大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項目薯蕷內(nèi)生菌發(fā)酵產(chǎn)物的分離與鑒定申請書(完整版)
【正文】 進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn) 20xx 年 8 月～ 20xx 年 9 月 進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)物的提取與純化 20xx 年 9 月～ 20xx 年 10 月 對發(fā)酵產(chǎn)物加以鑒定并分析 2 0 1 3 年 20xx 年 11 月～ 20xx 年 1 月 實驗總結(jié)，文章發(fā)表 預(yù)期對鑒定結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)薯蕷皂甙元加以對比，從而 分析出三種內(nèi)生菌發(fā)酵產(chǎn)物各自的特點和三者的相同與不同之處，為微生物發(fā)酵法制取薯蕷皂甙元工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。分別將發(fā)酵液于索氏提取器中以 120石油加熱回流提取4h 后，取出發(fā)酵液用分液漏斗萃取，將發(fā)酵液與汽油層分離，取汽油層濃縮后，過夜使其結(jié)晶，得到三種發(fā)酵產(chǎn)物晶體； ，將三種發(fā)酵產(chǎn)物除雜，重結(jié)晶，利用此步驟對發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行提純； d. 利用泡沫反應(yīng)，醋酐 濃硫酸反應(yīng)，薄層分析，測定產(chǎn)物熔點，紫外分光光度計法等實驗技術(shù)對提純后的 3 種發(fā)酵產(chǎn)物皂甙元進(jìn)行加以鑒定比對，同時和標(biāo)準(zhǔn)皂甙元進(jìn)行橫向?qū)Ρ确治?。我們分離的 3 株盾葉薯蕷內(nèi)生菌中，“ ”株的代謝產(chǎn)物 中具有與天然植物相同的薯蕷皂素，已申請國家專利。隨著甾體醫(yī)藥工業(yè)的迅速發(fā)展，薯蕷皂苷元已成為合成甾體激素藥物和避孕藥物的重要工業(yè)原料。但是，這三種內(nèi)生菌的發(fā)酵產(chǎn)物雖均為皂苷類物質(zhì)，但性質(zhì)有較大差異，仍需進(jìn)一步鑒定。 根據(jù)植物內(nèi)生菌具有合成和宿主植物相同或相似的活性成分的能力。甾體激素應(yīng)用廣泛 ， 發(fā)展迅速 ， 美國僅皮質(zhì)激素一類就有 60 多種藥品上市 ， 全球以薯蕷皂苷元為原料生產(chǎn)的甾體激素類藥物達(dá) 100 多種 .甾體避孕藥對我國計劃生育基本國策的實行有著重要作用。 Xu 等從 Fusarium redolen Dzf2 分離株菌絲的提取物中獲得了白僵菌素，抗菌實驗顯示其具有廣譜的抗枯草芽抱桿菌、溶血性金黃色葡萄球菌、假單胞菌、根癌土壤桿菌等細(xì)菌及部分真菌的活性。 （限 400 字） a． 盾葉薯蕷內(nèi)生菌的發(fā)酵 ：利用已經(jīng)分離出的 3 種薯蕷內(nèi)生菌進(jìn)行搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)； b．產(chǎn)物提取：對發(fā)酵液進(jìn)行分離，提取， 純化，為后續(xù)的實驗提供原料； c．產(chǎn)物鑒定：利用泡沫反應(yīng)， 醋酐 濃硫酸反應(yīng)， 薄層分析，熔點測定， 高氯酸染色分光光度計法， 紫外分光光度計法等實驗方法對提 純后的產(chǎn)物進(jìn)行檢測加以鑒定； d．對實驗整體過程加以分析和討論。 10 四、經(jīng)費預(yù)算 支 出 科 目 金 額（元） 計 算 根 據(jù) 及 理 由 合計 2200 500 資料，材料費 200 打印資料 論文發(fā)表費 300 發(fā)表論文費用 1200 儀器的使用 500 用于檢測產(chǎn)
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