【正文】 5181。m 2,900/m3， 即 82/ 1,450/m3， 即 41/ 2,320/ m3， 即 65/ 實際生產(chǎn)中對軋蓋層流泄露到 B 級環(huán)境中的空氣進行持續(xù)監(jiān)測，結(jié)果均小于警戒限的 1/10； 證 明軋蓋間 不會 受到軋蓋粒子的污染。 6． 軋蓋區(qū)域溫濕度 軋蓋機層流罩內(nèi)溫度在軋蓋時約 22℃ ，符合 ≤25℃ 的要求； 濕度 %， 符合 ≤65%的要求。 軋蓋間相對 B 級走廊和分裝間壓差為負，實測 8Pa 左右，滿足 ≥5Pa 的標(biāo)準(zhǔn)。 為保證軋蓋過程的捕塵效果可控，不會污染到泄漏到環(huán)境中的氣流 ，我們在軋蓋層流排向環(huán)境一側(cè)，安裝了一個塵埃粒子在線監(jiān)控探頭，可以對軋蓋過程散發(fā)到環(huán)境的粒子數(shù)量進行實時監(jiān)控。 這樣的系統(tǒng)帶來另外新的風(fēng)險，即定向 B 級環(huán)境泄露的軋蓋層流空氣可能污染軋蓋產(chǎn)生的粒子，從而污染環(huán)境。以期解決溫濕度控制和 A 級軋蓋空氣與周圍環(huán)境空氣交叉的問題。 FFU 捕塵系統(tǒng)為防止污染擴散到 周圍環(huán)境，需要強制定向回風(fēng)。由于 FFU 殼體的存在，導(dǎo)致 FFU 風(fēng)機工作所產(chǎn)生的正壓 P1 被局限在殼體內(nèi)，而 P0 是 FFU 風(fēng)機上游吸入端的壓力，P2 是高效過濾器后壓力（高效濾器存在壓阻），因此， P1P0， P1P2；雖然 PP0 兩者都比 P1 小，但因為 P1 仍是正壓，而 P0 由于風(fēng)機的抽吸作用基本為負壓，所以 P2P0，最終的壓力梯度為 P1P2P0。 2）可再利用性。這種風(fēng)險，對于稱量過程可能是無害的，因為 大多數(shù)固體稱量過程都是非無菌狀態(tài)，該裝置是為了保護人員不受物料所散發(fā)顆粒的影響。即輸送帶不做跨區(qū)域的傳動，以避免將低級別區(qū)域的粒子或微生物等風(fēng)險通過輸送帶帶到高風(fēng)險區(qū)域（關(guān)鍵區(qū)域）。 如前所述，因為軋蓋在 B 級無菌區(qū)域，極大提高了生產(chǎn)效率并保證了無菌工藝，其最大的挑戰(zhàn)是軋蓋間的設(shè)計理念和驗證效果。軋蓋機和上下游設(shè)備的連接，均通過自動傳輸方式，并在軋蓋完成之前配置 RABS 層流系統(tǒng)，最大程度保證產(chǎn)品的無菌性。 7）物料轉(zhuǎn)運遵循單向原則，不同清潔狀態(tài)的物料傳遞路線應(yīng)分開。其主要的特點是簡化的工藝、模塊化設(shè)計和嚴(yán)格的人員物料流程，以及可靠的產(chǎn)品無菌 保證。 無菌藥品生產(chǎn)應(yīng)該采用更高的標(biāo)準(zhǔn)，盡量降低質(zhì)量風(fēng)險； 而 考慮到產(chǎn)品上市后的市場競爭壓力，運行成本應(yīng)該盡量控制 。軋蓋過程產(chǎn)生的粒子如控制不當(dāng)，可能影響其他操作。 7） 一條清洗、烘烤和聯(lián)動灌裝、軋蓋生產(chǎn)線對應(yīng)三臺凍干機，加之采用自動進出料系統(tǒng)，可以相應(yīng)極大地提高生產(chǎn)效率。 