3第3章免疫原和抗血清的制備多媒體-文庫吧在線文庫
【正文】 來。 ? 被覆以離子化物質(zhì)的細(xì)粉。 ? 提取丙種球蛋白 :（ IgG95%以上）將33%~50%飽和度硫酸胺沉淀物經(jīng)去鹽后可直接用于抗體試劑。 ? 酶處理法：溶菌酶、蝸牛酶、纖維素酶等，在一定的條件下能消化細(xì)菌和組織細(xì)胞。 ? 研磨法： ? 用玻璃均漿器或乳缽研磨，經(jīng)過旋轉(zhuǎn)、壓擠將組織粉碎。 顆粒性抗原－ 細(xì)胞、細(xì)菌、寄生蟲 可溶性抗原－ 蛋白質(zhì)、糖蛋白、脂蛋白、核酸 細(xì)胞抗原：綿羊紅細(xì)胞 細(xì)菌抗原：菌體抗原、鞭毛抗原 寄生蟲體抗原：蟲卵 一、顆粒性抗原的制備 顆粒性抗原的制備 顆粒性抗原包括人和各種動(dòng)物細(xì)胞抗原以及各種細(xì)菌抗原和寄生蟲體抗原。 ? 鞭毛抗原需用 0． 3%~0． 5%的甲醛處理；菌體抗原加溫 100℃ 2~2． 5h去除鞭毛抗原；毒素抗原則在殺菌后再加 0． 5%~1． 0%氯化鈣溶液等。 ? 細(xì)胞抗原一般分為三個(gè)部分：膜蛋白抗原、細(xì)胞質(zhì)抗原（細(xì)胞器）和細(xì)胞核與核膜抗原。 ? 差速離心法：用于分離大小差異較大的抗原顆粒 ? 梯度密度離心法：區(qū)帶分離法，通過梯度密度離心，使各類分子量的顆粒分離。 ? 將含多種分子量的樣品溶液 緩慢流經(jīng)凝膠柱時(shí)，各分子 在柱內(nèi)進(jìn)行兩種不同運(yùn)動(dòng)， 垂直向下移動(dòng)和無定向擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)。 ? 在一定條件下，二者能緊密結(jié)合成復(fù)合物，如將復(fù)合物的已知一方固定在固相載體上，則可從溶液中專一性地分離和提純另一方。 ? 用木瓜酶水解得到的 Fc段作為抗原制備重鏈血清，胃蛋白酶水解抗體試劑用。 ? 引起或增強(qiáng)遲發(fā)性超敏反應(yīng) 由于佐劑作用引起過強(qiáng)的免疫應(yīng)答導(dǎo)致病理生理反應(yīng) 。 ? 鑒定純化方法： SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDS－ PAGE） 2℃ ～ 8℃ 保存：短期保存 冰凍保存：保存 5年 真空干燥保存：保存 5～ 10年 二、抗血清的保存 第五節(jié) 抗血清的純化 抗原免疫動(dòng)物制備的抗血清是成分復(fù)雜的混合物，除含有特異性抗體外，還存在與目的抗體不相關(guān)的成分。 抗血清是經(jīng)過抗原免疫的動(dòng)物血清。 :05:0105:05:01February 5, 2023 ? 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國見青山。 :05:0105:05Feb235Feb23 ? 1世間成事，不求其絕對圓滿，留一份不足，可得無限完美。 , February 5, 2023 ? 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 2月 5日星期日 5時(shí) 5分 1秒 05:05:015 February 2023 ? 1一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 。 2023年 2月 5日星期日 5時(shí) 5分 1秒 05:05:015 February 2023 ? 1做前，能夠環(huán)視四周；做時(shí)，你只能或者最好沿著以腳為起點(diǎn)的射線向前。 , February 5, 2023 ? 雨中黃葉樹，燈下白頭人。 ? 即使用純抗原，用高度純的 IgG免疫動(dòng)物，出現(xiàn)的抗體總會(huì)有抗 r重鏈的抗體。 三、佐劑的作用機(jī)制 第三節(jié) 抗血清的制備 抗血清的制備是將制備好的免疫原按照一定的免疫程序接種給所選擇的動(dòng)物，該動(dòng)物在含有多種抗原表位的抗原刺激下，體內(nèi)多個(gè) B細(xì)胞克隆被激活并產(chǎn)生針對某一抗原多種不同表位的抗體，其混合物為多克隆抗體 多克隆抗體的產(chǎn)生示意圖 多克隆抗體 (polyclonal antibody,pcAb)： 天然抗原刺激多種 B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的多種抗體的混合物 抗原來源與動(dòng)物種屬的關(guān)系 種屬差異越遠(yuǎn)，免疫原性越強(qiáng) 動(dòng)物個(gè)體的選擇 適齡、健康、體重符合要求 抗原的性質(zhì) IgE對綿羊，胰島素對家兔免疫后不易出現(xiàn)抗體 一、免疫動(dòng)物的選擇 免疫原的劑量 中間劑量范圍內(nèi)，免疫原劑量增加可獲得高效價(jià)抗體 免疫間隔時(shí)間 第一次和第二次間隔 10～ 20天，三次及以后間隔 7～ 10天 免疫途徑 皮內(nèi)、皮下、肌肉、靜脈、腹腔、淋巴結(jié) 二、免疫方法和途徑 ? 抗體產(chǎn)生的階段： ? 靜止期（ 2天）血液中無抗體，僅有抗原。 ? 白細(xì)胞介素 2（ IL－ 2）、 IL－ 干擾素、粒細(xì)胞－巨噬細(xì)胞集落刺激因子（ CSF， GM－
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