環(huán)核苷酸是由 核苷酸分子中的磷酸與核糖的 3’,5’二羥基形成 磷酸二酯鍵 環(huán)化 而成。 2. 連接方式： 以 3 ?,5 ? 磷酸二酯鍵 連接形成多核苷酸鏈，即核酸。 33 DNA的 結(jié)構(gòu) ， 發(fā)表于 《 自然 》 171卷 (1953) 737738頁上的插圖 34 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)的故事 ? James Watson (生物 ) ? Francis Crick (物理 ) ? Maurice Wilkins (物理 ) ? Rosalind Franklin (化學(xué) ) ? Linus Pauling (生物化學(xué) )： 美國加州理工大學(xué) 劍橋 Cawendish Lab 倫敦皇家學(xué)院 35 DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu) ? 右手螺旋 36 右手性的定義示意圖。 , 螺距為 nm。 46 互補(bǔ)堿基之間的氫鍵： ? GC間有 3個(gè)氫鍵， AT之間僅有 2個(gè)氫鍵 , 故前者較穩(wěn)定。 ZDNA 左手 嘌呤－嘧啶二核苷酸為重復(fù)單位 如 d (CGCGCG) nm 12 － 9176。 58 核酸與蛋白質(zhì)的復(fù)合體 染色體 (chromosome) 病毒 (virus) 59 ? 染色體 泛指病毒、細(xì)菌、真核細(xì)胞遺傳信息庫中的核酸分子。 ? 從結(jié)構(gòu)上看， 核酸在內(nèi)，蛋白質(zhì)在外 ，包裹著核酸，這層蛋白叫做 衣殼 （ capsid）。 74 RNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)：是由數(shù)量極其龐大的四種核糖核酸（ AMP、 GMP、 CMP、 UMP）按一定順序，通過 3180。 81 (1) 氨基酸接受區(qū) 包含有 tRNA的 3’ 末端和 5’ 末端， 3’ 末端的最后 3個(gè)核苷酸殘基都是CCA， A為腺苷酸。 86 3. tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu) —— 倒 L形 * tRNA的功能 : 活化 、 搬運(yùn)氨基酸到核糖體 ， 參與蛋白質(zhì)的翻譯 。 2. 大多數(shù)真核 mRNA的 3180。 ? 核酸受到強(qiáng)大離心力的作用時(shí)，可從溶液中 沉降 下來，其沉降速度與核酸的大小和密度有關(guān)。 102 ? 當(dāng) DNA的稀鹽溶液加熱到80~100℃ 時(shí)，雙螺旋結(jié)構(gòu)即發(fā)生解體，兩條鏈彼此分開，形成無規(guī)線團(tuán)。 107 （三）核酸分子雜交 (hybridization) 在 DNA變性后的復(fù)性過程中 ， 如果將不同種類的 DNA單鏈分子或 RNA分子放在同一溶液中 ，只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對(duì)關(guān)系 ， 在適宜的條件 （ 溫度及離子強(qiáng)度 ） 下 ， 就可以在不同的分子間形成 雜化雙鏈 (heteroduplex)。 7. DNA變性后哪些性質(zhì)發(fā)生改變？ 8. 簡(jiǎn)述影響 Tm值的因素。 這種現(xiàn)象稱為 核酸分子雜交 。 實(shí)驗(yàn)室常用的方法 —— 熱變性 80 90 100 100% 50% OD260 Tm 變性溫度范圍 ① ② ③ ℃ 103 影響 Tm值的因素 (2)DNA的性質(zhì)和組成 (1)溶液的離子強(qiáng)度 大腸桿菌 DNA在不同濃度 KCl溶液下的熔融溫度曲線 離子強(qiáng)度越高， Tm值越高 G≡C， 3個(gè)氫鍵，打開所需能量較 A=T大， GC%越高， Tm越高 104 核酸的均一性愈高的樣品，變性過程的溫度范圍愈小。由于核酸分子在一定酸度的緩沖液中帶有電荷，因此可利用電泳進(jìn)行分離和研究其特性 ,最常用的是 凝膠電泳 。 92 ? polyA作用： ? 保護(hù) 作用，抵抗核酸外切酶的降解； ? 與 mRNA從細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)的 移動(dòng) 有關(guān)； ? 與 mRNA壽命 有關(guān)。 87 (二 ) 核糖體 RNA的結(jié)構(gòu)與功能 * rRNA的功能 : 占細(xì)胞 總 RNA的 75～ 85%，參與組成核蛋白體 ，作為 蛋白質(zhì)生物合成的場(chǎng)所 。 82 (2) 反密碼區(qū) 與氨基酸接受區(qū)相對(duì)，一般環(huán)中含有 7個(gè) 核苷酸殘基，臂中含有 5對(duì)堿基。磷酸二酯鍵連成的線形分子，其表示方法與 DNA相同。目前尚未發(fā)現(xiàn)既含有 D