【正文】 答：研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的 DNA釋放不完全，提取的 DNA量變少，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。 9． 提取 DNA 的第一步是材料的選取，其目的是一定要選取 DNA 含量較高的生物材料，否則會(huì)由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中或多或少的損失而造成檢測(cè)的困難；第二步是 DNA的釋放和溶解，這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵，要盡可能使細(xì)胞內(nèi)的 DNA全部溶解；第三步是 DNA的純化，即根據(jù) DNA的溶解特性、對(duì)酶及高溫的耐受性的不同等特性，最大限度地將 DNA與雜質(zhì)分開(kāi)；最后一步是對(duì) DNA進(jìn)行鑒定，這是對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié) 果的檢測(cè)。凝膠實(shí)際上是一些由 構(gòu)成的多孔球體，在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過(guò)凝膠時(shí)速度不同，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì) 進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程 ，移動(dòng)速度 ；而相對(duì)分子質(zhì)量 的蛋白質(zhì) 無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在 移動(dòng)，路程 ，移動(dòng)速度 。電泳利用了待分離樣品中各分子 以及分子本身的 、 的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的 ，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。 紅細(xì)胞的洗滌 洗滌紅細(xì)胞的目的是 ，采集的血樣要及時(shí)采用 分離紅細(xì)胞，然后用膠頭吸管吸出上層透明的 ，將下層暗紅色的 倒入燒杯，再加入 ，緩慢攪拌 ，低速短時(shí)間離心，如此重復(fù)洗滌三次，直至 ，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。在裝填凝膠柱時(shí)，不得有 存在。其含有的血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時(shí)可以通過(guò)觀察顏色來(lái)判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集脫液。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻，就會(huì)在色譜柱內(nèi)形成無(wú)效的空隙，使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過(guò)，攪亂洗脫液的流動(dòng)次序，影響分離的效果。 ③若第五次均勻取樣時(shí)，樣品中的酵母菌數(shù)量為 760（個(gè) /mm3），產(chǎn)生這一結(jié)果的原因是 。根據(jù)圖中的信息，你認(rèn)為在 25 攝氏度條件下，競(jìng)爭(zhēng)能力最強(qiáng)的生物和對(duì)溫度適應(yīng)范圍最廣的生物分別是（ A ） A B 和 D B B 和 C C B 和 A D A 和 C 催 C D 化 100 A B 效 率 50 （ %） 0 5 10 15 20 25 30 35 40 [解析 ] 酶活性具有一定的溫度范圍和適宜溫度，溫度過(guò)高酶會(huì)失活，低溫對(duì)酶活性抑制；在一定溫度下，最適宜該溫度的酶活性最強(qiáng)，該生物生活的也最好，競(jìng)爭(zhēng)力就強(qiáng)；酶有活性的范圍最大，生物的生存溫度范圍就越廣。方法Ⅱ：將原題中正方體蛋白塊處理得更?。ㄈ缜谐? = cm3)，這相當(dāng)于消化道內(nèi)進(jìn)行的物理性消化 （ 4）胃（答小腸不給分，因 pH 與題意不符） （ 5）另增加一個(gè)試管，放入等量的蛋白塊并將 pH 調(diào)得適當(dāng)，但不 加酶溶液 例題 現(xiàn)有相同容積的玻璃缸幾只，利用自然的清水、同齡且發(fā)育狀態(tài)相同的小蝌蚪 60只、飼喂蝌蚪的飼料、未經(jīng)處理的具有生物活性的甲狀腺激素，并把具有生物活性的甲狀腺激素放在 50℃的溫水中處理 10 min。 （ 3）利用 DNA與 _____變藍(lán)色的特性，將該物質(zhì)作為鑒定 ______的試劑。在 2mol/l的 NaCl溶液中 DNA的溶解度最大，所以 DNA呈溶解狀態(tài)，過(guò)濾后存在于濾液中。 DNA 存在于染色體上，為了把 DNA 和其他物質(zhì)分開(kāi)，采取 DNA 不溶于酒 16 精的方法，目的是除去雜質(zhì)；利用 DNA與二苯胺（沸水?。┏伤{(lán)色的特性，可以鑒定提取的 DNA。 例 1 在制備雞血細(xì)胞液的過(guò)程中，加入檸檬酸鈉的目的是（ A ） A. 防止凝血 B. 加快 DNA析出 C. 加快 DNA溶解 D. 加速凝血 解析： 檸檬酸鈉的作用是利用檸檬酸根離子與血 漿中 Ca2+離子結(jié)合成檸檬酸鈉，降低 Ca2+離子濃度，使有關(guān)凝血酶活性降低。 （ 2）蛋白塊消失的時(shí)間與酶活性強(qiáng)弱的關(guān)系是 _________。 （ 3）培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不斷被消耗， pH 值減小，部分酵母菌因營(yíng)養(yǎng)缺乏不適應(yīng)而死亡并解體。 例題 腐乳制作過(guò)程中影響其風(fēng)味和品質(zhì)的因素有哪些？ （ A ） ①鹽的用量 ② 酒的種類和用量 ③發(fā)酵溫度 ④ 發(fā)酵時(shí)間 ⑤辛香料的用量 A①②③④⑤ B ①②③ C ①②⑤ D ③④ 解析： 鹽、酒、辛香料不僅用來(lái)調(diào)味，還可抑菌，防腐乳變質(zhì)。電泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。所用的凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體，這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu) 成，小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，當(dāng)一個(gè)含有各種分子的樣品溶液緩慢流經(jīng)時(shí)，各分子在色譜柱內(nèi)進(jìn)行兩種不同的運(yùn)動(dòng)，即垂直向下的運(yùn)動(dòng)和無(wú)規(guī)則的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過(guò)的路程較短，移動(dòng)速度較快；相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道，通過(guò)的路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢。將試管中的液體用濾紙過(guò)濾，除去之溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后，分出下層的紅色透明液體。 5．樣品處理 血液由 和 組成，其中 紅細(xì)胞最多。生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)反應(yīng)都是在一定的 pH 下進(jìn)行的，例如：血漿的 pH 是 ，要在實(shí)驗(yàn)條件下準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的過(guò)程，必須保持體外 的 pH 與體內(nèi)的基本一致。因此，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中最好使用塑料的燒杯和試管，這樣可以減少提取過(guò)程的 DNA的損失。 6．方案二與方案三的原理有什么不同？ 答：方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的 DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi)；方案三利用的是 DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與 DNA分離。加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要 ，以免 ，導(dǎo)致DNA 分子不能形成絮狀沉淀。例如，提取洋蔥的 DNA 時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液。利用這一 8 原理，可以將 DNA 與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。 3．酶和細(xì)胞分別適應(yīng)哪種固定方法？ 提示： 一般來(lái)說(shuō)，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定，而細(xì)胞多采用包埋法固定化。 7 【疑難點(diǎn)撥】 1．細(xì)胞的活化。 ，時(shí)間 。 三、固定化細(xì)胞技術(shù) 固定化酶和固定化細(xì)胞是利用 或 方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括 、 和 法。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì)，使洗衣粉具有更強(qiáng)的去污能力。 ④ 過(guò)相同的時(shí)間后觀察洗滌效果，探究加酶洗衣粉使用時(shí)的最適溫度。 ，你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。鹽能抑制多種微生物的生長(zhǎng)。 3．將平盤放在溫度為 的地方，毛霉逐漸生長(zhǎng)，大約 5d 后，豆腐表面 3 叢生直立菌絲。 《腐乳的制作》 一、腐乳制作的原理 1．腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用， 如 、 、 、 等，其中起主要作用的是 。 【 疑難點(diǎn)撥 】 認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？ 應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。 2．條件：最適合溫度為 __________，需要充足的 ______________。： 。： 菌菌種分離獲得得純凈的酵母人工培養(yǎng) 型酵母菌附著于葡萄皮上的野生自然發(fā)酵 現(xiàn)在工廠 化生產(chǎn)果酒，為提高果酒的品質(zhì)，更好地抑制其它微生物的生長(zhǎng)，采取的措施是 。 3．菌種