2） 潔凈區(qū)只有一套對非潔凈區(qū)的人員和物料入口， B 級區(qū)域更衣入口崁套C 級潔凈區(qū)域內(nèi)，無論 C 級區(qū)域還是 B 級區(qū)域，均帶有回更系統(tǒng)，跟進入的更衣分開，更衣程序規(guī)范、嚴(yán)格，非常容易有效地避免更衣程序的交叉污染。 3） 三個區(qū)域都有對非潔凈區(qū)域的人員和物料通道，潔凈區(qū)和非潔凈區(qū)的開 18 口過多，帶來很多管理、驗證和監(jiān)控的工作負擔(dān)，大大提高了系統(tǒng)運行成本。 4） 一條清洗、烘烤和 聯(lián)動灌裝生產(chǎn)線對應(yīng)兩臺凍干機，可以相應(yīng)提高生產(chǎn)效率。 模式 B：軋蓋位于單獨的軋蓋區(qū)域 這一模式為中國新 GMP（ 2022 年修訂）所推薦。工藝布局基本合理，但仍有不少可以優(yōu)化和改進的空間。 因此，設(shè)計一個理想的無菌軋蓋工藝，應(yīng)從以下幾方面進行考慮： 軋蓋區(qū)域的 級別 選擇和布局，與上下游工藝的聯(lián)系； 軋蓋產(chǎn)品的轉(zhuǎn)運方式和無菌保護； 軋蓋 產(chǎn)塵的控制，抽風(fēng)裝置的設(shè)計 ； 軋蓋過程的驗證和監(jiān)控。 軋蓋既可以使用滅菌蓋子采用無菌工藝，也可以在核心區(qū)外采用潔凈工藝。 表 3 中國和歐盟 GMP 規(guī)范關(guān)于軋蓋的觀點 主要觀點 中國GMP 附錄 1 無菌藥品 第十三條 無菌藥品的生產(chǎn)操作環(huán)境。 經(jīng)過反復(fù)討論，并且研究了多種布局模式，我們還是準(zhǔn)備將軋蓋間安排在 B級無菌區(qū)域，跟分裝凍干間相鄰， 共用物料和人員通道。公用支持區(qū)域如空調(diào)凈化系統(tǒng)機房，也擬安排在周圍。為降低這個風(fēng)險，我們采用非交叉的物料配制系統(tǒng)，即配液罐、過濾管道、過濾器、分裝管道產(chǎn)品專用，分裝機上采用蠕動泵分裝技術(shù)，不 同產(chǎn)品之間完全不交叉，徹底避免了交叉污染的風(fēng)險，降低了清潔驗證的挑戰(zhàn)。無菌分裝線和自動輸送裝置安裝在 RABS 系統(tǒng)內(nèi)，將無菌操作過程中的人員干預(yù)活 動降低到最少。假設(shè)規(guī)劃的藥品如果有一半采用凍干制劑的方式，那 么使用同樣的生產(chǎn)設(shè)備在同樣的空間和時間內(nèi)，產(chǎn)量將下降 40%左右。 ISO14644 系列《潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境》國際標(biāo)準(zhǔn)是潔凈室設(shè)計、檢測和運 8 行、維護的權(quán)威指南 ，在國際制藥行業(yè)和電子行業(yè)具有廣泛的影響力，在其第 4部分 ——設(shè)施的設(shè)計、施工和啟動中，提出按潔凈潔 別 要求的高低，將高級別的區(qū)域套嵌在低級別的環(huán)境中，以便使污染風(fēng)險降到最低 [18]。 在確定無菌生產(chǎn)核心區(qū)中，產(chǎn)品流向、容器 /包裝物流向、操作人員和工藝設(shè) 備是核心因素，它決定了車間工藝布局的基本內(nèi)容 。 6 在美國 FDA cGMP(2022 年 9 月版 )無菌藥品生產(chǎn)指南第四節(jié)廠房和設(shè)施 B 潔凈支持區(qū)域部分的條文中提到 ：在潔凈支持環(huán)境中所執(zhí)行操作的特性決定了該區(qū)域的級別 [16]。 