【正文】 羥甲基糠醛含量 OD 值 濃度 (mg/L) 稀釋倍數(shù) 樣品濃度 (mg/L） 平均值（ mg/L） 糠醛 200 300 400 5羥甲基糠醛 200 300 400 小麥麩皮酸解液的脫毒條件優(yōu)化 活性炭用量對酸解液脫毒效果的影響 向小麥麩皮酸解液中分別添加粉末狀的活性炭 %， %， %， %。 將配置好的發(fā)酵液分別等量加入到 4瓶 250 mL的錐形瓶中，滅菌后分別在超凈工作臺上接入 2 mL的寄生曲霉種子培養(yǎng)液，放入恒溫搖床中 200 r/min， 30℃下培養(yǎng)。 探究 糠醛與 5羥甲基糠醛對蘋果酸發(fā)酵抑制的耐受性 寄生曲霉發(fā)酵蘋果酸周期的探究 本實驗發(fā)酵所用的菌種為寄生曲霉。 小麥麩皮酸解液中糠醛與 5羥甲基糠醛含量測定 小麥麩皮粉碎并過 30 目篩，在 80℃ 烘干后室溫保存。此溶液可在 4℃下保存數(shù)月 [13]。經(jīng)測量不同濃度梯度的糠醛相對應的 OD 值如圖 21 圖 21 糠醛標準曲線 y = R178。有文獻指出可以利用酸解的方法對小麥進行處理，可以使小麥麩皮中的纖維物質轉化為 木糖、葡萄糖、阿拉伯糖等單糖，而且糖含量以及糖化率較理想 [4]。此后，人們嘗試利用微生物法直接生產(chǎn)制取 L蘋果酸，但由于成本高，生產(chǎn)規(guī)模小，未能夠實現(xiàn)工業(yè)化 [5]。 在酸解小麥麩皮的過程中會產(chǎn)生糠醛、 5羥甲基糠醛等物質，這些物質會對后期菌種發(fā)酵利用糖化液有影響；本文對小麥麩皮酸解過程中糠醛、 5羥甲基糠醛等物質含量的多少進行測定，并且利用曲霉發(fā)酵制備蘋果酸的特性，在發(fā)酵過程中分別添加糠醛、 5羥甲基糠醛等物質，研究這些物質對曲霉發(fā)酵蘋果酸的影響及適應濃度等。 關鍵詞 ： 小麥麩皮 糠醛 5羥甲基糠醛 活性炭 蘋果酸 合肥師范學院 2021 屆本科生畢業(yè)論文（設計） II ABSTRACT This paper explored furfural and 5HMF which is produced by the acid solution of wheat bran for malic acid fermentation inhibition tolerated. Detoxification on wheat bran acid solution by activated carbon, activated carbon concentration, temperature and time on the acid hydrolysate toxic treatment removal effect offurfural, 5HMF, find the optimal detoxification effect is under the condition of activated carbon content of 1%, 30 ℃ , 30 min. With glucose as carbon source, the effects of different concentrations of furfural and 5HMF malic acid fermentation, found their inhibitory effect on malic acid fermentation was positively correlated with concentration. The wheat bran acidsolution for detoxification, can greatly reduce the content of furfural and 5HMF, reduced inhibition which produces malic acid fermentation of wheat bran. Key words: Wheat bran Furfural 5HMF Activated carbon Malic acid合肥師范學院 2021 屆本科生畢業(yè)論文（設計） III 目 錄 1 引 言 .................................................. 1 本課題的目的及意義 .................................... 1 國內(nèi)外發(fā)展狀況 ....................................... 1 2 材料和方法 .............................................. 2 實驗材料與試劑 ....................................... 2 實驗用具與設備 ....................................... 3 實驗方法 ............................................. 3 3 結果與分析 .............................................. 7 小麥麩皮酸解液中糠醛與 5羥甲基糠醛含量測定 .............. 7 小麥麩皮酸解液的脫毒條件優(yōu)化 ........................... 7 探究糠醛與 5羥甲基糠醛對蘋果酸發(fā)酵抑制的耐受性 ........... 9 小麥麩皮酸解液脫毒后對蘋果酸發(fā)酵的影響 ................. 12 4 討 論 ................................................. 12 參考文獻 ................................................. 14 合肥師范學院 2021 屆本科生畢業(yè)論文（設計） 1 1 引 言 本課題的目的及意義 L蘋果酸在蔬菜和蘋果中普遍存在，是 一種 極其 重要的有機酸 [1]； 其 口感與天然蘋果的酸味相接近，是一種優(yōu)良的酸味劑和 保鮮劑 ； 它具有 味道柔和， 酸度大， 滯留時間長等特點 [2]。 對小麥麩皮 酸解液 脫毒 后 ，可以大量減少 其中 糠醛與 5羥甲基糠醛的含量，減小其對小麥麩皮發(fā)酵產(chǎn)生蘋果酸的抑制作用。