【正文】 孔徑，使其比較均勻 化學(xué)改性 —— 除去表面的活性基團(tuán) (OH等 ) 氧化鋁用不同濃度的 KF改性作用不同 (填或擴(kuò) )。 刊登色譜文章和評論性文章的還有各種分析化學(xué)相關(guān)的雜志 ， 如各國的 “ 分析化學(xué) ” （ 中 、 美 、 英 、 日 、 德等 ） ， 中文的《 理化檢驗 》 、 《 環(huán)境化學(xué) 》 等專業(yè)文獻(xiàn)上也有相當(dāng)比例的色譜論文發(fā)表 。30 1 1 39。 塔板理論回答了影響色譜峰保留時間和峰寬度這二個重要問題 ， 但它沒有回答寬度也就是相應(yīng)的理論板高究竟受哪些操作條件的影響 。 他們把色譜柱比擬為分餾塔 ， 中間設(shè)想成可分為許多分餾塔片 （ 板 ） 。39。39。 4． 適用范圍廣： 幾乎所有與化學(xué)有關(guān)的領(lǐng)域都有其用武之地 。 ? 1944年， Consden、 Cordon和 Martin創(chuàng)立了紙色譜法。色譜分析 Chromatographic Analysis 浙江大學(xué)化學(xué)系 色譜分析方法 2022/2/4 色譜分析 1 3 色譜分離方法： ? ????????? ???????氣固色譜氣相色譜氣液色譜液固色譜液相色譜液液色譜超臨界流體色譜毛細(xì)管電泳2022/2/4 色譜分析 1 4 色譜法是一種分離方法，它利用被分離的諸物質(zhì)在 互不相溶 的兩相中分配系數(shù)的微小差異進(jìn)行分離。他們利用濾紙的毛細(xì)作用，讓溶劑由下至上地滲透，結(jié)合混合物中各組分在兩相中的溶解度的差異，使各組分以不同速率在濾紙上遷移而得到分離 2022/2/4 色譜分析 1 13 一、方法的發(fā)展 ? 1959年， Porath和 Flodin提出了大小排阻色譜法，其原理是利用柱內(nèi)多孔填料對不同尺寸的分子具有選擇滲透作用。 2022/2/4 色譜分析 1 18 多模式及聯(lián)用技術(shù) 復(fù)雜樣品靠單一分離方法或技術(shù)是不夠的，需多模式及多項新技術(shù)的聯(lián)用。( ) ( ) ( ) ( )R i R i N i R iR S R S R S R St V V trt V V t? ? ? ?相對保留值是衡量分離情況的重要參數(shù)，大多數(shù)手冊上可查到。2 1 2 11 2 1 22( ) 2( )( ) ( )R R R Rbbt t t tRW W W W?????? imihhh???39。 他們假定： 1． 流動相按前進(jìn)方向以脈沖使通過柱子 ， 最小單位為一塔板體積 。 2022/2/4 色譜分析 1 31 色譜理論 —— 速率理論 1952年 Lapidus等對填充柱色譜過程做了較詳細(xì)的研究 ， 指出色譜過程中引起組分寬度擴(kuò)張的因素主要是： ； ， 即它在兩相交換時傳質(zhì)速度是有限的 。MPLfS S dLppM M S MMMBDA d HuudkkH q u H t uDkkdd kH u H uDD k???? ? ? ?????? ? ?? ? ?? ? ?2022/2/4 色譜分析 1 35 色譜理論 —— 速率理論 可圖示為： 2022/2/4 色譜分析 1 36 色譜理論 —— 速率理論 最低板高： 最佳流速： m in 2H A B C??/optU B C?色譜參考資料 2022/2/4 色譜分析 1 38 專著 ? 史堅編， 《 現(xiàn)代柱色譜分析 》 ，上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社， . ? 達(dá)世祿編 《 色譜學(xué)導(dǎo)論 》 武漢大學(xué)出版社，. ? 周良模等編著， 《 氣相色譜新技術(shù) 》 ，科學(xué)出版社， . ? 盧佩章等 《 色譜理論基礎(chǔ) 》 科學(xué)出版社，1989年第一版， 1997年第二版 . 專著 ? 