定量生物蛋白質(zhì)組學(xué)之silac技術(shù)(存儲版)
【正文】 SILAC誕生于南丹麥大學(xué)。然后將兩組細(xì)胞混合，提取出蛋白質(zhì)組，并交給質(zhì)譜去測定。標(biāo)記是在樣品處理前引入，隨后進行蛋白質(zhì)分離、酶切和鑒定，后續(xù)實驗對樣品的影響一致，故樣品處理所帶來的定量誤差（bias）會很低。對于那些很難培養(yǎng)，或?qū)ε囵B(yǎng)基成分變化極其敏感的細(xì)胞系而言，這種代謝標(biāo)記的方法也不大奏效。 SILAC的流程（圖片來自賽默飛世爾）SILAC方法有很多優(yōu)勢。細(xì)胞傳代若干代后，穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸完全摻入到蛋白中，取代了原有的氨基酸。然而，相對定量卻更為常用，因為每個目的蛋白的絕對定量都需要昂貴的試劑，也需要花費大量的時間來開發(fā)分析。為了更準(zhǔn)確地比較兩個樣本的蛋白水平，科學(xué)家們通常使用雙向電泳外加質(zhì)譜，然而流程復(fù)雜，通量低，重復(fù)性也欠佳。摘要： 作為蛋白質(zhì)組學(xué)研究中一種強有力的工具，質(zhì)譜在過去很長一段時間內(nèi)只是用于定性研究，
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