【正文】 紀(jì)90年代共批準(zhǔn)370個(gè)新藥，其中49個(gè)是生物技術(shù)藥物（占13％）。從1995—1999年美國(guó)FDA已批準(zhǔn)了近30種生物技術(shù)藥物。1974年他們又將帶有抗青霉素和抗紅霉素基因的金黃色葡萄球菌質(zhì)粒和大腸桿菌質(zhì)粒重組在一起，將此種重組質(zhì)粒引入大腸桿菌后，發(fā)現(xiàn)重組質(zhì)粒在大腸桿菌中也能表達(dá)金黃色葡萄球菌的抗青霉素特性。 7．重組疫苗與單抗制品：重組疫苗有重組乙肝表面抗原疫苗（酵母）、乙肝基因疫苗（重組乙肝表面抗原疫苗、CHO細(xì)胞）、艾滋病疫苗和腫瘤疫苗等。 3．造血系統(tǒng)生長(zhǎng)因子類：造血系統(tǒng)生長(zhǎng)因子類藥物主要用于促進(jìn)造血系統(tǒng)，增加白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板。到目前為止，世界各國(guó)利用DNA重組技術(shù)成功地生產(chǎn)了人胰島素、人生化激素、生長(zhǎng)因子、rTPA、干擾素α2a。酶工程在乳品工業(yè)中發(fā)揮了重要作用，如用發(fā)酵法生產(chǎn)凝乳酶，進(jìn)而用于干酪的生產(chǎn)；分解牛奶中的乳糖；黃油的增香；奶粉中添加卵清溶菌酶預(yù)防嬰兒腸道感染等。鳥昔酸和肌苷酸為新型鮮味劑，它們與味精混合使用能成倍地提高鮮味，這些核苷酸與味精混合作為復(fù)合調(diào)味料，國(guó)際市場(chǎng)上稱作強(qiáng)力味精，是極有發(fā)展前途的調(diào)味品，在食品工業(yè)中具有很重要的地位。 （二）利用現(xiàn)代生物技術(shù)提高食品品質(zhì) 1．食品添加劑。單細(xì)胞蛋白作為飼料蛋白，已被世界廣泛采用。此外，生物技術(shù)后處理工程和蛋白質(zhì)工程將迅速發(fā)展，通過(guò)蛋白質(zhì)工程修飾和改造基因工程產(chǎn)品以及有目的地修飾、改造乃至重新組建蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的理想將逐步實(shí)現(xiàn)。一是在鼠型單克隆抗體分子中用蛋白質(zhì)工程的方法更換一段人抗體分子中與抗原結(jié)合的鏈段。1990年9月14日，4歲Ashanti成為美國(guó)政府批準(zhǔn)的基因治療第一人。他們采用的是核酸分子雜交的方法。美國(guó)食品與藥物管理局批準(zhǔn)上市的單克隆抗體產(chǎn)品已有幾十種。 （四）副產(chǎn)物少、不良反應(yīng)小、安全性好 眾所周知，制藥行業(yè)（特別是化學(xué)合成藥）也是一種高污染產(chǎn)業(yè)，廢氣、廢水和一些副產(chǎn)物有時(shí)都有毒性，又如疫苗的生產(chǎn)，常規(guī)方法就是用血液，這不僅成本高，同時(shí)也有可能帶來(lái)病毒感染的危險(xiǎn)性。把?；蜇i的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)移給魚，使魚的生長(zhǎng)、發(fā)育加快，體重迅速增長(zhǎng)。 （3）酶工程：指的是利用生物機(jī)體內(nèi)酶所具有的特異催化功能，借助固定化技術(shù)，生物反應(yīng)器和生物傳感器等新技術(shù)、新裝置、高效優(yōu)質(zhì)地生產(chǎn)特定產(chǎn)品的一種技術(shù)。至1999年底，世界上最大的8家生物技術(shù)公司均搶灘我國(guó)。近年來(lái)，生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)在發(fā)達(dá)國(guó)家得到了迅猛發(fā)展。 