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正文內(nèi)容

2007年研究生高級(jí)生化技術(shù)(1)(完整版)

  

【正文】 DNA分子的降解作用。 基因組 DNA的提取與純化 ?核酸分離純化的總原則: ? 保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)完整 ? 排除其他分子的污染 ( 蛋白質(zhì) 、 脂 類 、 糖 、 有機(jī)熔劑 、 金屬離子 、 外源 DNA、 RNA等 ) 核酸提取的主要步驟 主要包括:破碎細(xì)胞,去除與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)及多糖、脂類等生物大分子,去除其它不需要的核酸分子、去除鹽類、有機(jī)溶劑等雜質(zhì),純化核酸等。 提取的 DNA成涂布狀: 操作過(guò)程中用力過(guò)猛,動(dòng)作粗暴; 操作系統(tǒng)有污染。 但原理相似 , 因此它們有共同的步驟 : ① 裂解細(xì)胞 : SDS裂解細(xì)胞 , EDTA抑制核酸酶 ② 除去蛋白質(zhì) :蛋白酶 K水解蛋白質(zhì) , 酚和氯仿 /異戊醇 抽提 、 分離蛋白質(zhì); ③ 析出 DNA:乙醇沉淀使 DNA從溶液中析出 。 核酸提取注意事項(xiàng) ? 減少化學(xué)因素對(duì)核酸的降解(如過(guò)
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