【正文】 ：稱取 346g酒石酸鉀鈉和 100gNaOH，加 水溶解并稀釋至 1000毫 升。 2022/2/11 45 樣品溶液的測定 吸取斐林試劑甲、乙液各 5毫升，置于 250毫升錐形瓶中，加 20毫升水，從滴定管中加入 (V11)毫升樣品溶液，加熱使其在 2分鐘內(nèi)沸騰，保持 2分鐘，加 2滴次甲基蘭溶液，趁熱以每 2秒一滴的速度滴加樣液，直至藍(lán)色消失為終點。 常量凱式定氮法 常量凱氏定氮法是將樣品分解消化后的消化液全部用于測定，取樣量大，測定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精確度都很高。 2022/2/11 54 （ 2）蒸餾與吸收 (1)、蒸餾器的洗滌 (2)、小三角瓶瓶內(nèi)加 5mL4%硼酸， 1滴指示劑 (粉紅色 ) (3)、安好蒸餾裝置 (下端插入三角瓶液面下 )。 W— 取樣量。 2022/2/11 61 甲醛法 氨基酸同時具有氨基和羧基，是兩性電解質(zhì)，水溶液中的氨基酸為兩性離子，因而不能直接用堿滴定氨基酸的羧基。酸的測定對微生物發(fā)酵過程也具有一定的指導(dǎo)意義 。 ⑵ 1%酚酞指示劑 稱取酚酞 1g溶解于 100 ml 95%乙醇中 。 2022/2/11 67 （ 2）測定 滴定用移液管吸取濾液 50 ml，注入三角瓶中，加入酚酞指示劑 35滴用 mol/L 的 NaOH 溶液滴定至淺（微）紅色且 30 秒不褪色。 ③ 如果樣液顏色過深或渾濁 ， 則宜用電位滴定法 ， 經(jīng)測 pH值來定終點 ， 一邊滴定 ， 一邊電磁攪拌 ， 到規(guī)定 的 pH值時為終點 。 2022/2/11 72 167。 此法只能測定游離態(tài)脂肪 ， 而結(jié)合態(tài)脂肪無法測出 ， 要想測出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測出 。 （ 2） 使用揮發(fā)乙醚或石油醚時，切忌直接用火源加 熱，應(yīng)用電熱套、電水浴、電燈泡等。 2022/2/11 82 回收溶劑、烘干、稱重 待脂肪瓶于水浴上蒸干后，置 100105℃ 烘箱中干燥 24小時。 5．乙醇作用：使蛋白質(zhì)沉淀，同時溶解一些碳水化 合物 (糖 )、有機酸等，使其不進(jìn)入醚相，乙醇、 丁醇等為破乳劑，降低表面張力，促進(jìn)脂肪球聚 合 (表面活性劑等 )促進(jìn)分層 6．石油醚作用：降低乙醇在乙醚中的溶劑度，促進(jìn) 分層。 （ 2） 儀器 ①高溫爐 ②坩堝 ③坩堝鉗 ④干燥器 ⑤分析天平 2022/2/11 88 （ 3） 試劑 （ 4） 測定步驟 瓷坩堝的準(zhǔn)備 → 樣品預(yù)處理 → 炭化 → 灰化 ① 1： 4鹽酸溶液 ② %三氯化鐵溶液和等量藍(lán)墨水的混合液 ③ 6mol/L硝酸 ④ 36%過氧化氫 ⑤辛醇或純植物油 2022/2/11 89 a. 瓷坩堝的準(zhǔn)備 將坩堝用鹽酸 （ 1： 4） 煮 1~2小時 ， 洗凈晾干后， 用三氯化鐵與藍(lán)墨水的混合液在坩堝外壁及蓋上寫上編號 ， 置于規(guī)規(guī)定溫度 （ 500~550℃ ） 的高溫爐中灼燒 1小時 ， 移至爐口冷卻到 200℃ 左右后 ， 再移入干燥器中 ， 冷卻至室溫后 ， 準(zhǔn)確稱重 ， 再放入高溫爐內(nèi)灼燒 30分鐘 ， 取出冷卻稱重 ， 直至恒重 （ 兩次稱量之差不超過 ） 。 2022/2/11 93 在灼燒前 ， 先加入濃硫酸 ， 使有機物易于除去 ，然后再高溫灼燒 ， 用這種方法得到的殘留灰分是硫酸鹽 ， 因此稱為硫酸灰 。 ③ 灼燒后的坩堝應(yīng)冷卻到 100℃ 以下再移入干燥器 中，否則因熱的對流作用，易造成殘灰飛散，且 冷卻速度慢，冷卻后干燥器內(nèi)形成較大真空，蓋 子不易打開。 因為用這種方法得到的灰分的主要成分是碳酸鹽 ， 因此稱為碳酸灰法 。后面用乙醚提取脂肪時，因乙醇可溶于 乙醚，故需加入石油醚．降低乙醇在醚中的溶解 度，使乙醇溶解物殘留在水層，并使分層清晰。 ② 液體樣品： 稱取 50ml大試管中，加 10m1鹽酸 水解 將試管放入 7080℃ 水浴中，每 510min用玻璃棒攪拌一次，至樣品脂肪游離水解完全為止，約 4050min。 ⑤ 稱重 抽提結(jié)束后立即取下提取管 ， 將其下口放到乙醚回收瓶內(nèi) ， 然后將提取瓶放到 100150℃ 烘箱烘至恒重 。 