何謂生物技術(shù)？ 生物技術(shù)就是針對(duì)生物有機(jī)體（這些生物有機(jī)體包括從微生物至高等動(dòng)、植物）或其組成部分（包括器官、組織、細(xì)胞或細(xì)胞器等），運(yùn)用分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、生物物理學(xué)、生物信息學(xué)等手段，研究、設(shè)計(jì)、改造生命系統(tǒng)，以改良生物乃至創(chuàng)造新的生物品種的一種技術(shù)體系。 （一）不可取代性 現(xiàn)代生物技術(shù)能完成一般常規(guī)技術(shù)所不能完成的任務(wù)，能生產(chǎn)出其他方法所無(wú)法生產(chǎn)或難以生產(chǎn)的產(chǎn)品?；蚬こ谭椒ǔ晒σ院?，成本僅幾十美分，類似這樣的例子十分多。 三、現(xiàn)代生物技術(shù)在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用（一）現(xiàn)代生物技術(shù)在疾病診斷與治療中的應(yīng)用 1．單克隆抗體與疾病診斷。國(guó)外有人用蛋白質(zhì)工程構(gòu)建雜合抗體，使作為“生物導(dǎo)彈”的單克隆抗體免疫球蛋白分子中含有人免疫球蛋白分子片段，明顯地提高了效果。 4．基因治療。這些動(dòng)物的乳腺細(xì)胞能進(jìn)行一系列的翻譯后修飾作用，包括糖基化作用等，正確地產(chǎn)生人體蛋白。 此外，生物技術(shù)的各個(gè)環(huán)節(jié)將不斷得到改進(jìn)。食品工廠的廢水下腳料等。近年來(lái)，采用酶工程還成功地將淀粉加工成為始糖、麥芽糖、高麥芽糖漿、麥芽糊精、偶聯(lián)糖等各類淀粉糖產(chǎn)品，它們?cè)谑称饭I(yè)中均起重要作用。改用酶法合成新工藝，可降低成本，提高產(chǎn)量。②蛋品加工。用酶活力高的面粉制成的面包，氣孔細(xì)而分布均勻，體積大，彈性好，色澤佳。 2．細(xì)胞因子白介素類和腫瘤壞死因子類：已在臨床應(yīng)用的有白介素2（IL2）和突變型白介素2。已研制成功的重組蛋自質(zhì)與多肽類激素主要有：人重組胰島素（Humulin）、人生長(zhǎng)激素（rhGH）、促卵泡激素（FSH）、促黃體生成素（LH）和絨毛膜促性腺激素（HCG）等。 三、生物技術(shù)藥物發(fā)展史，并在大腸埃希菌中獲得表達(dá)。1986年人干擾素α在美國(guó)投入市場(chǎng)，其后重組干擾素γ也在歐洲獲準(zhǔn)上市。其中干擾素所占比例最高，其次為乙肝疫苗、白細(xì)胞介素2。 通過(guò)蛋白質(zhì)工程手段可以提高重組蛋自的活性，改善制品的穩(wěn)定性，提高生物利用度，延長(zhǎng)在體內(nèi)的半衰期，降低制品的免疫原性等。實(shí)現(xiàn)用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)行生物技術(shù)藥物生產(chǎn)，用于醫(yī)療已指日可待，通過(guò)克隆動(dòng)物用于生物技術(shù)藥物生產(chǎn)也具有發(fā)展前景，如用克隆羊使其帶有人Ⅸ因子基因，用于制備Ⅸ因子。毒副作用方面的蛋白質(zhì)組學(xué)，為合理用藥提供依據(jù)，從而建立個(gè)體的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫(kù)，用于患者的蛋白質(zhì)譜分類和執(zhí)行個(gè)性化用藥。②合成聚合物如聚乳酸、聚丙交酯、聚乳酸羥乙酸（PLGA）、聚丙交酯乙交酯（PLCG）、聚己內(nèi)酯、聚羥丁酸等。