原核生物的基因重組(存儲版)
【正文】 （ b） Hfr菌株的部分基因順序。 F′所帶的基因可以 與染色體發(fā)生重組；也可以繼續(xù)存在于 F′因子上。 左圖 : 不同 Hfr菌株的形成方式，以不同的起點不同的順序轉移基因。 E. coli 是有性別分化的，決定性別的是其中的 F質粒， F質粒還是合成性菌毛基因的載體。這一過程稱為高頻轉導。 因為染色體上的 pac與 P22 DNA的 pac序列不完全相同， 利用效率較低，這種 “ 錯裝 ” 機率一般僅約 106108 形成轉導顆粒的噬菌體可以是溫和的，也可以是烈性的，但必須具有能偶爾識別宿主 DNA的包裝機制，并在宿主基因組完全降解以前進行包裝。 特點： 人工轉化 用 CaCl2處理細胞， PEG介導、電穿孔、基因槍法 等是常用的人工轉化手段（使細胞膜更易于透過 DNA ）。 轉化因子進入細胞前還會被酶解成更小的片段 ， 約 8kb。 目前已知有二十多個種的 G+和 G細菌具有自然轉化的能力 此過程可以發(fā)生在土壤和海洋環(huán)境中，可能是自然界遺傳交換的重要方式。 轉化子（ transformant） ： 經轉化后出現了供體性狀的受體細胞稱為 轉化子 ， 即轉化成功的菌落。 2. 轉化模型 （ 1） 轉化因子 本質是離體的 DNA片斷或質粒 DNA 。 4. 轉染 (transfection)： 現在把 DNA轉移至動物細胞的過程也稱轉染 提純的噬菌體 DNA以轉化的（而非感染）途徑進入微生物細胞并表達后產生完整的病毒顆粒。 (1) 意外的發(fā)現 1951年， Joshua Lederberg和 Norton Zinder為了證實大腸桿菌以外 的其它菌種是否也存在接合作用，用二株具不同的多重營養(yǎng)缺陷型 的鼠傷寒沙門氏菌 LT22A(trp)（ P22） 和 LT2(his)進行實驗： 用 “ U”型管進行同樣的實驗時，在供體和受體細胞不接觸的情況下，同樣出現原養(yǎng)型細菌！ 沙門氏菌 LT22A(trp)是攜帶 P22噬菌體的溶源性細菌 另 一株 LT2(his)是非溶源性細菌 一個表面看起來的常規(guī)研究卻導致 一個驚奇和十分重要發(fā)現的重要例證！ 基因的傳遞很可能是由可透過“ U”型管濾板的 P22噬菌體介導的 (在接種 LT22A的一端出現了原養(yǎng)型 ) （普遍性轉導這一重要的基因轉移途徑的發(fā)現） (2) 轉導模型 轉導噬菌體為什么 “ 錯” 將宿主的 DNA包裹進去 ? 噬菌體的 DNA包裝酶 也能識別染色體 DNA上類似 pac的位點 并進行切割，以 “ headful”的包裝機制包裝進 P22噬菌體外殼， 形成只含宿主 DNA的轉導噬菌體顆粒 （假噬菌體） 。 雙重溶原菌 在紫外輻射等因子的誘導下 ,原噬菌體容易被切割下來， 產生等量的缺陷噬菌體和正常噬菌體，該裂解物稱為高頻率轉導裂解物 ，用這樣的裂解物去感染細菌，將比低頻率轉導裂解物產生多得多的轉導子。 ? 在所有對象中，接合現象研究得最多、了解得最清楚的是 E. coli 。 中斷雜交（ interrupted mating） 技術和基因定位 利用 Hfr F的接合過程， 在不同時間取樣，并把樣品猛烈攪拌以 分散接合中的細菌，然后分析受體細菌基因型，以時間 (分鐘 )為 單位繪制遺傳圖譜，該圖譜是細菌染色體上基因順序的直接反映。 F′ F與 F+ F的不同： 給體的部分染色體基因隨 F′一起轉
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