核增生李斯特氏菌檢測概述(1)(存儲(chǔ)版)
【正文】 6AHT 4Np9At )AFF9HrMamp。dG8Ag6Z1u*oorbd+w(x6PQ JMPYHp7evHpRaHiqCSGPV0SH+wWpyYpiE00amp。52I7izif05rQ%uTp(SEJGLhLjGPa8af amp。MmVrRpTWe)m I8LyUUU76%CUvGhfK*Q mlqy(q)ouiGBh)fL1T4I1pZ(K4ps xABFarJl68(amp。CXwTLAidF20oeJkhwCXAj2ho$7Gamp。 UNIQUETM W9w5qOfmGKz!ry72D3bpB4*cLs6ZBe%c2$vFJWargZU3amp。 ℃ ，48177。、GENETRAK174。 2℃ ，2648177。 OXA平板 單核增生李斯特氏菌 ATCC 19117 48h， 35℃ 培養(yǎng) OXA平板 無害李斯特氏菌ATCC 33090 48h， 35℃ 培養(yǎng) 檢測程序 鑒定 ? 藍(lán)色菌落檢驗(yàn)（ Henry illumination） ? 典型運(yùn)動(dòng)：相差顯微鏡，輕微旋轉(zhuǎn)或翻跟頭 動(dòng)力試驗(yàn)： 7天，傘形生長 ? 過氧化氫酶 試驗(yàn)：陽性 ? 革蘭氏染色 ：陽性短桿菌 ? 溶血試驗(yàn) ：穿刺接種血平板 ? 硝酸鹽還原試驗(yàn)： 5天，陰性 ? 糖發(fā)酵試驗(yàn) ：葡萄糖、麥芽糖和七葉靈，李斯特菌屬反應(yīng)均為陽性，除格氏李斯特甘露醇陰性，李斯特其他種甘露醇陰性， 木糖 和 鼠李糖 最有檢測意義 動(dòng)力試驗(yàn) 血平板 單核增生李斯特氏菌 ATCC 19117 36h， 35℃ 培養(yǎng) 血平板 無害李斯特氏菌 ATCC 33090 36h， 35℃ 培養(yǎng) 血平板 伊氏李斯特氏菌 ATCC 19119 24h， 35℃ 培養(yǎng) 單核增生李斯特氏菌檢測流程 25g樣品 +225ml BLEB基礎(chǔ)（加入丙酮酸鈉） 加入萘啶酮酸、鹽酸吖錠黃、放線菌酮 30℃ 4hr 劃線接種 OXA平板 30℃ 24hr和 48hr 科瑪嘉李氏菌顯色培養(yǎng)基 TSAYE分純 35℃ 24hr48hr 35℃ 24hr 過氧化氫酶試驗(yàn)、革蘭氏染色、溶血試驗(yàn)、糖發(fā)酵試驗(yàn)（木糖、鼠李糖） API Listeria 35℃ 2448hr 報(bào)告結(jié)果 35℃ 1824hr 方法名稱 一次增菌 二次增菌 分離 鑒定 快速方法 SN 0184 1993 加工 MBP 30℃ ， 1824h EB 30℃ ， 24/48h MMA/ OXA （ 35℃ ， 2448h） 藍(lán)色菌落；典型運(yùn)動(dòng)；過氧化氫酶；革蘭氏染色；溶血試驗(yàn)；尿素酶試驗(yàn)；硝酸鹽還原； MRVP；三糖鐵；糖發(fā)酵；動(dòng)力試驗(yàn)；協(xié)同溶血 *；血清學(xué)檢驗(yàn) *；小鼠毒力試驗(yàn) * 無 未加工 EB （ 30℃ ， 24/48h） GB/T 2022 EB （ 30177。 檢測程序 增菌 目前常用的單核增生李斯特氏菌檢測增菌肉湯主要有 半量 Fraser肉湯 、 Fraser肉湯 （ FB）、 UVM（ Modified University of Vermont broth，也叫 UVM1）、 LEB（ Listeria enrichment broth）和 BLEB（ buffered Listeria enrichment broth） 半量 Fraser肉湯和 Fraser肉湯 ? 具有 選擇性 和 區(qū)別性 。 ? 由該菌造成的腦膜炎的致死率可高達(dá) 70%，敗血癥的死亡率達(dá) 50%，圍產(chǎn)期或新生兒感染的死亡率超過 80%，懷孕期婦女的感染，母親通常能存活下來。 ? 不利用枸櫞酸鹽， 40%膽汁不溶解，吲哚、硫化氫、尿素、明膠液化、硝酸鹽還原、賴氨酸、鳥氨酸均陰性， VP、甲基紅試驗(yàn)和精氨酸水解陽性。 ? 生長溫度范圍為 242℃ （也有報(bào)道在 0℃ 能緩慢生長），最適培養(yǎng)溫度為 3537℃ 。但是，其中通常只有單核增生李斯特氏菌和人類的李斯特氏菌癥（ listeriosis）相關(guān)。 ? 在 57%的血平板上，菌落通常也不大，灰白色，刺種血平板培養(yǎng)后可產(chǎn)生窄小的 β溶血環(huán) 。 生物學(xué)特性 抵抗力 ? 該菌對理化因素抵抗力較強(qiáng)，在土壤、糞便、青儲(chǔ)飼料和食品中能長期存活； ? 對堿和鹽抵抗力強(qiáng)， 6070℃ 經(jīng) 520min可殺死，70%酒精 5min、 %石炭酸、 %氫氧化鈉、%福爾馬林 20min 可殺死此菌； ? 濕熱滅菌（ 121℃ ，至少 15min）和干熱滅菌（ 160170℃ ，至少 1hr）可殺滅該菌，對紫外線和 γ射線敏感 ； ? 該菌對青霉素、氨芐青霉素、四環(huán)素（已產(chǎn)生抗性）、氨基糖苷類、氯霉素均敏感。 ? 易感者： ? 孕婦 /胎兒 — 圍產(chǎn)期和新生兒的感染； ? 接受皮質(zhì)激素、抗癌劑治療、器官移植 治療、艾滋病患者等免疫缺損者； ? 癌癥病人 — 尤其是白血病的患者； ? 不太常見的報(bào)道 — 糖尿病、肝硬化、哮喘和潰瘍性結(jié)腸炎的患者； ? 年紀(jì)較大的人； ? 沒有免疫缺陷的健康的人，食用污染該菌尤其是大量污染該菌的食品后，也有患病的危險(xiǎn)。 ? 氯化鋰 、 吖啶黃 和 萘啶酮酸 作為選擇性因子。 1℃ ，24h） LB2 （ 30177。 2h） 初步鑒定：純菌菌落形態(tài)
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