【正文】 材摻假 、 有毒成分的限量檢查 。 6） 貴重藥材在制劑中投料量應(yīng)加以測(cè)定 。 可分別在?1max、 ?2max處用單一物質(zhì)的定量方法從混合物中測(cè)定 a、 b的濃度 。 從左圖可知靛藍(lán)在 540nm、 的等吸收波長(zhǎng)；靛玉紅卻是在 514． 2nm和 566nm處有等吸收波長(zhǎng) ， 而空白樣品液在上述 波長(zhǎng)處的吸收曲線(xiàn)幾乎成一條直線(xiàn) 、 不干擾測(cè) 圖 213 靛藍(lán) 、 靛玉紅的吸收曲線(xiàn) (1)靛藍(lán) (2)靛玉紅 (3)無(wú)青黛樣品 定 ， 選取靛藍(lán)的測(cè)定波長(zhǎng) ?s1＝ 566 nm、 參比 波長(zhǎng) ?R1= nm。 1． 基本原理 左圖中 ? ? ?3為在任一吸收曲線(xiàn)上 ， 任意 選擇的三個(gè)波長(zhǎng) 。 其他成分對(duì) 陳皮甙的測(cè)定有干擾 ， 用 6批不同來(lái)源的原料按上法制備 (Ⅲ) ， 并測(cè)其吸收光譜 ， 結(jié)果譜形相似 。根據(jù)吸收度加和性原理 ， 則 Δ A=A樣 A參 =(Ax +Az)(Ay + Az)= Ax Ay =(ε x ε y)CL 差示光譜中的振幅 ， 即最大吸收與最小吸收之差值 ， 也可進(jìn)行定量測(cè)定 ， 這可提高本法的專(zhuān)屬性 。實(shí)驗(yàn)表明三種成藥Δ A值為零或幾乎為零。 對(duì)波長(zhǎng)求導(dǎo) ， 將其微分系 數(shù) （ dnA/dλ n～ λ ） 對(duì)波長(zhǎng)掃描可得導(dǎo)數(shù)光 譜圖 。C 2） 基線(xiàn)法 取相鄰二同向峰 (正或倒 )的 公切線(xiàn)為基線(xiàn) ， 以中間的反向峰峰尖至基線(xiàn) 的距離為測(cè)量值 。 3)中間波長(zhǎng) (λ m) 通常需選兩個(gè) λ m， 即 λ m λ m2 。 蒸提液在 ／ L氫氧化鈉溶液中的光譜圖 一階導(dǎo)數(shù)光譜圖 1． 肺露 2． 丹皮酚 3． 枇杷葉 4． 蘆根 1． 丹皮酚 2． 枇杷葉 3． 蘆根 (ⅲ) 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) 精密量取丹皮酚對(duì)照液 ()、 、 ?? ，分別于 25ml量瓶中，加 ，混勻，以 ，在測(cè)定波長(zhǎng)處測(cè)吸收度，計(jì)算一系列 Δ A值。 樣品 ， 膽酸對(duì)照品溶 膽酸 、 豬去氧膽酸二 對(duì)照品溶液 液二階導(dǎo)數(shù)光譜 階導(dǎo)數(shù)光譜 二階導(dǎo)數(shù)光譜 A． 樣品 B. 膽酸對(duì)照品 1． 膽酸 2． 豬去氧膽酸 (ⅱ) 測(cè)定條件 零階光譜掃描波長(zhǎng)： 190~550nm；二階導(dǎo)數(shù)光譜掃描波長(zhǎng)， 360～ 420nm； Δλ =5nm。 在板的兩邊 ， 點(diǎn)上對(duì)照品作為定位劑 ， 如圖 A， 然后 ， 在選好的溶劑中層開(kāi) ， 斑點(diǎn)要集中 ， 不應(yīng)有拖尾現(xiàn)象 。 ，目前 ， 用薄層掃描儀掃描測(cè)定斑點(diǎn)中化合物含量的方法已成為薄層定量的主要方法 ， 此法也可用于紙色譜 、 電泳凝膠及其他介質(zhì)的色譜 。 X=0時(shí) ， j= 0， i =I0T X=X時(shí) ， i =I0， j=I0R 則 T =b/[asinh（ bSX） + bcosh（ bSX） ] R = sinh（ bSX） /[asinh（ bSX） + bcosh（ bSX） ] SX稱(chēng)作散射參數(shù) ， 它與薄層厚度 、 散射系數(shù)有關(guān) 。島津 CS系列采用前者， CAMAG儀器采用后者。測(cè)定時(shí)，由熒光減弱的程度測(cè)出樣品中被測(cè)物含量。F F＝ C/CIS 透射法測(cè)定時(shí) ， 厚度增加 ， 峰面積值增加； 反射法測(cè)定時(shí) ， 厚度增加 ， 峰面積值減少 。 顯色后應(yīng)注意斑點(diǎn)的穩(wěn)定性，測(cè)量時(shí)必須在穩(wěn)定的時(shí)間中進(jìn)行。 展開(kāi)時(shí)溫度變化應(yīng)盡量小。[A1/（ AIS） 1 + A2/（ AIS） 2] (四 )影響薄層掃描定量的因素 1． 吸附劑性能及薄層質(zhì)量 薄層厚薄要均勻 ， 吸附劑粒度要均勻 。 