雜交瘤技術(shù)的實(shí)驗(yàn)原理及其操作演示-文庫吧在線文庫
【正文】 ? 80個(gè)細(xì)胞 /96孔 ?飼養(yǎng)細(xì)胞 (feeder cells) ELISA法檢測(cè)單克隆雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)上清 ，選出分泌特異性抗體的陽性孔 ， 所分泌抗體即為單克隆抗體 。 2. 細(xì)胞融合技術(shù)： 脾細(xì)胞 (B淋巴細(xì)胞 ) 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 長命 不分泌抗體 分泌抗體 短命 分泌抗體 長命 K246。hler和 Milstein, 1975 1984年 Nobel醫(yī)學(xué)獎(jiǎng) 3. 雜交瘤細(xì)胞的篩選 ： 脾細(xì)胞 (B淋巴細(xì)胞 ) 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 脾細(xì)胞 /?脾細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 / ?骨髓瘤細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 脾細(xì)胞 篩選出 不能長期存活 不能長期存活 HAT培養(yǎng)基篩選 H, 次黃嘌呤 。 T, 胸腺嘧啶 DNA 內(nèi)源性途徑 (主要途徑 ) 谷氨酰胺 or 單磷酸尿苷酸 二氫葉酸還原酶 A H T 外源性途徑 (旁路途徑 ) (Hypoxanthine guznine phosphoribosyl transferase) 次嘌呤鳥嘌呤
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