抗原或抗體檢測(cè)(存儲(chǔ)版)
【正文】 例如含胰島素抗原）與定時(shí)的同位素標(biāo)記的胰島素（抗原）和定時(shí)的抗胰島素抗體混合，經(jīng)一定作用時(shí)間后，分離收集抗原抗體復(fù)合物及游離的抗原，測(cè)定這兩部分的放射活性，計(jì)算結(jié)合率。3．酶聯(lián)免疫分析法 酶聯(lián)免疫分析法（enzyme immunoassay,EIA）是當(dāng)前應(yīng)用最廣泛的免疫檢測(cè)方法。圖8 生物素－酶標(biāo)親合素系統(tǒng)反應(yīng)示意圖（1）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）:是與上述固相RIA相似的原理，將抗原或抗體吸附在固相載體表面。一個(gè)親合素（avidin）分子可以結(jié)合4個(gè)生物素分子（biotin）。表 免疫學(xué)測(cè)定方法敏感性比較測(cè)定方法敏感性（每升）單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)＜1～2mg雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)＜1mg火箭電泳＜對(duì)流電泳＜免疫電泳＜5～10mg凝集試驗(yàn)1μg被動(dòng)血凝試驗(yàn)1μg血凝抑制試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)放射免疫分析法＜1pg酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)＜1ng定量免疫熒光分析＜1pg。（3）BASELISA：近年來(lái)對(duì)酶免設(shè)分析法的改進(jìn)是使用生物素親合素過(guò)氧化物酶復(fù)合物作為指示劑，組成一新的生物放大系統(tǒng)進(jìn)一步提高檢測(cè)的敏感度。前者測(cè)定細(xì)胞表面抗原或組織內(nèi)的抗原；后者主要測(cè)定可溶性抗原或抗體。測(cè)定固相載體的放射活性，常用的固相載體有溴化氰（CNBr）海豹化的紙片或聚苯乙烯小管（圖7）。2．放射免疫分析法 放射免疫分析法（radioimmunoassay RIA）應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的原理，應(yīng)作放射性同素標(biāo)記抗原（或抗體）與相應(yīng)抗體（或抗原）結(jié)合，通過(guò)測(cè)定抗原抗體結(jié)合物的放射活性判斷結(jié)果，本方法可進(jìn)行超微量分析，敏感性高，可用于測(cè)定抗原、抗體、抗原抗體復(fù)合物。間接法比直接法敏感性高，如果用于檢查抗原的第一抗體是人或動(dòng)物的只需制備一種抗人或動(dòng)物的免疫球蛋白熒光抗體（圖5）。四、用標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗原、抗體反應(yīng)用熒光素、同位素或酶標(biāo)記抗體或抗原，用于抗原或抗體檢測(cè)是目前廣泛應(yīng)用的敏感、可靠的方法。在一些免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中也可用這種方法，根據(jù)需要特異地消除帶某種抗原的細(xì)胞。因抗Rh抗體是IgG只有兩個(gè)結(jié)合價(jià)，分子較小（不如IgM結(jié)合價(jià)多，分子大）很難直接引起Rh+紅細(xì)胞凝集?？捎糜趥魅静≡\斷如肥達(dá)氏反應(yīng)（Widal reaction）診斷傷寒病。對(duì)于免疫球蛋白缺損或增多的疾病的診斷或鑒別診斷有重要意義（圖3）。當(dāng)抗原和抗體向四周凝膠中擴(kuò)散，在兩孔間可出現(xiàn)2～3條沉淀線，本法常用于抗原或抗體的定性或定量檢測(cè)，或用于兩種抗原材料的抗原相關(guān)性分析（圖2）。將稀釋的含有可溶性抗原的材料重疊于上，讓抗原與抗體在兩液體的界面相遇，形成白色免疫復(fù)合物沉淀環(huán)，故名為環(huán)狀沉淀試驗(yàn)（ring precipitationtest）,此法簡(jiǎn)便易行，需用材料較多是其缺點(diǎn)。檢測(cè)這些抗原對(duì)各種細(xì)胞的分類、分化過(guò)程及功能研究、對(duì)各種與免疫有關(guān)的疾病的診斷及發(fā)病機(jī)制的研究，均有重要意義。因人血清（抗原）和抗體（免疫兔血清）相比，濃度高，故應(yīng)稀釋抗原。（1）根據(jù)免疫復(fù)合物產(chǎn)生的多少來(lái)推算樣品中抗原（或抗體）的含量：在一定的反應(yīng)條件下，加入的已知抗體（或抗原）的濃度一定，反應(yīng)產(chǎn)生的免疫復(fù)合物多少與待檢樣品中含有相應(yīng)抗原（或抗體）量成正比?；パa(bǔ)程度高，則親和力強(qiáng)?？臻g構(gòu)型互補(bǔ)程度不同，抗原和抗體分子之間結(jié)合力強(qiáng)弱也不同。對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定量檢測(cè)時(shí)，以反應(yīng)中加入抗原和抗體的濃度與形成免疫復(fù)物的濃度呈函數(shù)關(guān)系。也就是表示效價(jià)的稀釋度越高，樣品中所含待檢成分越多。（3）人和動(dòng)物細(xì)胞的表面分子：包括細(xì)胞表面各種分化抗原（如CD抗原）、同種異型抗原（血型抗原或M
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