B 級 ； 2 直接接觸藥品的包裝材料、器具滅菌后處于密閉容器內(nèi)的轉(zhuǎn)運和存放。 因此，對本車間的基本要求有以下幾點： 生產(chǎn)的產(chǎn)品為多品種治療性重組蛋白質(zhì)藥物，均為非最終滅菌的無菌注射產(chǎn)品，要求工藝和設(shè)施能夠最大程度實現(xiàn)全過程的無菌保障，并最大限度避免交叉污染。 表 1 重組蛋白質(zhì)藥物多品種制劑生產(chǎn)規(guī)劃表 劑型 涉及品種 批規(guī)模 生產(chǎn)批次 年產(chǎn)量 西林瓶凍干粉針劑 rhGMCSF,rhIL11 等 3 個品種 4萬 50 200萬 西林瓶注射液 rhGCSF,YPEGrhIFNα2b等 10個品種 10萬 150 1500萬 預(yù)充注射器注射液 rhGCSF,YPEGrhIFNα2b等 6個品種 8萬 250 2022萬 表 1 所列的 產(chǎn)量規(guī)劃說明： 西林瓶凍干粉針劑生產(chǎn)周期為 2 天 /批，連續(xù)生產(chǎn)，需要 100 天，另外安排 50天進行設(shè)備維護保養(yǎng)、驗證和校驗等。 為此，我公司在 2022 年開始啟動治療性重組蛋白質(zhì)藥物多品種生產(chǎn)車間的設(shè)計和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)討論。 該指南 撰寫團隊來自于 國際主要生物技術(shù)產(chǎn)品生產(chǎn)商、 ISPE 專家團隊和美國 FDA代表等 ，因而在業(yè)界和 國際監(jiān)管當(dāng)局和具有 較大的 影響力 ，其基本思路代表了未來 重組蛋白質(zhì)藥物生產(chǎn)設(shè)施的主要發(fā)展方向。對于影響無菌車間布局的軋蓋工藝設(shè)計，采用了 B 級背景的層流保護 的方案，設(shè)計了正壓保護的捕塵系統(tǒng)，最大程度減少空間需求和投資和運行管理成本。 研究過程：通過法規(guī)評價和產(chǎn)品分析，找到影響車間布局的關(guān)鍵因素為產(chǎn)品特 性和工藝流程。 長期以來，原創(chuàng)重組蛋白質(zhì)藥物生產(chǎn)車間主要是以單品種生產(chǎn)為主， 對于非原創(chuàng)生物技術(shù)公司， 蛋白質(zhì)藥物 多品種 共線 生產(chǎn)是 未來 降低成本的有效途徑之一 [6]。 而特寶生物除了正在開展多個重組蛋白質(zhì)藥物生物類似物（仿制藥）的項目開發(fā)和臨床研究外，還積極進行擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的新藥研發(fā)，并取得重要進展。 該車間通過獨立的空氣凈化系統(tǒng)分區(qū)和物料、人員的更衣屏障，可以保障兩條生產(chǎn)線同時工作。 4 根據(jù)上述測算，每年最多可以實現(xiàn) 3700 萬支的產(chǎn)品生產(chǎn)，圓滿完成 3000 萬支的目標(biāo)。 關(guān)鍵詞 重組蛋白質(zhì)藥物；無菌軋蓋； RABS；正壓捕塵系統(tǒng) 5 第 2章 無菌制劑生產(chǎn)車間布局的影響因素分析 GMP法規(guī)對無菌車間設(shè)計 要求 按照歐盟無菌藥品 GMP， 無菌藥品生產(chǎn)的最基本要求是盡可能提高無菌保障程度，最大程度地避免 微粒、熱原質(zhì)和微生物的 污染 風(fēng)險 [15]。 