酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)多底物動(dòng)力學(xué)(存儲(chǔ)版)
【正文】 B] ? m=4 n=4，每種酶都有 4種 3線(xiàn)圖。將有序機(jī)制的動(dòng)力學(xué)方程進(jìn)行雙倒數(shù)處理： 1 = KmA ( 1+ KmB?KiA ) ? 1 + 1 (1+ KmB) V Vm KmA[B] [A] Vm [B] ? 若將 [B]固定于不同的濃度，則以 1/V ~ 1/[A] 作圖可得一組相交于第二 或第三象限的直線(xiàn)，其交點(diǎn)座標(biāo)為： 1 1 ( 1 KmA ) KiA , Vm KiA 1/V 1/[A] [B1] [B2] [B3] 縱截距為： 1 ( 1+ KmB ) Vm [B] ? 第二次作圖：縱截距 ~1/[B]作圖 ? 由第二次的作圖可知 KmB和 Vm, 代入交點(diǎn)坐標(biāo)中可知 KmA ? 若 [A] →∞(A 飽和時(shí) )： 1 = 1 (1 + KmB ) V Vm [B] 轉(zhuǎn)化為米氏方程 ? 若 [B] →∞(B 飽和時(shí) ): 1 = 1 (1 + KmA ) V Vm [A] ? 這就是水解反應(yīng)可看作是單底物反應(yīng)的原因，因?yàn)榱硪坏孜锸撬?，其濃度可看作是飽和。?EP /?К ﹣ k3 [P] Vr= К 21 [EA] ? К 具有方向性，是一個(gè)矢量。 (2) Theorell Chance (TC 機(jī)制 )： A B P Q E EA EQ E 第二個(gè)底物 B結(jié)合及釋放非常快，沒(méi)有明顯的三元復(fù)合物變構(gòu)過(guò)程。 KmP 、 KmQ ? 抑制劑： I ? 修飾劑： X或 Y ? 反應(yīng)分子數(shù) : Uni(單 ) 、 Bi(雙 )、 Ter(三 ) 、 Quad(四 ) ? 酶反應(yīng)中間物：分為兩類(lèi) (1) 穩(wěn)態(tài)中間物 ： 指酶和底物以共價(jià)鍵結(jié)合形成的較為穩(wěn)定的中間物。 分為 : 非中心復(fù)合物：酶未完全被底物飽和 中心復(fù)合物： 酶已經(jīng)完全被底物飽和， (EAB EPQ)。 ? 少數(shù)脫氫酶和一些磷酸激酶屬于該類(lèi)，例如肌酸激酶 : 肌酸 + ATP ? 磷酸肌酸 + ADP ? 機(jī)制：酶蛋白上的 A、 B結(jié)合位均處于暴露狀態(tài)， 兩者與底物的結(jié)合即互不干擾，也不互相依賴(lài)。然后在各角之間連線(xiàn)上標(biāo)出各步反應(yīng)的 К 。 m=3。 V= num1[A][B] num2[P][Q] coefA [A] + coefB[B] + coefP[P] + coefQ[Q] + coefAB[A][B]+coefAP[A][P]+coefBQ[B][Q]+ coefPQ[P][Q] ? 若不計(jì)產(chǎn)物影響， [P]=0 [Q]=0，則： V= num1[A][B] coefA [A] + coefB[B] + coefAB[A][B] V = Vmf[A][B] KmA[B]+KmB[A] + [A][B] 2. 乒乓機(jī)制動(dòng)力學(xué)常數(shù)的求?。? (1) 雙倒數(shù)圖：若固定 [B]變化 [A] 1 = 1 (1+ KmB + KmA ) V Vm [B] [A] 橫截距： 縱截距： (2) 縱截距 ~ 1/[B]作圖： 從二次作圖的橫縱截距中求取 Vm和 KmB，帶入雙倒數(shù)圖的 橫截距表達(dá)式求取 KmA 。 K3 E : k1 k1 k3 k3 k2 k2 EA: k1[A] k1[A] k3 k2 k3[P] k2 EP: k1 k1[A] k3[P] k2 k3[P] k2 КE = k1k3 + k1k2 + k2k3 КEA= k1k3 [A] + k1k2[A] + k2k3[P] КEP = k1k3[P] +
研究報(bào)告相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1