除因乙肝病毒感染導(dǎo)致慢性活動(dòng)性肝炎和肝硬化等而引起死亡外，在肝癌患者中，約有80％是由乙肝病毒感染引起的?；蚬こ碳夹g(shù)的飛速發(fā)展，使基因工程乙肝疫苗的研制成為可能。以澳化氰裂解可產(chǎn)生5個(gè)肽段。 接種重組酵母乙肝疫苗所產(chǎn)生的抗體與接種血源乙肝疫苗產(chǎn)生的抗體具有類似的免疫學(xué)性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)，這兩種乙肝疫苗在健康人群中產(chǎn)生相同的抗體譜，因而這兩種疫苗可以互換使用。都為一過(guò)性反應(yīng)。一般易感者（嬰兒、兒童和成人）每次注射1ml（10μg），免疫間隔為零月（注射當(dāng)時(shí)）、一月、六月共三針。本品貯存過(guò)程中嚴(yán)防凍結(jié)。 2．單劑疫苗 人們正在用控釋微粒技術(shù)研制單劑疫苗。第一種是使用替代的遞釋系統(tǒng)：正在對(duì)新佐劑進(jìn)行檢測(cè)，痘苗、腺病毒或沙門菌等重組微生物正在被用作感染后的表達(dá)宿主，并誘導(dǎo)其特異性免疫力。天然干擾素是一種糖蛋白，采用DNA重組技術(shù)由大腸桿菌表達(dá)的人干擾素多肽不帶糖分子。 近年來(lái)隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，基因工程干擾素研制成功，為了區(qū)分基因工程干擾素和自然干擾素，則分別以rIFN和nIFN表示。 α、β干擾素對(duì)酸性pH相當(dāng)穩(wěn)定，γ干擾素在pH為2的情況下不穩(wěn)定。 干擾素的抑制細(xì)胞分裂活性也有相對(duì)的種屬特異性。干擾素對(duì)巨噬細(xì)胞的功能有增進(jìn)作用，并可調(diào)節(jié)T、B細(xì)胞功能。 1．急性病毒性感染 （1）常見(jiàn)多發(fā)病流感及其他上呼吸道病毒性疾病、流行性結(jié)膜炎、病毒性角膜炎、病毒性流行性腹瀉、病毒性心肌炎、單純皰疹感染、水痘、帶狀疤疹、流行性腮腺炎等。目前臨床上使用的各種類型干擾素 1．簡(jiǎn)稱：rHu~IFN~a1b 2．商品名：Referon、干擾素、悅復(fù)能。治療前及治療開(kāi)始后每2周檢測(cè)1次肝功能、血常規(guī)、血小板、尿常規(guī)、尿素氮等指標(biāo)。 治療丙型肝炎的方法與乙型肝炎相似，但以大劑量即每天注射400萬(wàn)U以上連續(xù)3個(gè)月～6個(gè)月療效較好。 2．商品名：羅擾素、抗病肽、因特芬、RoferonA 3．結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 本品是由165個(gè)氨基酸組成的單鏈多肽，Cysl和Cys9Cys29和Cysl38組成兩條二硫鍵。這種作用已在毛細(xì)胞白血病和卡波濟(jì)肉瘤患者中獲得證實(shí)。另外本品可以調(diào)節(jié)免疫力，可以影響細(xì)胞膜表面抗原的表達(dá)，也可以影響很多免疫中間物質(zhì)的細(xì)胞膜受體表達(dá)，此外還可以影響細(xì)胞毒性T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞及B細(xì)胞作用。寡腺苷酸合成酶：能在雙股RNA作用下，使ATP聚合成寡腺苷酸，激活細(xì)胞內(nèi)的核昔酸酶F，使mRNA降解，從而阻斷病毒蛋白的合成；③磷酸二酯酶：能降解239。由于IFNα抑制了HBV的復(fù)制，減少了靶抗原的產(chǎn)生，IFNα又同時(shí)激發(fā)了宿主的免疫反應(yīng)，清除了HBV，從而緩解了肝臟炎癥的活動(dòng)，使ALT下降。