任惠敏主編的 《 色譜技術(shù)叢書 》 化學(xué)工業(yè)出版社，一套 13本，涵蓋所有色譜技術(shù)： 色譜分析概論 離子色譜方法及應(yīng)用 色譜定性和定量 毛細(xì)管電泳技術(shù)及應(yīng)用 氣相色譜檢測方法 色譜分析樣品處理 液相色譜檢測方法 色譜聯(lián)用技術(shù) 氣相色譜方法及應(yīng)用 色譜柱技術(shù) 高效液相色譜方法及應(yīng)用 色譜儀器維護(hù)與故障排除 平面色譜方法及應(yīng)用 2022/2/4 色譜分析 1 40 雜志 色譜科學(xué)雜志 （ J， Chromatography Sci）1963 年創(chuàng)刊 , 原 名 氣 相 色 譜 雜 志 （ J,Gas Chromat） ,1969年改為現(xiàn)名 ,主要發(fā)表氣相 、液相原始論文和總結(jié)性文章 （ 英文 ） 和色譜標(biāo)準(zhǔn)圖譜 。 2022/2/4 色譜分析 1 43 手冊 手冊是最方便地查閱相關(guān)文獻(xiàn)的工具 ， 盡管所列數(shù)據(jù)并非最新的 。 2022/2/4 色譜分析 1 55 2022/2/4 色譜分析 1 56 新型氣固色譜固定相 石墨化炭黑 (Cabopack系列， GCB系列 )：加熱使炭黑成片狀石墨化結(jié)構(gòu)，選擇性提高，色譜峰形改善。 3)熱穩(wěn)定性和機(jī)械強(qiáng)度好 ：保證柱效 4)粒度均勻：便于填充 2022/2/4 色譜分析 1 63 硅藻土 載體 (Diatomite Suport) 由具有一定氣孔的單細(xì)胞海藻殘骸堆積而成，因此硅藻土保持了海藻的多孔結(jié)構(gòu) . 2022/2/4 色譜分析 1 64 1) 硅藻土 載體性質(zhì) 兩種硅藻土載體的化學(xué)組成、內(nèi)部結(jié)構(gòu)基本相似，但表面結(jié)構(gòu)大不相同，性能也不同。 用于分離強(qiáng)腐蝕性和強(qiáng)極性化合物 2022/2/4 色譜分析 1 69 2. 氣液色譜固定液 為高分子有機(jī)化合物，在操作溫度下必須呈液態(tài)，基本要求為： 1) 對組分有良好的選擇性 ：使樣品中各組分能彼此分離 2) 蒸氣壓低 ：減少色譜柱固定液的流失 3) 熱穩(wěn)定性和潤濕性好好 ：保證柱效 4) 化學(xué)惰性好 ： 不與組分、載體、載氣發(fā)生不可逆的化學(xué)反應(yīng) 5) 凝固點(diǎn)低，粘度適當(dāng)，成分穩(wěn)定 ： 2022/2/4 色譜分析 1 70 分子間作用力 各組分之所以能在色譜柱中被分離，決定于分子間作用力的大小。 換言之，分子間引力存在某種選擇性。麥?zhǔn)险轻槍υ摬蛔愣岢?，現(xiàn)廣泛采用麥?zhǔn)铣?shù)。 推薦用固定相主要有： 2022/2/4 色譜分析 1 83 名 稱 縮寫 麥?zhǔn)? 常數(shù)和 D值 最高使 用溫度 1 角鯊?fù)? SQ 0 0 150 2 甲基硅油 SE30,OV101 205229 100 350 3 苯基 (10%)甲基聚硅氧烷 OV3 423 194 350 4 苯基 (20%)甲基聚硅氧烷 OV7 592 271 350 5 苯基 (50%)甲基聚硅氧烷 DC710,OV17 827884 377 375 6 苯基 (60%)甲基聚硅氧烷 OV22 1075 488 350 7 三氟丙基 (50%)甲基聚硅氧烷 OV10,QF1 15002550 709 275 8 ?－氰乙基 (25%)甲基聚硅氧烷 XE60 1785 821 250 9 聚乙二醇 20220 PEG20M 2308 1052 225 10 聚乙二醇二乙二酸酯 DEGA 2764 1295 200 11 聚丁二醇二乙二酸酯 DEGS 3504 1612 200 12 1,2,3三 (2氰乙氧基 )丙烷 TCEP 4145 1885 175 2022/2/4 色譜分析 1 84 鍵合固定相 以分子鍵的形式將固定液鍵合到適當(dāng)?shù)妮d體上，減少流失損失。 組合恰當(dāng)，可得很好的分離效果。 2022/2/4 色譜分析 1 93 B．固定液的最高使用溫度和最低使用溫度 固定液雖是高沸點(diǎn)有機(jī)物 ， 但也不能在太高的溫度下使用 。 固定液一般采用動態(tài)法 涂漬 ：涂漬須在通風(fēng)柜進(jìn)行 。 2022/2/4 色譜分析 1 97 E. 固定相的填充 一般采用泵抽法填充 ， 在柱的一端 （ 以后接檢測器那端 ） 填入少量玻璃棉后用布包緊 ， 接上真空泵抽氣 ， 另一端用小漏斗加入固定相 ， 在不斷輕輕敲擊柱身中直至填滿 。 為了保持柱效 、 柱容量及滲透性 ， 必須進(jìn)行仔細(xì)地保養(yǎng) 。 堵塞最容易發(fā)生在極窄的入口接頭處以及入口 、 出口篩板處 。 6． 