第十五章混合斑的檢驗(存儲版)
【正文】 等位基因 3． DNA分 析 影響混合斑 DNA檢驗結果分析的因素 影 子 帶 引物延伸過程中 TaqDNA酶發(fā)生滑脫所致 ， 特別見于復合擴增 非特異性帶 各等位基因的 DNA片段變性后復性時 ， 隨機形成的雜合二聚體 。 方法： 第一步： 檢材 +1%SDS+100ug/ml蛋白酶 K37度 2~3h 500r/min離心 15min、 去上清 ， 精子留在沉淀物中 第二步： +40Mm/L DTT+1%SDS+100ug/ml蛋白酶 K 注意： 消化條件選擇 主要是第一步消化時間 消化不完全 當陰道上皮細胞過多 ， 不能使兩者徹底分離 過渡消化 可能消化一部分精子細胞 ， 導致精子 DNA減少 *** 實際操作前 ， 應進行涂片檢查 ， 根據精子和陰道上皮 細胞的比例 ， 對消化時間 、 溫度 、 試劑的濃度等進行 適當的調整 提取方法選擇 采用有機溶劑的方法比較好 酚 氯仿能夠去掉混合斑中的精漿蛋白 ， 陰道分泌液 、 細
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