隨后臨床癥狀及血清生化指標(biāo)緩解，肝臟活動(dòng)性炎癥緩解，但不能耐受的病例增多。ALT恢復(fù)穩(wěn)定正常多在13個(gè)月以內(nèi)，可有50％左右HbeAb陽(yáng)轉(zhuǎn)。對(duì)復(fù)發(fā)病例應(yīng)首先排除病毒的重疊感染后，再考慮是否因IFNα治療不充分引起。 下列病人禁止使用本品：①已知對(duì)藥物或其他干擾素有過(guò)敏史；②患有嚴(yán)重的心臟疾??；③患有嚴(yán)重的肝腎疾??；④有癲癇和中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能不佳；⑤孕婦。惡性黑色素瘤。劑量和療程視病人耐受情況而調(diào)整，若發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)應(yīng)停止用藥。 6．貯藏：貯存于4～8℃冰箱。 本品用作皮下或肌內(nèi)注射，生殖器疣亦可采用病灶基部注射，一般用量為106U/日，療程視不同疾病由醫(yī)師決定。 G、干擾素的藥理作用及臨床應(yīng)用的研究發(fā)展 (a)的干擾素受體的研究 干擾素受體的存在，是干擾素通過(guò)細(xì)胞發(fā)揮其生物學(xué)功能的一個(gè)重要條件。 目前對(duì)于擾素的應(yīng)用研究包括以下方面： 1．干擾素基因療法 如將IFNγ基因轉(zhuǎn)移人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）中，并證明此種CTL的抗腫瘤作用顯著強(qiáng)于常規(guī)CTL。 （5）種屬特異性改變的新型IFNs 對(duì)新構(gòu)建的IFNαA和口雜合體研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，IFNαD在牛MDBK細(xì)胞中相對(duì)活性最高；IFNαA在人MG2767細(xì)胞系中相對(duì)活性最高，而它們的雜合體則在鼠L929細(xì)胞中相對(duì)活性最高，完全不同于兩個(gè)親本。 19 / 19。如外露的實(shí)體瘤可用“浸潤(rùn)注射法”將干擾素直接注入瘤體內(nèi)或用導(dǎo)管引人（如腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤）；若靶灶在內(nèi)臟，則可采用“磁力導(dǎo)航法”將干擾素導(dǎo)人靶灶內(nèi)。新型人IFNγ也有類似特性，抗病毒活性比原人IFNγ提高4～50倍。干擾素的受體主要存在于細(xì)胞膜，受體對(duì)干擾素的結(jié)合，也有高嗜性和低嗜性之分，其只有與靶細(xì)胞上的高親和力受體特異結(jié)合才發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。治療期間觀察白細(xì)胞計(jì)數(shù)、肝功能變化。由于結(jié)構(gòu)中堿性氨基酸占多數(shù)，故其等電點(diǎn)偏堿性。對(duì)乙型肝炎的治療，一般在先服用潑尼松等激素治療一個(gè)月后，再注射本品療效更佳。使用劑量為300萬(wàn)U～500萬(wàn)U，隔日皮下注射一次。 ：貯于2～8℃，本藥不含防腐劑，故應(yīng)避免污染，每瓶藥物只供一次取用。 （4）IFNα治療CHB療效預(yù)測(cè)因素 CHB臨床表現(xiàn)形式很多，HBV血清標(biāo)志物表現(xiàn)亦不盡相同，加之IFNα價(jià)格昂貴，療效亦僅50％左右，遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)率仍高，且有一定的非適應(yīng)證，所以不是所有CHB病人均為IFNα的治療對(duì)象。