B 級：指無菌配制和灌裝等高風(fēng)險操作 A 級潔凈區(qū)所處的背景區(qū)域。 在設(shè)計無菌產(chǎn)品生產(chǎn)車間工藝布局圖之前，首先要全面了解產(chǎn)品特性、工藝要求、法規(guī)指南和體系的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并把這些內(nèi)容整合到用戶需求當(dāng)中 [17]。 而人員流程和物料流程是防止差錯和混淆、避免污染和交叉污染的關(guān)鍵要素，對布局影響程度很大。所以業(yè)內(nèi)同行一般使用無菌凍干生產(chǎn)的方法，雖然對穩(wěn)定性有幫助，但是，由于凍干機容量成本以及凍干周期所限，生產(chǎn)工藝相對復(fù)雜，無菌風(fēng)險高，而且凍干周期較長，因此凍干機投資成本和生產(chǎn)周期經(jīng)常是限制 性因素。這樣，一方面大大簡化了無菌工藝流程，避免了無菌車間處理固體粉末 10 物料帶來的交叉污染風(fēng)險，另一方面，物料集中配制后進行無菌過濾處理，使用時直接稀釋即可，很好地控制了 最終藥品配制中的微生物復(fù) 載 ，工藝簡化后減少了差錯出現(xiàn)的可能。 按照歐盟和 中國新 GMP 要求，采用無菌過濾工藝的無菌制品在最終配液時， “宜安裝第二只已滅菌的除菌過濾器再次過濾藥液，最終的除菌過濾濾器應(yīng)當(dāng)盡可能接近灌裝點。這樣兩條生產(chǎn)線由 5個相對 獨立的區(qū)域（空氣凈化系統(tǒng)）構(gòu)成，包括 1）制劑潔凈公共區(qū)域，主要負責(zé)人員和物料的進入和出去，容器具的清洗和消毒液配制等。軋蓋產(chǎn)塵，還應(yīng)考慮局部排風(fēng)。該規(guī)定不但成為新車間設(shè)計和驗證需要重點考慮的問題， 也同樣成為國內(nèi)廠家新版 GMP 改造的難題之一。不單獨設(shè)置軋蓋區(qū)域的，應(yīng)當(dāng)能夠證明軋蓋操作對產(chǎn)品質(zhì)量沒有不利影響。但是兩者還有一些細節(jié)差 異 ，歐盟 GMP 首先說 軋蓋工藝既可以在無菌核心區(qū)域進行， 然后又說 也可以在無菌區(qū)域外進行，按照歐盟的定義，無菌核心區(qū)域應(yīng)為 B 級背景的 A 級環(huán)境；無菌區(qū)域外應(yīng)該是 C 級或 D 級背景的區(qū)域。洗衣間開口于潔凈更衣緩沖間，鋁蓋在普通區(qū)域清洗和滅菌。 3） 洗衣間開口于更衣緩沖間，可能會剛完成更衣的人員帶來潛在的污染，開口于 C 級走廊可能更好。該布局相比上一個模式，在很多方面都更為合理，優(yōu)點包括： 1） 單一西林瓶生產(chǎn)線，安排 4 個功能區(qū)域，瓶塞清洗和滅菌、配料和無菌過濾、軋蓋分別有獨立的人員和物料流程，如果管理得當(dāng)，可以有效避免交叉污染。 但不等于該布局完美無缺，仍然有需要關(guān)注的地方： 1） 稱量、稱碳、濃配在 C 級區(qū)，跟配料和無菌過濾相連，雖然可以提高生產(chǎn)效率，因為活性炭為極其細微輕質(zhì)的物料，稱量和配料過程極易產(chǎn)塵，難以控制，因此對配料和無菌過濾操作和凈化空調(diào)系統(tǒng)的運行可能有潛在的不利影響；并且稱炭等污染較大的房間不像前一個布局模式，有緩沖室隔離，潛在的污染風(fēng)險更大。