【正文】 ?轉(zhuǎn)導(dǎo) ?接合 ?原生質(zhì)體融合 第 六 章 ?定義 ： 受體菌自然或在人工技術(shù)作用下直接攝取來(lái)自供體菌的游離 DNA片段，并把它整合到自己的基因組中，而獲得部分新的遺傳性狀的基因轉(zhuǎn)移過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化。通過(guò)接合而獲得新性狀的受體細(xì)胞就稱接合子。當(dāng)前發(fā)酵工業(yè)和其他微生物生產(chǎn)部門所使用的高產(chǎn)菌株 ， 幾乎毫無(wú)例外地都是通過(guò)誘變育種而明顯提高其生產(chǎn)性能的 。 第 六 章 ?分子生物學(xué)分析方法已被用于流行病學(xué)調(diào)查 ?質(zhì)粒指紋圖（ PEP） ?對(duì)噬菌體的敏感性，對(duì)細(xì)菌素的敏感性 第 六 章 ?基因工程是根據(jù)遺傳變異中細(xì)菌可因基因轉(zhuǎn)移和重組而獲得新性狀的原理設(shè)計(jì)的 ?切取目的基因 —— 連接到載體上 —— 轉(zhuǎn)移到工程菌內(nèi)，大量表達(dá)目的基因產(chǎn)物 ?目前已大量生產(chǎn)胰島素、干擾素、多種生長(zhǎng)激素、 rIL2等細(xì)胞因子和乙肝疫苗等生物制品 第 六 章 基因工程 1. 基因工程總體策略 2. 目標(biāo)基因的克隆與鑒定 3. 宿主和載體 4. 重組蛋白的生產(chǎn) 第 六 章 基因工程總體策略 基因工程指用人為的方法將所需要的某一供體生物的 DNA提取出來(lái)，在適當(dāng)?shù)臈l件下用適當(dāng)?shù)拿盖懈詈?，把它與載體 DNA分子連接起來(lái)形成具有自我復(fù)制能力的 DNA分子 ——復(fù)制子，并將它轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增和表達(dá)。 ? 性狀相近關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè) 菌屬 (genus)。 第 六 章 例如“結(jié)核桿菌”（ tubercle bacillus,俗名）用于表示 Mycobacterium tuberculosis（結(jié)核分枝桿菌，學(xué)名）；以此類推有：“綠膿桿菌”用于表示Pseudomonas aeruginosa （銅綠假單胞菌），“白念菌”表示 Candida albicans（白色假絲酵母），“金葡菌”表示 Staphylococcus aureus（金黃色葡萄球菌） 第 六 章 學(xué)名則指一個(gè)菌種的科學(xué)名稱，它是按照 《 國(guó)際細(xì)菌命名法規(guī) 》 命名的、國(guó)際學(xué)術(shù)界公認(rèn)并通用的正式名字。在出版物中，種的加詞與屬名一起均應(yīng)排成斜體。事實(shí)上，英、美等國(guó)學(xué)者經(jīng)常按自己的文種來(lái)對(duì)學(xué)名發(fā)音，影響頗大，且已習(xí)慣成自然。 ? 第 2卷：放線菌以外的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌 。 新版在表型特征基礎(chǔ)上 ， 以 DNA資料對(duì)屬 、 種的分類地位給予決定性的判斷 。 第 六 章 第九版 《 伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè) 》 簡(jiǎn)介 新的版本 ， 在 “ 細(xì)菌分類 ” 一章中 ， 專題論述了近代發(fā)展起來(lái)的一些新的分類方法 ， 如數(shù)值分類 、 核酸在細(xì)菌分類中的應(yīng)用 、 遺傳學(xué)方法 、 血清學(xué)和化學(xué)分類等 。 2 種之間差異超過(guò) 10%，肯定不是同一個(gè)種 ? DNADNA雜交 ?測(cè)定雜合的百分?jǐn)?shù)，如同一種，應(yīng)為 100% ? DNArRNA雜交和 16SrRNA寡核苷酸的序列分析 ?分析后作出相似性圖，關(guān)系近的集中到一起，關(guān)系遠(yuǎn)的在圖上占據(jù)不同的位置 第 六 章 六 細(xì) 菌 分 類 系 統(tǒng) ? 最有代表性和最有影響的細(xì)菌分類系統(tǒng) 《 伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè) 》 （ Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology) 1923年 , 1925年 , 1930年 , 1934年 , 1939年 , 1948年 , 1957年 , 1974年分別出版了第一至第八版，1994年出了第九版 以形態(tài)、生理生化、 G + C mol%、生態(tài)分布等特征為主 第 六 章 第九版 《 伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè) 》 簡(jiǎn)介 和以前的版本相比 ， 在新版中 ， 增加了許多新科 、 新屬和新種 。 