2022/2/11 74 索式提取法 （ 經(jīng)典方法 ） 1. 方法原理 樣品經(jīng)前處理后 ， 放入圓筒濾紙內(nèi) ，將濾紙筒置于索式提取管中 ， 利用乙醚或石油醚在水浴中加熱回流 ， 使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中 ， 回收溶劑后所得到的殘留物 ， 即為脂肪 （ 粗脂肪 ） 采用這種方法測出游離態(tài)脂，此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等許多物質(zhì)，并不是純脂肪，所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。如啤酒色度測定。 如果是深色樣品可采取以下措施： ① 滴定前 （ 50 ml 樣液已放入三角瓶內(nèi)的 ） 再用 無 CO2 水稀釋一倍 。 ④ 咖啡樣品 ， 粉碎 ， 加乙醇 ， 放置過夜 。 這種方法需要指示劑顯示終點 。 2022/2/11 63 167。 （ 5）當(dāng)樣品消化液不易澄清透明時，可將凱氏燒瓶 冷卻加入 30％ 過氧化氫 23ml后再繼續(xù)加熱消化 （ 4）消化時必須在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，消化過程中開始 要溫和加熱，等泡沫消失穩(wěn)定后再提高溫度。 V1— 滴定餾出液時消耗鹽酸的體積。 （ 1）試樣的消化 沿凱氏瓶壁以傾斜方式緩慢倒入 100mLH2O于凱氏瓶中，稀釋消化液。 化學(xué)法 折射率測定 紫外分光光度法 旋光法 。 2022/2/11 44 樣品溶液預(yù)測 吸取斐林試劑甲、乙液各 5毫升，置于 250毫升錐形瓶中，加 20毫升水，加熱使其在 2分鐘內(nèi)沸騰，保持 2分鐘，加 2滴次甲基蘭溶液，趁熱以先快后慢的速度從滴定管中滴加樣液，待溶液藍(lán)色變淺時，以每 2秒一滴的速度滴加樣液，直至藍(lán)色剛好褪去為終點。 愛農(nóng)法測定還原糖的基本原理及方法 在熱源上進(jìn)行滴定操作訓(xùn)練 2022/2/11 40 二 、 實驗原理 淀粉水解 (C6H10O5)n + H2O nC6H12O6 酸或酶 斐林試劑 氧化還原反應(yīng) 滴定終點 次甲基藍(lán)為指示劑，終點時由藍(lán)色到無色 2022/2/11 41 三 、 儀器 、 試劑 5%鹽酸溶液 20%氫氧化鈉溶液 斐林甲液：稱取 (CuSO4 有 重量法 (通過測定 Cu2O重量 ， 求出糖含量 )；容量法 (方法很多 ， 典型方法是直接用被測糖液滴定一定體積的斐林試劑 ， 以次甲基藍(lán)為指示劑 ， 稱蘭 愛農(nóng)法 ， 還有將生成的 Cu2O沉淀溶解 ， 用碘量法或高錳酸鉀法測定 )； 比色法 (將 Cu2O還原雜多酸 、 磷鉬酸 、 砷鉬酸 ， 生成蘭色物質(zhì) ， 以比色法測定 )。 2022/2/11 33 所有的單糖都具有游離的羰基 （ 醛基或酮基 ） ， 稱為還原糖 。 ， 常用的一些含水分較低的產(chǎn) 品 ， 如活性干酵母 ， 其水分測定時應(yīng)注意拆封后 及時測定 ， 以免吸濕 。 （ 2） 樣品制備： 為保證樣品中的水分能迅速揮發(fā)逸出 ， 一般樣品都要進(jìn)行制備 ， 經(jīng)過粉碎 、 混勻 、 分取等過程 ， 使樣品達(dá)到相應(yīng)的要求 。因此，一般分析中多采用濕法消化。目前常用的助熔劑有 K2CO Na2CO KHSO 焦硫酸鉀等。 一般來說 ， 常用方法有： 溶解 、 干法灰化和濕法消化 。 今年來發(fā)展很快 ， 應(yīng)用日益廣泛 。 2. 掌握生產(chǎn)過程情況及決定工藝條件 生產(chǎn)是否正常 ， 工藝條件是否合適 ， 往往要由分析檢驗的數(shù)據(jù)來確定 。 分析是對物質(zhì)組成及其含量，變化進(jìn)行研究。 產(chǎn)品質(zhì)量是否符合質(zhì)量要求必須通過分析測定 。 采樣：采取樣品的過程 1. 采樣量 保證采取樣品具有代表性 （ 1） 采樣數(shù)量 （ 2） 采樣點數(shù) 2022/2/11 15 （ 1） 采樣數(shù)量 最低采樣量由下列經(jīng)驗公式確定： Q (kg)=Kdα d樣品的直徑 每個部門都有自己的 K, α值 ，