小麥麩皮作為一種可再生資源既得到合理利用，又增加了蘋 果酸的生產(chǎn)途徑，降低了蘋果酸的生產(chǎn)成本。 在 上個世紀 初，人們研究發(fā)現(xiàn)某些霉菌和酵母可產(chǎn)生 L蘋果酸。 小麥麩皮作為面粉生產(chǎn)的副產(chǎn)物，每年有大量的產(chǎn)量，卻不能夠得到有效的利用。用時將糠醛標準貯備液用 50%乙醇準確稀釋至 mg/L，分別配制濃度為 、 、 、 、 、 mg/L 的梯度濃度標準溶液，以 50%乙醇 為空白，分光光度法測定 OD276處吸光值，繪制標準曲線，建立標準 曲線 回歸方程 [10]。 2,7 – 萘二酚溶液：取 1 g 2,7 – 萘二酚溶解在 100 mL 98%濃硫酸中。 樣品測定方法： 吸取樣品溶液 mL（蘋果酸濃度控制在 ～ mg/L）于干凈試管中， 取 mL 分析純的濃硫酸，沿管壁緩慢加入，再加入 mL 2,7 萘二酚試劑，放入 100℃水浴鍋中加熱 20 min，冷卻至室溫后， 分光光度法測定 OD390處吸光值，根據(jù)標準回歸方程計算出樣品中蘋果酸含量。做三次平行組，結果取平均值，并進行單因素方差分析 [14]。7H2O g/L、 MnSO4 g/L、 NaCl g/L[15]。 3 結果與分析 小麥麩皮酸解液中糠醛與 5羥甲基糠醛含量測定 經(jīng)計算得到 ,小麥麩皮酸解液中糠醛的濃度為 mg/L， 5羥甲基糠醛的濃度為 mg/L。 溫度對酸解液脫毒效果的影響 向小麥麩皮酸解液中添加活性炭含量均為 1%，分別在 30℃， 40℃， 50℃， 60℃下攪拌 30 min，觀察其對小麥麩皮酸解液的脫毒能力 [14]，見圖 33 圖 33 溫度對酸解液脫毒效果的影響 由圖 33 可以看出， 當溫度在 20℃～ 30℃時 ， 吸附性曲線 呈下降 趨勢； 30℃～ 50℃時 ， 吸附性曲線呈上升趨勢 ； 而 50℃～ 60℃時 ， 呈下降趨勢 ；經(jīng)方差分析，發(fā)現(xiàn)溫度對小麥麩皮酸解液中 糠醛與 5羥甲基糠醛的脫去 有顯著影響 （ P） 。發(fā)酵完成后產(chǎn)酸量如圖 36 圖 36 不同濃度 5羥甲基糠醛對蘋果酸發(fā)酵的影響 1014182226300 200 400 600 800 1000蘋果酸（g/L） 糠醛（ mg/L） 0510152025300 200 400 600 800 1000蘋果酸（g/L） 5羥甲基糠醛（ mg/L） 合肥師范學院 2021 屆本科生畢業(yè)論文（設計） 12 經(jīng)方差分析可得出， 5羥甲基糠醛含量對寄生曲霉發(fā)酵產(chǎn)酸量存在 極 顯著差異(P)。 如今，蘋果酸的 需求量越來越大， 出現(xiàn)了供不應求的 局面 [5]， 小麥麩皮作為一種可再生 資源 ， 其作為原料發(fā)酵蘋果酸是一種 經(jīng)濟、可行的方式。s Day on February 14, characterized by bouquets of roses, chocolates and romantic candlelight dinners, than they do about their homegrown day for lovers. Even Qixi is nowadays referred to as the Chinese Valentine39。s largest virgin forest, and known for its spring and ecological environment, Arxan is marveled at by many tourists as the purest land on earth. You cannot miss out the Autumn of Arxan. It is definitely the best with brightlycolored scenery full of emotions. Autumn in the northern part of the country es earlier than the South. A September rain followed by the footprints of Autumn brings more colors to the once emerald green mountain and blooming grassland. Shutterbugs flock to see for themselves the marvel of splendid colors around the mountains and waters, many of whom have travel a long distance and even camp here only to capture a moment of the nature wonder. The silver birch turns golden, while the larch is still proudly green. You will find yourself drowned in the intoxicating red of the wild fruits as well as the glamour of flowers in full blown. And your heart will be lingering on the woods as it39?？啡┑暮吭礁?，對蘋果酸發(fā)酵的抑制作用越明顯；而 5羥甲基糠醛濃度在高于 300 mg/L時其抑制作用便不隨其濃度的增加而有明顯的提高。 糠醛與 5羥甲基糠醛對蘋果酸發(fā)酵的影響 （ 1）糠醛對蘋果酸發(fā)酵的影響 將發(fā)酵培養(yǎng)液分為 兩大 組，每 小 組 6 瓶 發(fā)酵液 ， 含量 都 是 50 mL，分別加入不同體積的糠醛，使得每組發(fā)酵液中糠醛含量成梯度，分別是 0 mg/L， 100 mg/L， 300 mg/L， 500 mg/L，700 mg/L， 900 mg/L；每組接入的寄生曲霉種子培養(yǎng)基為 2 mL，移入恒溫搖床中在 200 r/min， 30℃條件下發(fā)酵 5 天。因此，選用活性炭含量為 1%，此時糠醛脫去率為 %，