抗原或抗體檢測(存儲版)
【正文】 例如含胰島素抗原）與定時的同位素標記的胰島素（抗原）和定時的抗胰島素抗體混合，經(jīng)一定作用時間后，分離收集抗原抗體復(fù)合物及游離的抗原，測定這兩部分的放射活性，計算結(jié)合率。3．酶聯(lián)免疫分析法 酶聯(lián)免疫分析法（enzyme immunoassay,EIA）是當前應(yīng)用最廣泛的免疫檢測方法。圖8 生物素－酶標親合素系統(tǒng)反應(yīng)示意圖（1）酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）:是與上述固相RIA相似的原理，將抗原或抗體吸附在固相載體表面。一個親合素（avidin）分子可以結(jié)合4個生物素分子（biotin）。表 免疫學(xué)測定方法敏感性比較測定方法敏感性（每升）單向免疫擴散試驗＜1～2mg雙向免疫擴散試驗＜1mg火箭電泳＜對流電泳＜免疫電泳＜5～10mg凝集試驗1μg被動血凝試驗1μg血凝抑制試驗補體結(jié)合試驗放射免疫分析法＜1pg酶聯(lián)免疫吸附試驗＜1ng定量免疫熒光分析＜1pg。（3）BASELISA：近年來對酶免設(shè)分析法的改進是使用生物素親合素過氧化物酶復(fù)合物作為指示劑，組成一新的生物放大系統(tǒng)進一步提高檢測的敏感度。前者測定細胞表面抗原或組織內(nèi)的抗原；后者主要測定可溶性抗原或抗體。測定固相載體的放射活性，常用的固相載體有溴化氰（CNBr）海豹化的紙片或聚苯乙烯小管（圖7）。2．放射免疫分析法 放射免疫分析法（radioimmunoassay RIA）應(yīng)用競爭性結(jié)合的原理，應(yīng)作放射性同素標記抗原（或抗體）與相應(yīng)抗體（或抗原）結(jié)合，通過測定抗原抗體結(jié)合物的放射活性判斷結(jié)果，本方法可進行超微量分析，敏感性高，可用于測定抗原、抗體、抗原抗體復(fù)合物。間接法比直接法敏感性高，如果用于檢查抗原的第一抗體是人或動物的只需制備一種抗人或動物的免疫球蛋白熒光抗體（圖5）。四、用標記抗體或抗原進行的抗原、抗體反應(yīng)用熒光素、同位素或酶標記抗體或抗原，用于抗原或抗體檢測是目前廣泛應(yīng)用的敏感、可靠的方法。在一些免疫學(xué)實驗中也可用這種方法，根據(jù)需要特異地消除帶某種抗原的細胞。因抗Rh抗體是IgG只有兩個結(jié)合價，分子較小（不如IgM結(jié)合價多，分子大）很難直接引起Rh+紅細胞凝集?？捎糜趥魅静≡\斷如肥達氏反應(yīng)（Widal reaction）診斷傷寒病。對于免疫球蛋白缺損或增多的疾病的診斷或鑒別診斷有重要意義（圖3）。當抗原和抗體向四周凝膠中擴散，在兩孔間可出現(xiàn)2～3條沉淀線，本法常用于抗原或抗體的定性或定量檢測，或用于兩種抗原材料的抗原相關(guān)性分析（圖2）。將稀釋的含有可溶性抗原的材料重疊于上，讓抗原與抗體在兩液體的界面相遇，形成白色免疫復(fù)合物沉淀環(huán)，故名為環(huán)狀沉淀試驗（ring precipitationtest）,此法簡便易行，需用材料較多是其缺點。檢測這些抗原對各種細胞的分類、分化過程及功能研究、對各種與免疫有關(guān)的疾病的診斷及發(fā)病機制的研究，均有重要意義。因人血清（抗原）和抗體（免疫兔血清）相比，濃度高，故應(yīng)稀釋抗原。（1）根據(jù)免疫復(fù)合物產(chǎn)生的多少來推算樣品中抗原（或抗體）的含量：在一定的反應(yīng)條件下，加入的已知抗體（或抗原）的濃度一定，反應(yīng)產(chǎn)生的免疫復(fù)合物多少與待檢樣品中含有相應(yīng)抗原（或抗體）量成正比。互補程度高，則親和力強?？臻g構(gòu)型互補程度不同，抗原和抗體分子之間結(jié)合力強弱也不同。對抗原或抗體進行定量檢測時，以反應(yīng)中加入抗原和抗體的濃度與形成免疫復(fù)物的濃度呈函數(shù)關(guān)系。也就是表示效價的稀釋度越高，樣品中所含待檢成分越多。（3）人和動物細胞的表面分子：包括細胞表面各種分化抗原（如CD抗原）、同種異型抗原（血型抗原或M
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