其二看標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)是否通過(guò)原點(diǎn) ， 若通過(guò)原點(diǎn) ， 分析樣品時(shí)用外標(biāo)一點(diǎn)法定量 ，若不通過(guò)原點(diǎn) ， 分析樣品時(shí)用外標(biāo)二點(diǎn)法定量 。熒光測(cè)定法與吸收測(cè)定法不同，其測(cè)量值與斑點(diǎn)形狀無(wú)關(guān)。 薄層色譜斑點(diǎn)的吸光度： 理想的空白薄層板的 K=0，但一般 K?0。 X為固定相厚度 。 洗脫溶劑，一般應(yīng)選極性較大，對(duì)待測(cè)化合物溶解度亦較大的溶劑，如乙醚、氯仿、丙酮、乙醇、甲醇等，在單一溶劑洗脫效果欠佳時(shí)，可采用混合溶劑。 第二節(jié) 薄層色譜法 薄層色譜法 (TLC)是一種微量的分離分析技術(shù) ， 具有設(shè)備簡(jiǎn)單 ，檢出靈敏 ， 測(cè)定快速 ， 應(yīng)用廣泛等特點(diǎn) 。 2）清宮沖劑中膽酸的二階導(dǎo)數(shù)光譜測(cè)定法 （ ⅰ ）干擾情況的考察 膽酸對(duì)照液與樣品的二階導(dǎo)數(shù)光譜顯示，在 397nm， 386nm波長(zhǎng)處有相應(yīng)的吸收峰和吸收谷。 2nm。 3． 共存組分干擾吸收的消除 1） 一階導(dǎo)數(shù)光譜法消除線(xiàn)性干擾吸收 A=ε λ CL + aλ + b dA/dλ = （ dε / dλ ） CL + a 說(shuō)明線(xiàn)性干擾在一階導(dǎo)數(shù)光譜中對(duì)定量參數(shù) D(振幅 )沒(méi)有影響 ，D只與待測(cè)組分濃度成正比 。CL ； 式中 L為定值 ， 給定物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處的 dε /dλ 、d2ε /dλ 2?? dnε /dλ n也是定值 ， 因此 ， dA/dλ ∝C ，d2A/dλ 2∝C ?? dnA/dλ n∝C 。 (3)偶階導(dǎo)數(shù)光譜的形狀與零階光譜類(lèi)似 ， 零階光譜的峰值對(duì)應(yīng)于偶階導(dǎo)數(shù)光譜的極值 ， 零階光譜的拐點(diǎn)在偶階導(dǎo)數(shù)光譜中通過(guò)零點(diǎn) 。 本法加樣回收率：六應(yīng)丸為 ％， RSD=％；六神丸為 ％， RSD=％；牛黃消炎丸為 ％， RSD＝ ％。 準(zhǔn)確 吸取 0， 0． 1， 、 于 10ml量瓶中 ， 加冷酸性氯仿至刻度 ， 測(cè)其 光照前后在 453nm處的吸收度 。 本法平均回收率： ％ ， RSD： ％ 。 ⅱ) 二陳丸空白粉提取液的制備：按處方比例 配制除陳皮以外的二陳丸空白粉 ， 用上述溶 劑提取 ， 得二陳丸空白粉提取液 (Ⅱ) 。C 2 + (r2＝ ) ⅲ )含量測(cè)定：精稱(chēng)喉痛消炎丸細(xì)粉約 ， 用氯仿提取至無(wú)藍(lán)色 ， 用氯仿定容于 50ml量瓶中 ， 再精密吸取 5ml置10ml量瓶中 ， 加氯仿至刻度即為樣品溶液 。 （ 三）雙波長(zhǎng)測(cè)定法 中藥制劑分析中常用的方法為等吸收波長(zhǎng)法和系數(shù)率法 。 一般不選擇光譜最左邊的末端吸收峰作定量測(cè)定的波長(zhǎng) 。 2） 大致明確有效成分 ， 要求測(cè)定這些成分的總量 。 可以通過(guò)這些特征 ， 對(duì)中成藥進(jìn)行定性鑒別 。 適宜遇熱不穩(wěn)定的有效成分； 連續(xù)回流法 ， 樣品置索氏提取器中 ， 利用溶劑反復(fù)提取 ， 提取效率高 ， 溶劑少 ， 遇熱不穩(wěn)定的有效成分不宜用此法； 超聲波提取法 ， 樣品置容器中 ， 溶劑提取 ， 效率高 ， 一般樣品30min內(nèi)即可完成 。一般取樣量為 100g。 貴重藥品可酌情取樣 。 2。 在進(jìn)行質(zhì)量分析時(shí)首先以中醫(yī)理論和用藥原則為指導(dǎo) ， 進(jìn)行組方分析 ， 按功能主治分出主 、 輔 、 從 、 次藥味和藥群 ， 選擇某合適的化學(xué)成分為指標(biāo)來(lái)說(shuō)明其與質(zhì)量的關(guān)系 。 有的中藥更由于形態(tài)相似 ， 容易 誤用 。 二 、 中藥制劑分析的特點(diǎn) 一 ） 中藥制劑分析的對(duì)象是復(fù)雜的混合物 。 劑型繁多 ， 所用之輔料多