生物堆肥現(xiàn)狀及其發(fā)展前景(完整版)
【正文】 用，該技術(shù)現(xiàn)已成為環(huán)境樣品微生物多樣性研究的重要工具。傳統(tǒng)培養(yǎng)分離方法是將定量樣品接種于培養(yǎng)基中，在一定的溫度下培養(yǎng)一定的時問，然后對生長的菌落計數(shù)和計算含量，并通過在顯微鏡下觀察其形態(tài)構(gòu)造，結(jié)臺培養(yǎng)分離過程生理生化特性的觀察鑒定種屬分類特性。堆肥化的實質(zhì)是微生物在適宜條件下的代謝作用。這些有機固體廢棄物主要包括農(nóng)作物秸稈、畜禽糞便、城市生活垃圾以及污水處理廠污泥。然而，微生物種類繁多，自然界中僅有極少數(shù)微生物得到鑒定，“存活而能培養(yǎng)”的種類至多為1％。由于分離、培養(yǎng)法具有選擇性，這種人工環(huán)境與原生境的偏差使得可培養(yǎng)的種類大大減少，很有可能遺漏一些有意義的微生物。Howeler等對堆肥樣品微生物DNA提取、純化方法及其質(zhì)量進行了定量分析，定量研究腐殖質(zhì)污染對電泳和PcR擴增的影響及其消除方法，為堆肥樣品DNA的提取和純化提供了基本思路，也為后續(xù)研究奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。NA基因的多態(tài)性研究了堆肥過程中細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。同時，還可利用the Ribosomal DaLabasePmject提供的分析軟件進行同源性分析。由于它的高度特異性和靈敏性，近年來被廣泛應(yīng)用于微生物多樣性的研究中。第四層次是與rDNA的擴增產(chǎn)物或rRNA的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA進行southem雜交。泛醌與甲基萘醌的摩爾比在一定程度上可反映革蘭氏陰性菌與革蘭氏陽性菌之比，呼吸醌與光合型醌的摩爾比則可在一定程度上反映環(huán)境中細(xì)菌與藻類的比例。PLFA方法適合跟蹤研究微生物群落的動態(tài)變化，能夠快速有效的從環(huán)境樣品中提取大部分脂肪酸。當(dāng)堆肥溫度由高溫降至50℃時，二者又出現(xiàn)增加。當(dāng)堆肥物料中的可利用有機物耗盡時，微生物進入內(nèi)源呼吸期，堆肥溫度下降，中溫微生物叉重新占據(jù)優(yōu)勢，腐殖質(zhì)增多，堆肥產(chǎn)品達到穩(wěn)定。2．2真菌真菌，尤其是白腐真菌可以利用堆肥底物中所有的木質(zhì)纖維素。諾卡氏菌、鏈霉菌、高溫放線菌和單孢子菌等都是在堆肥中占優(yōu)勢的嗜熱性放線菌，它們不僅出現(xiàn)在堆肥過程中的高溫階段，同樣也在降溫階段和熟化階段出現(xiàn)。這些方法都不依賴分離培養(yǎng)技術(shù)，具有明顯優(yōu)點，但也存在一定的缺陷。Ball A S。G Vogt M Marchiani J L Fisher and M Aragno Isolation of Thermus strains from hot post (6080℃) 1996【4】.Muyzer G。P J L Derikx。E Stackebrandt Determination of microbial diversity in environmental samples:pitfalls of PCRbased rRNA analysis[外文期刊] 1997【11】.Tiquia S M。張甲耀。Hay A G。Y J Chang。Gossett J M Walker L P Quantifying bacterial population dynamics in post using 16S rRNA gene probes[外文期刊] 2005(4)【21】.Schloss P D。張所明 城市垃圾堆肥原理與工藝 1990【17】.Klamer M。Keener H M。W C Ghiorse。A G Uitterlinden Profiling of microbial populations by denaturing gradient gel electrophoresis analysis of polymerase chain reaction amplified genes coding for 16S rRNA 1993【5】.馮明謙。McCarthy A J Penninckx M J Towards elucidation of the lignin degradation pathway in actinomycetes 1992【2】.Tuomela M。而建立文庫、測序和系統(tǒng)發(fā)育分析的技術(shù)路線在一定程度上存在繁瑣的缺點，但由于具有可靠的特點，仍得到了普遍認(rèn)同。這類傳統(tǒng)、經(jīng)典的研究方法在微生物學(xué)研究中具有重要的地位。但隨著溫度的升高，真菌的菌落數(shù)開始減少，在64℃時，所有的嗜熱性真菌幾乎全部消失。2．1 細(xì)菌細(xì)菌憑借其大的比表面積，可快速利用可溶性物質(zhì)，在數(shù)量上通常要比體積更大的微生
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