且多在治療后1～2年，這多見(jiàn)于感染時(shí)間較短和年齡較大的病人。療程16周與24周效果相似，后者復(fù)發(fā)略為減少。因?yàn)镮FNα對(duì)于HBV的作用，只限于復(fù)制型的HBVDNA，當(dāng)病毒復(fù)制導(dǎo)致肝臟炎癥應(yīng)答時(shí)，IFNα才產(chǎn)生抗病毒和免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)，所以一般認(rèn)為輕癥、早期或非活動(dòng)性CHB患者，暫不宜使用IFNα。寡腺苷酸，還能去除tRNA的pCpCpA末端，抑制病毒蛋白的翻譯，從而達(dá)到抗HBV的作用。 本品用于治療慢性乙型肝炎（CHB）已有多年的歷史。維持劑量為300萬(wàn)～500萬(wàn)比每周三次，肌注或皮下注射。對(duì)熱也穩(wěn)定。 （2）本品用于治療毛細(xì)胞白血病11例，每天注射60μg，連續(xù)2至6個(gè)月，%，低于國(guó)外報(bào)道的有效率80％：可能與所用劑量低和延續(xù)時(shí)間（應(yīng)為12個(gè)月）短有關(guān)。 干擾素a1b已大規(guī)模用于臨床，但其劑量仍在探討中。 本品分子量理論值19392，等電點(diǎn)在5～6之間有多條導(dǎo)電聚焦電泳帶，說(shuō)明其等電點(diǎn)的不均一性。 2．慢性病毒性感染 這類疾病可能是由于干擾素系統(tǒng)功能損害所致，包括慢性活動(dòng)性肝炎、巨細(xì)胞病毒性感染。干擾素增加NK細(xì)胞活性包括兩個(gè)方面，一是激活NK細(xì)胞前體，二是增加被溶解的細(xì)胞譜。干擾素可以抑制抗體反應(yīng)，從而可能降低腫瘤保護(hù)抗體的水平，使兔疫系統(tǒng)更有效地作用于腫瘤。干擾素的抗病毒作用，并不是靠干擾素本身去直接“中和”或“抑殺”病毒，而是間接地通過(guò)細(xì)胞產(chǎn)生“抗病毒蛋白”發(fā)揮作用的。例如人干擾素只對(duì)人體有保護(hù)作用，而對(duì)其他動(dòng)物就沒(méi)有保護(hù)作用。在一般生理狀態(tài)下，細(xì)胞的干擾素基因呈靜止?fàn)顟B(tài)，只有在特定誘生劑的作用下，細(xì)胞的干擾素基因才活動(dòng)轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的mRNA，進(jìn)而轉(zhuǎn)譯出具有種屬特異性的干擾素蛋白。然而，Jungers的大規(guī)模對(duì)照研究不能證實(shí)這些結(jié)果。將疫苗包裹于無(wú)反應(yīng)性且能很好耐受的可生物降解聚合物（聚丙交酯—聚乙交酯）中。并且該疫苗耐受性良好，從未觀察到明顯由該疫苗引起的嚴(yán)重不良反應(yīng)。用于高危病人如腎透析病人及其他與乙肝密切接觸者，可用20μg/1ml規(guī)格。本品主要是HBsAg的主蛋白，含226個(gè)氨基酸。 已經(jīng)患有肝炎、急性傳染病或其他嚴(yán)重疾病者禁用。本品電泳結(jié)果只在分子量20000～25000之間有一條主帶，這條主帶有HBsAg特異性，且未糖基化，不存在HBsAg中P27糖基化帶。比較成功的有以下幾條研制路線：①使用哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)HBsAg，大體上分為兩類：一是用SV40早期啟動(dòng)子調(diào)控乙肝病毒表面抗原基因，以dhfr為擴(kuò)增基因構(gòu)建的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CHOdhf