柱子兩端用金屬螺帽封閉 ， 保存在純凈的有機(jī)溶劑中 。 其作用是吸著強(qiáng)滯留的組分 ， 防止對分析柱的污染 ， 保持分析柱性能穩(wěn)定 。 這種現(xiàn)象稱為 壁效應(yīng) 。 ⊕ 毛細(xì)管柱完全沒有這些缺陷，故理論板數(shù)可高大 106數(shù)量級。 每根柱有確定值 對毛細(xì)管柱，取決于色譜柱中固定液的含量。即 毛細(xì)管柱色譜總效高，其分離效能也高 。 要引進(jìn)如此微量樣品 ， 可采用分流法進(jìn)樣 。 2022/2/4 色譜分析 1 149 A為氣化樣品與載氣混合部分， B為分流點(diǎn)， C為噴嘴 引起放空部分與進(jìn)入部分在分流過程中進(jìn)一步混合，確保寬沸程樣品分流后不失真。 2022/2/4 色譜分析 1 152 HP6820系統(tǒng)的分流裝置 此為不分流模式。（靈敏度高，死體積趨近于零，響應(yīng)時間快等。 其他的幾種柱子及其性能如下 。微填充柱寬有很高的柱效，最低板高可達(dá) ~。 低流速時重載氣為好，柱效高。有人用氨做載氣，效果還不錯。 2022/2/4 色譜分析 1 176 1. 色譜流動相的基本要求 保持色譜柱的穩(wěn)定性，因而： 1) 與固定相不互溶 （延長柱壽命） 2) 不發(fā)生不可逆吸附 3) 有合適的 pH值 化學(xué)惰性 —— 不與樣品及固定相發(fā)生反應(yīng)。 對樣品有很強(qiáng)的溶解力。 不純載氣有時會產(chǎn)生負(fù)峰。 最好用氦氣，用氫氣比較危險。 2022/2/4 色譜分析 1 161 海水中有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留量 檢測： 八個組分依次為： αHCH、 βHCH、 γHCH、δHCH、 ρ,ρ’DDE、 ρ,ρ’DDD、 ο,ρ’DDT、ρ,ρ’DDT DB1701， 30m (id) ； 柱溫： 70℃ 保持 1min，以15℃ /min升至 220℃ ，保持 10min； 2022/2/4 色譜分析 1 162 高效感溫型殺螨劑 —— 苯丁錫原藥甲醇萃取物的 GCMS總離子流圖 14:50的為雙 （ 2甲基 2苯基丙基 ） 錫 23:62的為 二 (2甲基 2苯基丙基 )叔丁基 氫化錫 R T : 2 . 9 8 2 5 . 6 24 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24T i m e (m i n )05101520253035404550556065707580859095100Relative Abundance1 3 . 5 68 . 0 79 . 4 42 3 . 6 21 3 . 9 98 . 1 82 3 . 9 12 3 . 2 11 1 . 4 9 2 2 . 4 42 1 . 5 31 7 . 9 92 0 . 3 11 4 . 5 0 1 6 . 3 01 2 . 1 31 1 . 3 45 . 1 9 6 . 3 9 7 . 2 5 9 . 5 98 . 2 43 . 6 6NL:2 . 7 8 E6T I C M S b e n d i n g x i za z h i _ 0 2HP5色譜柱 (30m ) 柱溫： 50℃ →3min→ 15℃ /min→240 ℃ →10min ， 2022/2/4 色譜分析 1 163 梔子花頭香成分 萜烯類化合物 （ 如羅勒烯 ， 香葉烯 ） 共 28種 ， 占 ％ ；酯類化合物 （ 如惕各酸酯類 ， 苯甲酸酯類 ） 共 21種 ， 占總揮發(fā)性化合物的 ％ ；醇類化合物 （ 如芳樟醇 ， 6十一醇 ） 共9種 ， 其含量占 ％ 。 載體壁涂柱（ SCOT—— Support Coated Open Tubular Column）：把載體和固定液同時涂于壁上制備而成。 也可應(yīng)用特制的微型熱絲檢測器，微型熱敏電阻檢測器，但因其屬于非商品化檢測器，使用頻率不高。 2022/2/4 色譜分析 1 153 尾吹 毛細(xì)管柱內(nèi)流動相流速低，流量小，組分會因柱后死體積突然增加而發(fā)生嚴(yán)重的縱向擴(kuò)散，從而導(dǎo)致峰形展寬，有可能使在柱中以分離的組分在柱后再次重疊，影響分離。這種分流器只是在進(jìn)樣時才打開開關(guān)閥，幾秒鐘后就關(guān)閉大部分載氣，而留下一點(diǎn)出氣，防止試樣反擴(kuò)散進(jìn)柱中。 分流法又分