劉寧_dna重組技術(shù)的基本工具-文庫吧在線文庫
【正文】 編碼蛋白質(zhì) 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 原核細(xì)胞的 基因結(jié)構(gòu) ②有調(diào)控遺傳信息表達(dá)的核 苷酸序列，在該序列中， 最重要的是位于編碼區(qū)上 游的 RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)。 (二 )基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 ______處， 再加入適量 ___________，形成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 限制酶 黏性末端 同一種限制酶 的黏性末端 切口 DNA連接酶 相同 質(zhì)粒 DNA分子 限制酶處理 一個(gè)切口 兩個(gè)黏性末端 兩個(gè)切口 獲得目的基因 DNA連接酶 重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） —— 核心 同一種 (二 )基因表達(dá)載體的構(gòu)建 : ： 復(fù)制原點(diǎn) +目的基因 +啟動(dòng)子 +終止子 +標(biāo)記基因 它們有什么作用？ ? 常用的受體細(xì)胞： 有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。 二、基因工程在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上的應(yīng)用 將人的 生長(zhǎng)激素基因 和牛的生長(zhǎng)激素基因分別注射到小白鼠受精卵中，得到的“ 超級(jí)小鼠 ”。 方法 特點(diǎn) 胰島素 干擾素 傳統(tǒng)方法 直接從生物體的組織、細(xì)胞或血液中提取 產(chǎn)量低價(jià)格昂貴 4~5g/100kg胰腺 1mg/300L血液 基因工程 “工程菌”發(fā)酵工業(yè)化生產(chǎn) 高質(zhì)量低成本 100g/2023L大腸桿菌培養(yǎng)液 20~40mg/1kg細(xì)菌培養(yǎng)物 人造血液及其生產(chǎn) 我國(guó)生產(chǎn)的部分基因 工程疫苗和藥物 白細(xì)胞介素、溶血栓劑、凝血因子、人造血液代用品 疫苗： 乙肝、狂犬病、百日咳、霍亂、傷寒、瘧疾 基因工程藥品 ? 基因診斷： 也稱為 DNA診斷 或 基因探針技術(shù) ，即在DNA水平分析檢測(cè)某一基因，從而對(duì)特定的疾病進(jìn)行診斷。 基因工程與食品業(yè) 基因工程為人類開辟 新的食物來源 。 04:29:3504:29:3504:292/26/2023 4:29:35 AM 1以我獨(dú)沈久，愧君相見頻。 , February 26, 2023 很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒有。 上午 4時(shí) 29分 35秒 上午 4時(shí) 29分 04:29: 楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。 2023年 2月 上午 4時(shí) 29分 :29February 26, 2023 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 04:29:3504:29:3504:29Sunday, February 26, 2023 1知人者智，自知者明。 :29:3504:29:35February 26, 2023 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 2023年 2月 26日星期日 上午 4時(shí) 29分 35秒 04:29: 1比不了得就不比，得不到的就不要。 ? 基因工程為食品工業(yè)中提供了什么前景？ 當(dāng)人類擁有了只有大自然才擁有的改造生物、創(chuàng)造生物的能力時(shí)，我們是否感到很坦然呢？ 轉(zhuǎn)基因食品 安全嗎 ?! ? 目前，大多數(shù)專家認(rèn)為，已經(jīng)投入商品化生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因番茄、玉米等農(nóng)產(chǎn)品都是安全的。 1t水中有 10個(gè)病毒也能被檢測(cè)出來 快速靈敏 利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的情況，卻不易因環(huán)境污染而大量死亡，甚至還可以吸收和轉(zhuǎn)化污染物。 微生物生長(zhǎng)迅速，容易控制，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。 將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落，檢測(cè)菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 推測(cè) 推測(cè) 目的基因 化學(xué)合成 ? 上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)？ 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 鳥槍法 反轉(zhuǎn)錄法 根據(jù)已知氨基酸合成 DNA法 操作簡(jiǎn)便廣泛使用 工作量大，盲目，分離出來的有時(shí)并非一個(gè)基因 專一性強(qiáng) 操作過程麻煩， mRNA很不穩(wěn)定，要求的技術(shù)條件較高 專一性最強(qiáng) 僅限于合成核苷酸對(duì)較少的簡(jiǎn)單基因 思考 :為什么要構(gòu)建基因文庫 ?直接從含有目的基因的生物體內(nèi)提取不行嗎 ? ? 哪些新技術(shù)能大大簡(jiǎn)化基因工程的操作技術(shù)？ 1） DNA序列自動(dòng)測(cè)序儀： 2） PCR技術(shù)： 對(duì)提取出來的基因進(jìn)行核苷酸序列分析。 補(bǔ)：原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 與 RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn) 啟動(dòng)子 終止子 RNA聚合酶能夠識(shí)別調(diào)控序列中的結(jié)合位點(diǎn)，并與其結(jié)合。 基因的運(yùn)輸工具 —— 質(zhì)粒 能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制 有切割位點(diǎn) 有標(biāo)記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別
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