植物組織培養(yǎng)第四章胚胎培養(yǎng)和離體授粉-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 g早在 1904年就培養(yǎng)了蘿卜和辣根菜的胚，發(fā)現(xiàn)離體胚可以充分發(fā)育，并且提前萌發(fā)形成小苗，這是世界上胚培養(yǎng)最早獲得成功的一例。再分化成胚狀體或形成芽苗。 培養(yǎng)過程中，轉(zhuǎn)移到蔗糖水平低的培養(yǎng)基上。 胚柄可參與幼胚的發(fā)育過程。其中蘋果、柚、橙、檀香、枸杞、獼猴桃、玉米、大麥、小黑麥、水稻、馬鈴薯、梨、核桃等的胚乳培養(yǎng)得到了再生植株。主要產(chǎn)于世界熱帶地區(qū)，溫帶分布較少。 裸子植物胚乳 —— 裸子植物很特殊，它的胚乳在受精前就已形成。對(duì)成熟胚乳，特別是干種子的胚乳進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，由于其生理活動(dòng)十分微弱，在誘導(dǎo)其脫分化前，必須借助于原位胚的萌發(fā)使其活化。 四、胚乳培養(yǎng)的應(yīng)用 培養(yǎng)胚乳的首要目的是為了直接獲得三倍體植株。 滅菌：禾谷類幼穗表面用 70%酒精擦拭即可，雙子葉花蕾漂白粉液滅菌，其他植株暴露的子房須嚴(yán)格消毒，無菌濾紙吸干。 （二）離體子房授粉 定義：通過人工方法將 花粉直接引入子房 ，使花粉粒在子房腔內(nèi)萌發(fā)，并進(jìn)行正常受精，最后獲得具有生活力的種子。 方法： 取即將開花的花蕾，經(jīng)過表面消毒，剝離花萼和花瓣，去掉柱頭和花柱，在試管中將無菌花粉授予子房頂端切口處，或?qū)⒒ǚ垡胱臃績(jī)?nèi)，實(shí)現(xiàn)受精過程。 :15:0404:15Feb232Feb23 1故人江海別，幾度隔山川。 04:15:0404:15:0404:152/2/2023 4:15:04 AM 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 , February 2, 2023 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 2月 2日星期四 4時(shí) 15分 4秒 04:15:042 February 2023 1一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 2023年 2月 2日星期四 上午 4時(shí) 15分 4秒 04:15: 1楚塞三湘接，荊門九派通。 2023年 2月 上午 4時(shí) 15分 :15February 2, 2023 1行動(dòng)出成果，工作出財(cái)富。 二、離體授粉的方法 （一）試驗(yàn)材料的選擇 最好選擇子房較大并有多個(gè)胚珠的植物 （二）離體授粉的程序 確定開花、花藥分裂、授粉、花粉管進(jìn)入胚珠和受精的時(shí)間 去雄后將花蕾套袋隔離（開花前） 制備無菌子房和胚珠 制備無菌花粉 胚珠（或子房）的試管內(nèi)授粉 離體授粉成功的標(biāo)志： 授粉后由胚珠或子房形成有生活力的種子。 ②花粉粒引入子房有兩種方法：直接引入法和注射法 直接引入法： 用鋒利刀片在子房壁或子房頂端上開一切口，把花粉從切口處送進(jìn)子房。 第四節(jié) 植物離體授粉 在遠(yuǎn)緣雜交中，遇到兩種障礙（ 受精前 和 受精后 ） 離體授粉 （離體 /試管受精）：將未授粉的胚珠或子房從母體上分離下來，進(jìn)行無菌培養(yǎng)，并以一定的方式授以無菌花粉，使之在試管內(nèi)實(shí)現(xiàn)受精的技術(shù)。 培養(yǎng)條件 固體培養(yǎng)基， White， Nitsch（普遍使用）， MS培養(yǎng)基。 混生目型： 兩種方式混生增殖。小麥 8%，枸杞 5% 二、影響因素 （二）培養(yǎng)條件 ph 光照 1012h黑暗和光照交替 溫度 2426℃ 二、影響因素 （三）胚的影響 帶胚的胚乳產(chǎn)生愈傷組織比不帶胚的高。少數(shù)胚乳外植體可轉(zhuǎn)為綠色葉狀叢。 ⑶ 帶果實(shí)的的種子（斛寄生類）， 取授粉幾天后的幼果，表面滅菌后，無菌條件下切開幼果，取出種子，小心分離出胚乳，接種在培養(yǎng)基上。 沒有胚柄存在時(shí)，一定濃度范圍的 KT可促進(jìn)幼胚生長(zhǎng)，但赤霉素作用更好。 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì) 成熟胚一般不需要外源激素就可萌發(fā) ，但加入激素可顯著增加培養(yǎng)物的生長(zhǎng)，尤其對(duì)打破休眠。 幼胚則是異樣的，要求更復(fù)雜的培養(yǎng)基。 1014h 幼胚離體培養(yǎng)的生長(zhǎng)發(fā)育方式； (1)胚性發(fā)育 胚只是在體積上增大甚至超過正常胚大小而不能萌發(fā)成苗。 二、胚胎
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