動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法及其應(yīng)用(1)(存儲版)
【正文】 1) 表面積／體積比大 2) 由于微裁體懸浮于培養(yǎng)基中，是均勻懸浮 培養(yǎng)，簡化了細(xì)胞生長各種環(huán)境因素的監(jiān)測和控制。但是，滾瓶系統(tǒng)勞動強(qiáng)度大，單位體積提供細(xì)胞生長的表面積小。 主要包括： 懸浮培養(yǎng) 微載體培養(yǎng) 微囊化培養(yǎng) 中空纖維法 ? 利用大規(guī)模培養(yǎng)哺乳類細(xì)胞是一項(xiàng)重要的生產(chǎn)生物制品的技術(shù)，包括 疫苗、干擾素、激素、生長因子和單抗 等，具有很高的經(jīng)濟(jì)和社會效益。 但是懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞密度較低，轉(zhuǎn)化細(xì)胞懸浮培養(yǎng)有潛在致癌危險，培養(yǎng)病毒易失去病毒標(biāo)記而降低免疫強(qiáng)力。 ? 微載體是直徑 60250μm的微珠。 7) 勞動強(qiáng)度小，占用空間小 與微載體結(jié)合的生物反應(yīng)器系統(tǒng) ? 收獲細(xì)胞 ? 接種 —— 球傳球 包埋培養(yǎng) 懸浮生長和對貼壁依賴生長的細(xì)胞都適用，細(xì)胞生長的密度高，抗剪切力和抗污染能力強(qiáng)。接種的細(xì)胞就貼在管壁上，并吸取“內(nèi)室”滲透出來的養(yǎng)分，迅速生長繁殖。由流體攪拌加流體循環(huán)，使反應(yīng)器內(nèi)流體混和相當(dāng)好。 上述這一要求是容易實(shí)現(xiàn)的，即加在管上的壓力 應(yīng)比管內(nèi)流動壓力降和氣泡壓力的總和高出 10％。 反應(yīng)器中的液體流速能足以使細(xì)胞微粒懸浮，卻不會損壞脆弱的細(xì)胞；培養(yǎng)的細(xì)胞密度同且細(xì)胞長時間停留在反應(yīng)器中，細(xì)胞生長環(huán)境可方便地調(diào)控。 ? 方法是向 CHO細(xì)胞中導(dǎo)入 p2 p27的基因，使細(xì)胞周期中 G1期延長 (細(xì)胞靜止 )，改造后，細(xì)胞活力正常，外源基因表達(dá)蛋白量提高。 過程監(jiān)控 ? 大規(guī)模動物細(xì)胞培養(yǎng)中由于大量細(xì)胞的代謝，細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境迅速改變，在線過程監(jiān)控更為重要。 細(xì)胞死亡與凋亡 ? 在大規(guī)模動物細(xì)胞培養(yǎng)條件下，細(xì)胞凋亡 /死亡多是在營養(yǎng)成分耗盡、有毒代謝產(chǎn)物增多時發(fā)
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