中國藥品檢驗標準操作流程分析-文庫吧在線文庫
【正文】 吸收光譜，故可用于待測物的光譜鑒定和色譜峰的純度檢查。 ?各品種項下規(guī)定的條件除固定相種類、流動相組成、檢測器類型不得改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組成的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當改變，以適應(yīng)供試品并達到系統(tǒng)適用性試驗的要求。 ?按各品種項下要求對色譜系統(tǒng)進行適用性試驗，即用規(guī)定的對照品溶液或系統(tǒng)適用性試驗溶液在規(guī)定的色譜系統(tǒng)進行試驗，必要時，可對色譜系統(tǒng)進行調(diào)整，以符合要求。除另有規(guī)定外，待測組分與相鄰共存物之間的分離度應(yīng)大于 。必要時，應(yīng)在各品種項下對拖尾因子做出規(guī)定。 ?由于微量注射器不易精確控制進樣量，當采用外標法測定供試品中某成分或雜質(zhì)含量時，以定量環(huán)或自動進樣器進樣為好。同上述 檢測靈敏度后，取供試品溶液和對照溶液適量，分別進樣，前者的記錄時間除另有規(guī)定外，應(yīng)為主成分保留時間的 2倍，測量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積并與對照溶液主成分的峰面積比較，計算雜質(zhì)含量。 注意事項 ? 流動相的制備與保存 ? 用高純度的試劑配制流動相，必要時照紫外 可見分光光度法進行溶劑檢查，應(yīng)符合要求；水應(yīng)為新鮮制備的高純水，可用超純水器制得或用重蒸水。磷酸鹽、醋酸鹽緩沖液容易發(fā)霉變質(zhì)，應(yīng)盡量新鮮配制使用。進樣前，色譜柱應(yīng)用流動相充分沖洗平衡。在調(diào)整流動相組分比例時，以組分比例較低者（小于或等于 50%）相對改變量不超過 177。 三元流動相系統(tǒng) ? 例 3 三組分比例為 60:35:5 按上述原則，可每次調(diào)節(jié)流動相系統(tǒng)中比例較低的兩個組分。 ? 無論使用的是積分儀，或者是色譜工作站，如質(zhì)量標準中沒有明確規(guī)定峰面積的取舍限值，或沒有設(shè)定靈敏度測試溶液，則在實際檢驗中，實驗者通常根據(jù)以往經(jīng)驗設(shè)定積分參數(shù)和最小峰面積，由此也出現(xiàn)了同批樣品的雜志總量在不同實驗室（或不同實驗者）之間差異較大的現(xiàn)象。 %，即 % ～ %，則流動相系統(tǒng)比例的調(diào)節(jié)范圍是 :35: :35:。下面舉例說明。 ? 試驗結(jié)束后，可按色譜柱的使用說明書，對色譜柱進行沖洗和保存。應(yīng)根據(jù)試驗要求和供試品的穩(wěn)定性，設(shè)置待測溶液的貯存條件（如溫度、遮光等）。流動相用前必須脫氣，否則容易在系統(tǒng)內(nèi)逸出氣泡，影響泵的工作、色譜柱的分離效率、檢測器的靈敏度以及基線穩(wěn)定性等。 面積歸一法 ?按各品種項下的規(guī)定，配制供試品溶液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖。這些需作較正計算的雜質(zhì)，通常以主成分為參照，采用相對保留時間定位，其數(shù)值一并載入各品種項下。 ? 再取各品種項下含有內(nèi)標物質(zhì)的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖，測量供試品中待測成分和內(nèi)標物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計算含量： 含量（ CX）＝ ?為保證分離效果和測量精度，應(yīng)檢查待測峰的拖尾因子是否符合各品種項下的規(guī)定。 ? 在規(guī)定的條件下，注入供試品溶液或各品種項下規(guī)定的內(nèi)標物質(zhì)溶液，記錄色譜圖，量出供試品主成分峰或內(nèi)標物質(zhì)峰的保留時間 t R（以分鐘或長度計，下同，但應(yīng)取相同單位）和峰寬（ W）半峰高寬（ Wh/2 ），按 n＝ 16(t R/W)2或 n=(tR/Wh/2)2計算色譜柱的理論板數(shù)。 10%為限。蒸發(fā)光散射檢測器和質(zhì)譜檢測器通常不允許使用含不揮發(fā)鹽組分的流動相。 ?流動相的 PH值應(yīng)控制在 2～ 8之間。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠
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