【正文】 ........................... 2 生防芽孢桿菌 ........................................................................................... 4 芽孢桿菌抑菌物質(zhì)研究概況 ................................................................... 4 本研究的目的和意義 ............................................................................... 6 第二章 廣譜拮抗菌株的篩選及其鑒定 ............................................................... 8 材料 ........................................................................................................... 8 樣品 ................................................................................................. 8 試劑 ................................................................................................. 9 儀器 ............................................................................................... 10 培養(yǎng)基 ........................................................................................... 10 供試有害微生物 ........................................................................... 11 方法 ......................................................................................................... 11 微生物培養(yǎng) ................................................................................... 11 細(xì)菌菌株分離純化 ....................................................................... 11 菌懸液制備 ................................................................................... 11 拮抗菌株初篩 ............................................................................... 12 拮抗菌株無細(xì)胞培養(yǎng)濾液制備 ................................................... 12 拮抗菌株的復(fù)篩 ........................................................................... 12 拮抗菌株形態(tài)特征觀察 ............................................................... 13 拮抗菌株生理生化特性分析 ....................................................... 13 拮抗菌株 16S rDNA 序列分析 ................................................... 13 結(jié)果與分析 ............................................................................................. 14 細(xì)菌菌株的分離純化 ................................................................... 14 拮抗菌株初篩 ............................................................................... 15 拮抗菌株復(fù)篩 ............................................................................... 15 拮抗菌株 LM2303 鑒定結(jié)果 ....................................................... 17 結(jié)論與討 論 ............................................................................................. 19 第三章 菌株 LM2303 誘變選育 ......................................................................... 21 材料 ......................................................................................................... 21 微生物菌株 ................................................................................... 21 試劑 ............................................................................................... 21 培養(yǎng)基 ........................................................................................... 21 儀器設(shè)備 ....................................................................................... 22 方法 ......................................................................................................... 22 菌懸液制備 ................................................................................... 22 紫外線誘變 ................................................................................... 22 硫酸二乙酯 (DES)誘變 ................................................................ 22 微波誘變 ....................................................................................... 23 II 正突變株篩選 ............................................................................... 23 突變株遺傳穩(wěn)定性 ....................................................................... 24 結(jié)果與分析 ............................................................................................. 24 紫外線 (UV)誘變 .......................................................................... 24 硫酸二乙酯 (DES)誘變 ................................................................ 25 微波誘變 ....................................................................................... 26 突變菌株的遺傳穩(wěn)定性 ............................................................... 27 結(jié)論與討論 ............................................................................................. 27 第四章 拮抗菌株發(fā)酵條件優(yōu)化 ......................................................................... 29 材料 ......................................................................................................... 29 微生物菌株 ................................................................................... 29 試劑 ............................................................................................... 29 儀器 ............................................................................................... 30 培養(yǎng)基 ........................................................................................... 30 方法 ......................................................................................................... 31 種子液制備 ................................................................................... 31 生物量測定 ................................................................................... 31 抑菌物質(zhì)粗提物制備 ................................................................... 31 基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基篩選 ................................................................... 31 菌株 D59 生長曲 線測定 .............................................................. 32 單因素試驗 ................................................................................... 32 響應(yīng)面優(yōu)化 ................................................................................... 33 結(jié)果與分析 ............................................................................................. 33 菌株 D59 生長曲線 ...................................................................... 33 基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基篩選結(jié)果 ........................................................... 33 單因素試驗結(jié)果 ......................