瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)侯云鵬-文庫(kù)吧在線(xiàn)文庫(kù)
【正文】 ，充分溶解； 1L后，室溫保存。 ③電泳緩沖液還有一個(gè)組分是 EDTA，加入濃度為 12mmol/L，目的是螯合 Mg2+ 等離子，防止電泳時(shí)激活 DNA酶，此外還可防止鎂離子與核酸生成沉淀。 ? 不同大小和構(gòu)象的核酸分子的電荷密度大致相同，在自由泳動(dòng)時(shí)各核酸分子的遷移率區(qū)別很小，難以分開(kāi)。常見(jiàn)的核酸電泳緩沖液有： TAE、 TBE、TPE和 MOPS等。 TAE的缺點(diǎn)是緩沖容量小，長(zhǎng)時(shí)間電泳（如過(guò)夜）不可選用，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。 loading buffer loading buffer 的中文名字是上樣緩沖液 ,6的緩沖液中可以顯示兩條帶，前面的藍(lán)色的條帶是溴酚藍(lán)，代表的片段大小是 300bp，后面的有點(diǎn)綠色的條帶是二甲苯青，代表的片段大小在 4000bp左右。 ③ 制樣 ：根據(jù)上樣緩沖液的濃度加樣，如 6 loading buffer,則 1ul loading buffer +5 ul DNA sample，類(lèi)推。 ④凝膠中加入 EB 進(jìn)行電泳，便于隨時(shí)紫外線(xiàn)下觀察電泳狀態(tài)，但 EB會(huì)導(dǎo)致線(xiàn)性 DNA遷移率下降 15%。將電壓調(diào)到零，關(guān)機(jī)，再取出凝膠， EB染色
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