【正文】 作用長期以來一直為人們所忽視 。 目前世界上許多人都在對內(nèi)生真菌進行分離并研究其產(chǎn)物 。 之美稱。銀杏各組織含有抑菌物質(zhì) ， 據(jù)報道 ， 銀杏根、莖、葉、果肉 (外種皮 )及果仁的提取物對水稻紋枯病菌、黃瓜炭疽病菌和番茄青枯病菌等有明顯的抑制生長作用 [ 6~ 8] 。 最近有研究表明 ： 從內(nèi)生 真菌中分離到的生物活性物質(zhì) ， 有 51%是以往不為人知的 ， 而 相比之下 ，土壤菌群只有 38%。全世界現(xiàn)已發(fā)現(xiàn) 69000 多種真菌 ， 而 且每年還以 1000 余種的新種遞增 ， 保守估計全世界真菌總數(shù)可達 150 萬余種 [3]。 內(nèi)生真菌的生物學作用 內(nèi)生真菌長期生活在植物體內(nèi)的特殊環(huán)境中 ， 并與宿主協(xié)同進化 ， 在演化過程中二者形成了互惠共生關(guān)系 ， 一方面內(nèi)生真菌可從宿主中吸收營養(yǎng)供自己生長需要 ， 另一方面內(nèi)生真菌在宿主的生長發(fā)育和系統(tǒng)演化過程中起重要的作用 。 （ 2） 增強宿主對環(huán)境脅迫的抵抗能力 Clay 等發(fā)現(xiàn)侵染內(nèi)生真菌的草遭受真菌病害影響的程度遠低于沒有感染內(nèi)生真 菌的 [10]， 這是因為有的內(nèi)生真菌在宿主內(nèi)和純培養(yǎng)中產(chǎn)生有毒物質(zhì) ， 如麥角生物堿等 ，這些內(nèi)生真菌的代謝產(chǎn)物可對植物致病菌 、 線蟲 、 昆蟲及哺乳動物有抗性 。 活化石 。 但近年來由于抗生素和食品保藏劑的廣泛使用 ， 出現(xiàn)了越來越多的耐藥性菌株 ， 因此有必要尋找各種來源的新型抗菌劑 。 而 生活在植物體內(nèi)這一特殊進化環(huán)境中的內(nèi)生真菌能產(chǎn)生與宿主相同或相似的具有生理活性的代謝產(chǎn)物 ， 目前對這一領(lǐng)域的開發(fā)和研究相對較少 ， 研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)生真菌產(chǎn)物中存在多種新型活性物質(zhì) ， 如抗病毒 、 抗菌 、 抗癌等物質(zhì) 。 以上供試菌種均由本研究室保存 。 (3)3mol/LNaAC()： 80ml 水中加入 無水乙酸鈉 (NaAC)， 調(diào) ， 加水定容至 100ml， 滅菌備用 。 根據(jù)在 PDA 培養(yǎng)基上是否產(chǎn)生孢子 進行初步分類 。 . 內(nèi)生真菌 XY— 28 菌株 DNA 的提取 采用改良的氯化芐 法 [17] (l)取 左右凍干菌絲加液氮研磨 ， 轉(zhuǎn)移至 7ml 滅菌離心管中 ， 依次加入抽 提液 2mL、 10%、 氯化 芐 ， 振蕩使成乳狀 ， 50℃ 水浴 l~2h， 其間每隔 l0min銀杏內(nèi)生真菌的分離培養(yǎng)與生物活性測定 10 振蕩混勻一次 。 通過在培養(yǎng)基中加入孟加拉紅抑制細菌和部分酵母的生長 ， 同時采用 4 種不同的培養(yǎng)基進行分離 ， 獲得了 29 株菌種 ， 其中 %在 PDA 培養(yǎng)基上為產(chǎn) 孢 真菌 ， 且交鏈 孢 霉屬 、曲霉屬 和青霉屬等環(huán)境常見菌較普遍 ， 不產(chǎn)孢 真菌只有 %。 以孟加拉紅分離所得的 29 株菌中 ， 有 12 株具有抗菌活性 ， 占該分離方法總菌株數(shù)的 %， 其中不產(chǎn) 孢 真菌 4 株 ， 分別占總菌株數(shù)和活性菌株的 %、 %。(4)所用培養(yǎng)基不能保證所有內(nèi)生真菌都生長 。 研究表明內(nèi)生真菌在宿主體內(nèi)產(chǎn)生特定的生物活性化合物 ， 既可以有助于它在植物體生境中形成優(yōu)勢地位 ， 也可以保護植物免受病原菌侵襲 ， 因此 ， 素有 。 許多內(nèi)生真菌在 PDA 培養(yǎng)基或無菌的植物組織上不產(chǎn)生 孢 子 。 Guo 等對棕擱(Livistona chinensis)內(nèi)生真菌進行誘 孢 處理 ,將內(nèi)生菌接種到含有麥芽膏培養(yǎng)基和無菌棕擱葉 柄的三角瓶中 ,在紫外燈和黑暗下 12h 交替培養(yǎng) ,3 個月后形成了子實體 [29]。 以 水瓊脂法分離所得菌株的活性明顯高于孟加拉紅方法 。re clear about the terms of the agreement. It might be best to get advice from an experienced adviser, for example, at a Citizens Advice Bureau. To find your nearest CAB, including those that give advice by , click on nearest CAB. For more information about making a claim to an employment tribunal, see Employment tribunals. The (lack of) air up there Cay man Islandsbased Webb, the head Watch m of Fifa39。s plaint. In a statement the Russian side added: We found no racist insults from fans of CSKA. Age has reached the end of the beginning of a word. May be guilty in his seems to passing a lot of different life became the appearance of the same day。s about how he felt and I would like to speak to him first to find out what his experience was. Uefa has opened disciplinary proceedings against CSKA for the racist behaviour of their fans during City39。 致 謝 本文是在閻華老師悉心指導(dǎo)下完成的，從論文選題、實驗設(shè)計到實驗材料的采集、實驗的實施、論文的撰寫，導(dǎo)師都傾注了大量的心血，老師學術(shù)上嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度，對實驗操作的嚴格要求以及對科學真理的執(zhí)著追求的精神，一直鞭策激勵著我，這將使我受益終身，在此向老師表示由衷的感謝！ 在論文期間， 湖北文理學院 化學工程與食品科學學院的 余海中、 孫永 林 、張火云等老師都給予我熱情的指導(dǎo)，并幫我解決實驗過程中遇到的困難；另外在實驗過程中還得到本實驗室同學 石銀 、 許為 、 李雪梅 、胡瑛瑩 的熱情支持和幫助，在此一并向他們表示衷心的感謝！ 感謝化學工程與食品科學學院各位領(lǐng)導(dǎo)、老師在大學四年里對我的諄諄教導(dǎo)、關(guān)心支持！ 銀杏內(nèi)生真菌的分離培養(yǎng)與生物活性測定 18 參考文獻 [1] Stone JK Bacon CW， White overview of endo Phytic microbes：endo Phytismdefined. BaConCW ， WhiteJFJr. Mierobial EndoPhytes. NewYork： MarcelDekker， [2] BaconCW ， WhiteJF. Microbiai endoPhytes, ， 2022 [3] 劉蕓，殷紅，彭輝等 .植物內(nèi)生真菌一潛在的天然藥物新來源 [J].中華現(xiàn)代中西醫(yī)雜志， 2022， 3(5)： 404405 [4] Hoveland and economic significance of the Acremonium endophytes to performance of animals and grass plant [J]. 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