專題一基因工程選修三dna重組技術(shù)的基本工具,基因工程的基本操作程序,基因工程的應(yīng)用,蛋白質(zhì)工程的崛起(完整版)
【正文】 ② 程序： ③常用的動物受體細(xì)胞： 受精卵和卵細(xì)胞 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 ① 原核生物特點：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少 ② 方法： 用 Ca2+處理細(xì)胞 → 感受態(tài)細(xì)胞 (吸收環(huán)境中 DNA生理狀態(tài) ) → 表達(dá)載體 (緩沖液 )與感受態(tài)細(xì)胞混合 → (溫度 )感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子 （二）方法 將目的基因?qū)? 植物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 動物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 微生物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 —— 顯微注射法 —— 感受態(tài)細(xì)胞法 三、將目的基因?qū)胧荏w紳胞 四、目的基因的檢測與鑒定 （一）檢測（分子水平） 檢測轉(zhuǎn)基因生物的 DNA上是否插入了目的基因 ① 提取轉(zhuǎn)基因生物的基因組 DNA ② 用含目的基因的 DNA片段用 放射性同位素 等作標(biāo)記，以此做 探針 ③ 使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交 ,若顯示出雜交帶 ，表明染色體已插入染色體 DNA中 （ 1） 方法 : DNA分子雜交 （ 2）過程 : 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) （ 1）方法 : 分子雜交 方法 : 抗原 抗體雜交 （ 2）過程 : 用上述探針和轉(zhuǎn)基因生物的 mRNA雜交，若出現(xiàn) 雜交帶 ,表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了 mRNA （二）鑒定（個體生物學(xué)水平） 抗蟲、抗病接種實驗，活性比較等 人體細(xì)胞 質(zhì)粒 大腸桿菌 目的基因 (人胰島素基因 ) 用同一種限制酶 進(jìn)行酶切 DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒 重組質(zhì)粒 (重組 DNA) 重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞 繁殖 人胰島素 復(fù)制目的基因 1. 獲取目的基因 ?從基因文庫中獲取目的基因 ?利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 ?化學(xué)方法人工合成目的基因 2. 構(gòu)建基因表達(dá)載體 ?目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因 3. 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ?植物、動物、微生物 4. 目的基因的檢測與鑒定 ?檢測：分子水平是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯 ?鑒定：個體水平 小節(jié) : 基因工程的基本操作程序 1. 基因工程的基本工具？ 2. 限制酶的特點？ 3. DNA連接酶和載體的種類？ 4. 基因工程的基本操作程序？ 5. 獲取目的基因的方法？ 6. 基因工程的核心步驟是？ 7. 基因表達(dá)載體的組成？ 8. 將抗蟲基因轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞中遺傳和表達(dá)稱為？ 9. 將目的基因?qū)胫参?、動物、微生物?xì)胞的方法？ ？ ？ ？ 復(fù)習(xí) 一、植物基因工程碩果累累 轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)主要用于 提高農(nóng)作物的抗逆能力 ,以及 改良農(nóng)作物的品質(zhì) 和 利用植物生產(chǎn)藥物 等方面。 我國已生產(chǎn)的產(chǎn)品： 白細(xì)胞介素 干擾素、乙肝疫苗等。 4）用于基因治療的基因種類 ；彌補病變基因； mRNA與病變 mRNA互補； ； 知識回顧 基因工程的實質(zhì)是什么？ 將 一種生物的基因 轉(zhuǎn)移到 另一種生物體內(nèi) ， 后者可以產(chǎn)生它本來不能產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，進(jìn) 而表現(xiàn)出新的性狀 。 2 前提： 了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能 原理： 改造基因（基因修飾或基因合成） 目的： 定向改造或制造蛋白質(zhì) 二、蛋白質(zhì)工程的基本原理 與基因工程的關(guān)系： 蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的 第二代基因工程 。 工程菌： 用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表達(dá)的菌類細(xì)胞株系 。 抗 病 轉(zhuǎn)基因植物采用的基因： 抗 真菌 轉(zhuǎn)基因植物采用的基因： 病毒外殼蛋白基因（ CP基因） 病毒復(fù)制酶基因 幾丁質(zhì)酶基因 抗毒素合成基因 (三 )抗逆轉(zhuǎn)
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