而無菌灌封凍干和軋蓋區(qū)均在無菌區(qū)域（背景 B 級）， B 級區(qū)域更衣入口崁套 C 級潔凈區(qū)域內(nèi)。 5） 無菌藥品從分裝機到凍干機，包括凍干上下料以及凍干后轉(zhuǎn)運到軋蓋車間，均采用自動轉(zhuǎn)運系統(tǒng)，并帶 RABS 系統(tǒng)保護，產(chǎn)品的轉(zhuǎn)運效率和無菌保障程度比前兩種模式有著根本的區(qū)別。 表 4 三種無菌布局模式與軋蓋工藝的比較表 模式 特點 優(yōu)點 缺點 模式 A 軋蓋跟配液等在同一非無菌區(qū)域內(nèi)進行，背景為 C、 D 級 ? 不單獨設(shè)置區(qū)域，節(jié)省空間和投資，運行管理成本較低。 ? 所需空間較小，建造和運行成本比較低。 圖 6 重組蛋白質(zhì)藥物多品種無菌制劑生產(chǎn)車間的布局 如圖 6 所示， 我公司新建 多品種重組蛋白質(zhì)藥物 無菌車間包括西林瓶凍干 / 水針生產(chǎn)線和預(yù)灌封注射器生產(chǎn)線。公共區(qū)域和生產(chǎn)區(qū)域的人員進入和離開通道也分開。共用洗瓶機、隧道烘箱、無菌分裝機、無菌傳輸裝置和軋蓋機，凍干機設(shè)計在軋蓋機之前，配套自動進出料系統(tǒng)。 14）多個品種逐步采用注射液配方，將進一步減少對凍干機的依賴。 應(yīng)該指出由于 ISPE 和 FDA 關(guān)于軋蓋房間的 觀點與歐盟和中國略有差異，前者認為如果有層流保護，則環(huán)境為 CNC 區(qū)域（ controlled nonclassified,受控的非潔凈區(qū)域）即可，要求稍低。 4）為了保護操作 環(huán)境，循環(huán)風(fēng)會排出一定比例，通常為 10%左右；同時，損 26 失的空氣由環(huán)境新風(fēng)補充進入，形成的氣流模型保證了稱量過程散發(fā)的粒子不會擴散到環(huán)境中。 FFU 用于空氣凈化系統(tǒng)有如下優(yōu)勢： 1）靈活性。由于它本身帶風(fēng)機，當(dāng)風(fēng)機工作時，在上游形成相對負壓，能夠提供靜壓，使得送風(fēng)靜壓箱相對于潔靜廠房負壓。 這種方案從無菌控制來講，比傳統(tǒng)捕塵系統(tǒng)有較大的進步。在這種情況下，風(fēng)道或靜壓箱內(nèi)的消毒或清潔工作會是一個較大的挑戰(zhàn)。 這個系統(tǒng)控制溫濕度的手段是靠定量新風(fēng)彌補實現(xiàn)的。因此可以使軋蓋工藝可以安全的設(shè)置在 B 級區(qū)域的軋蓋間，人員操作靠近受保護一側(cè)，避免了軋蓋粒子的交叉污染。輸送軌道在隔墻兩側(cè)是分段輸送的，兩側(cè)均有層流保護，避免了軋蓋間對分裝間潛在的交叉污染。 4． 塵埃粒子 軋蓋間 B 級環(huán)境動態(tài)懸浮粒子： ≥ 粒子數(shù)量為 17,533/米 3， 遠低于無菌藥 GMP 所規(guī)定的 352,000/米 3。 圖 13 軋蓋機回風(fēng)氣流組織 8． 房間自凈時間 根據(jù)風(fēng) 險評估結(jié)果，選取軋蓋間作為該區(qū)域房間自凈時間測試代表，測試結(jié)果為 5 分鐘，滿足 ≤30 分鐘的標(biāo)準(zhǔn)。m粒子也在 最大值時短暫超出了警戒限， 約 43 個 /分鐘，兩者時間一致，根據(jù)工藝記錄