為 species 復(fù)數(shù)的簡(jiǎn)寫） 表示一批尚未定種名的芽孢桿菌， 故可譯為“若干芽孢桿菌”。字首一律小寫（即使它是由某一人名衍化而來(lái)，首字母也不應(yīng)大寫）。 ? 泛指某一屬細(xì)菌 ,不特指其中某個(gè)菌種 ,則可在屬名后加 sp.(單數(shù) )或 spp.(復(fù)數(shù) ) ? 如 Salmonella sp. 表示為沙門菌屬中的細(xì)菌 第 六 章 每一種微生物都有一個(gè)自己的名字，名字有俗名（ mon name）和學(xué)名（ scientific name）兩種。種以下又可分為亞種、變種、型、菌株等 第 六 章 ? 種 (species)是細(xì)菌分類的基本單位。 —致死率是最好的誘變劑相對(duì)劑量的表示方法。 第 六 章 ?原生質(zhì)體融合的優(yōu)點(diǎn)： 可以提高重組率 雙親可以少帶標(biāo)記或不帶標(biāo)記 可進(jìn)行多親本融合 有利于不同種間、屬間微生物的雜交 通過(guò)原生質(zhì)體融合提高產(chǎn)量 第 六 章 原生質(zhì)體融合的主要步驟 ? 選擇親株 → →制備原生質(zhì)體 →→原生質(zhì)體融合 → →原生質(zhì)體 再生 → → 篩選優(yōu)良性狀的融合重組子 第 六 章 三、細(xì)菌遺傳變異的實(shí)際意義 ?誘變育種 ?在疾病的診斷、治療與預(yù)防中的應(yīng)用 ?在測(cè)定致癌物質(zhì)中的應(yīng)用 ?在流行病學(xué)中的應(yīng)用 ?在基因工程中的應(yīng)用 第 六 章 誘變育種 ： 是用物理或化學(xué)的誘變劑使誘變對(duì)象內(nèi)的遺傳物質(zhì) （ DNA） 的分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變 ， 引起性狀變異并通過(guò)篩選獲得符合要求的變異菌株的一種育種方法 。獲得新遺傳性狀的受體細(xì)胞，稱轉(zhuǎn)導(dǎo)子。 第 六 章 二、基因重組 ? 定義：凡把兩個(gè)不同性狀個(gè)體內(nèi)的遺傳基因轉(zhuǎn)移到一起，經(jīng)過(guò)遺傳分子間的重新組合，形成新遺傳型個(gè)體的方式，稱為基因重組（ gene rebination）或遺傳重組。 ? 染色體間畸變 ：指非同源染色體間的 易位 。 堿基轉(zhuǎn)換的分子機(jī)制 —— 以亞硝酸為例 第 六 章 若干誘變劑的作用機(jī)制及誘變功能 誘變因素 在 DNA上的初級(jí)效應(yīng) 遺傳效應(yīng) 堿基類似物 摻入作用 AT=GC雙向轉(zhuǎn)換 羥 胺 與胞嘧啶起反應(yīng) GC→AT的轉(zhuǎn)換 亞硝酸 A、 G、 C的氧化脫氨作用 交 聯(lián) AT=GC雙向轉(zhuǎn)換 缺失 烷化劑 烷化堿基（主要是 G） 烷化磷酸基團(tuán) 喪失烷化的嘌呤 糖 磷酸骨架的斷裂 AT=GC雙向轉(zhuǎn)換 AT→TA的顛換 GC→CG的顛換 巨大損傷（缺失、重復(fù)、倒位、易位） 丫啶類 堿基之間相互作用 雙鏈變形 碼組移動(dòng)（＋或－） 紫外線 嘧啶的水合物 形成嘧啶的二聚體 交 聯(lián) GC→AT轉(zhuǎn)換 碼組移動(dòng)（＋或－） 電離輻射 堿基的羥基化核降解 DNA降解 糖 磷酸骨架的斷裂 喪失嘌呤 AT=GC雙向轉(zhuǎn)換 碼組移動(dòng)（＋或－） 巨大損傷（缺失、重復(fù)、倒位、易位） 加熱 C脫氨基 CG→TA轉(zhuǎn)換 Mu噬菌體 結(jié)合到一個(gè)基因中間 碼組移動(dòng) 第 六 章 移碼突變 (frameshift mutation) ? 指誘變劑使 DNA分子中增加（插入）或缺失一個(gè)或少數(shù)幾個(gè)核苷酸，從而使該部位后面的全部遺傳密碼發(fā)生轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯錯(cuò)誤的一類突變。 ?穩(wěn)定性： 變異性狀穩(wěn)定可遺傳 。 R型（ rough）菌落：菌落表面粗糙，枯干，邊緣不整齊。 ?在特殊氣體條件下培養(yǎng) 。 ?6. 巨大質(zhì)粒 （ mega質(zhì)粒 ） 第 六 章 第一節(jié) 常見(jiàn)的細(xì)菌變異現(xiàn)象 ?形態(tài)、結(jié)構(gòu)變異 ?毒力變異 ?耐藥性變異 ?菌落變異 ?生化特性變異 第 六 章 ? 36%食鹽 鼠疫桿菌 ────→ 多形態(tài)性 (衰殘型 )。 ?3. Col因子 （ colicinogenic fact