db21t18611-20xx水產(chǎn)生物種質(zhì)檢驗(yàn)技術(shù)規(guī)程同工酶(存儲(chǔ)版)
【正文】 ，室溫下聚合40min。 固定液：3份乙醇，1份甘油，5份蒸餾水，混合均勻。 山梨醇。 α磷酸甘油鈉。 三羥甲基氨基甲烷（Tris）。 平均遺傳雜合度(average heterozygosity): H表示群體平均在各座位為雜合子的比例，用于衡量標(biāo)記方式的信息含量程度。附錄A、B、C均為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉衛(wèi)東、赫崇波、高祥剛、李云峰、鮑相渤、李宏俊、蘇浩。在一個(gè)群體中一個(gè)基因可能有許多等位基因。 乙二胺四乙酸（EDTA）。 DL蘋果酸。 氯化硝基四氮唑藍(lán)（NBT）。 氨基黑10B。將凝膠模具清洗安裝好后，根據(jù)所需分離膠濃度，按照附錄A配制分離膠并混勻后，立即灌注到凝膠模具中，至膠面離板頂3cm處停止。 40％的蔗糖溶液：40g蔗糖溶于100ml蒸餾水中。 制膠模具。 取樣同工酶不僅具有種的特異性，而且同一個(gè)體不同組織，同一組織不同發(fā)育階段都具有特異性，所以取樣應(yīng)采取同一發(fā)育階段的個(gè)體的同一組織。 前電泳：預(yù)電泳結(jié)束后，將點(diǎn)樣孔中的殘留水分吸干，用微量進(jìn)樣器將10μl～30μl分析樣品加到加樣孔底部，在25mA電流下電泳10min. 正式電泳：200V恒壓下再電泳4～5h，至溴酚藍(lán)距膠板下沿 lcm時(shí)停止。8 結(jié)果分析 酶位點(diǎn)與等位基因分析：根據(jù)酶的結(jié)構(gòu)組成和同工酶在組織中所表現(xiàn)的酶譜特征，確定每種同工酶的編碼基因位點(diǎn)、多態(tài)位點(diǎn)的等位基因頻率。 固定：脫色后的凝膠放入乙醇冰醋酸甘油水的混合液中，其混合比例為3：1：1：5，固定2h或過(guò)夜。將上清液移入新的離心管中，加入等體40％的蔗糖溶液和1滴1％溴酚藍(lán)溶液，一75℃下保存?zhèn)溆?。：?高速冷凍離心機(jī)：轉(zhuǎn)速15000r/min以上，冷凍溫度為4℃。 ()：，蒸餾水定容到1L。 分離膠緩沖液（TrisHCl ）： 1mol/L鹽酸混合后，蒸餾水定
化學(xué)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1