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色毛電泳ppt課件(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 流非常重要 。電場(chǎng)力: FE = qE 阻 力: F = fν故: qE = fνq— 離子所帶的有效電荷;E — 電場(chǎng)強(qiáng)度;ν— 離子在電場(chǎng)中的遷移速度;f — 平動(dòng)摩擦系數(shù) ( 對(duì)于球形離子: f =6πηγ; γ — 離子的表觀液態(tài)動(dòng)力學(xué)半徑; η — 介質(zhì)的粘度; )所以,遷移速度:( 球形離子 ) 物質(zhì)離子在電場(chǎng)中 差速遷移 是電泳分離的基礎(chǔ)。169。 1937年, Tiselius(瑞典 )將蛋白質(zhì)混合液放在兩段緩沖溶液之間,兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電泳, 第一次 將人血清提取的蛋白質(zhì)混合液分離出白蛋白和 α 、 β 、 γ 球蛋白; 發(fā)現(xiàn) 樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定; 第一次 發(fā)明 自由溶液電泳; 第一臺(tái)電泳儀 ; 1948年, 獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng) ;一、概述 generalization經(jīng)典電泳分析 traditional electrophoresis 利用電泳現(xiàn)象對(duì)某些 化學(xué)或生物物質(zhì)化學(xué)或生物物質(zhì) 進(jìn)行分離分析的方法和技術(shù)叫電泳法或電泳技術(shù)。 按形狀分類: U型管電泳、柱狀電泳、板電泳; 按載體分類:濾紙電泳、瓊脂電泳、聚丙烯酰胺電泳、自由電泳; 傳統(tǒng)電泳分析:操作煩瑣,分離效率低,定量困難,無法與其他分析相比。 帶電粒子的 遷移速度 =電泳 +電滲流; 兩種速度的矢量和 。淌度 μ : 單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的平均電泳速度。 parameters and relation in HPCE1).遷移時(shí)間(保留時(shí)間) HPCE兼具有電化學(xué)的特性和色譜分析的特性。 3).焦耳熱與溫度梯度的影響電泳過程產(chǎn)生的焦耳熱可由下式計(jì)算:?m— 電解質(zhì)溶液的摩爾電導(dǎo); I— 工作電流: cm— 電解質(zhì)濃度; 散熱過程中,在毛細(xì)管內(nèi)形成溫度梯度(中心溫度高),破壞了塞流,導(dǎo)致區(qū)帶展寬。四、高效毛細(xì)管電泳分離模式分離類型八種分離類型,介紹常用的幾種;根據(jù)試樣性質(zhì)不同,采用不同的分離類型;每種機(jī)理的選擇性不同;一、毛細(xì)管區(qū)帶電泳capillary zone electrophoresis , CZE 帶電粒子的遷移速度 =電泳和電滲流速度的矢量和。柱便宜、易制備。所有試樣都按前導(dǎo)離子的速度等速向陽(yáng)極前進(jìn),逐漸形成各自獨(dú)立的區(qū)帶而分離。 1. 將兩種淌度差別很大的緩沖液分別作為前導(dǎo)離子 (充滿毛細(xì)管 )和尾隨離子,試樣離子的淌度全部位于兩者之間,并以同一速度移動(dòng)。 特點(diǎn) :抗對(duì)流性好,散熱性好,分離度極高; 但壽命短 。 實(shí)際操作時(shí),保持毛細(xì)管兩端緩沖溶液平面高度相同。2).進(jìn)樣的影響 當(dāng)進(jìn)樣塞長(zhǎng)度 太大時(shí),引起的峰展寬大于縱向擴(kuò)散。 電荷均勻分布,整體移動(dòng), 電滲流的流動(dòng)為平流 , 塞式流動(dòng) (譜帶展寬很?。?; 液相色譜中的溶
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