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正文內(nèi)容

動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 合細(xì)胞。 雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體。 (四)、單克隆抗體的制備過(guò)程 : ①免疫動(dòng)物 注射抗原的目的是什么? 獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞) 誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用方法是什么? 滅活的仙 臺(tái)病毒 如何進(jìn)行篩選? 具有篩選作用的培養(yǎng)基(選擇培養(yǎng)基) ?種 BB 、 B瘤 、 瘤瘤 、 雜交細(xì)胞 如何獲得大量的單克隆抗體? ②免疫 B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備 ③細(xì)胞融合 ④雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng) ⑤雜交瘤細(xì)胞的篩選 ⑥分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立 ⑦單克隆抗體的大量制備 ? ? 抗原 效應(yīng) B細(xì)胞 篩選 篩選 ( AA型、 BB型) AB型雜交瘤細(xì)胞 能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞 過(guò)程: 抗原 小鼠 效應(yīng) B細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞融合、篩選 多孔培養(yǎng)板單個(gè) 細(xì)胞培養(yǎng),篩選 能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群 體外培養(yǎng) 體內(nèi)培養(yǎng) 提取出單克隆抗體 ,選用哪兩種細(xì)胞進(jìn)行融合?為什么選擇這兩種細(xì)胞? 漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞 漿細(xì)胞能產(chǎn)生 單一抗體 ,但不能無(wú)限增殖;骨髓瘤細(xì)胞 能無(wú)限增殖 ,但不能產(chǎn)生單一抗體。 鼠 — 雞、鼠 — 兔、鼠 — 猴、人 — 鼠、人 — 兔、 人 — 雞、人 — 蛙、酵母菌 — 雞 、人 — 胡蘿卜等 ?重要用途: 制備單克隆抗體 。 (二)動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程 與植物原生質(zhì)體融合原理相同,方法類(lèi)似。 缺點(diǎn): 產(chǎn)量低,純度低, 特異性差 。 五、單克隆抗體的應(yīng)用 請(qǐng)同學(xué)們根據(jù)自己所收集的資料,談?wù)剢慰寺】贵w的應(yīng)用。 ,為什么要選用 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞? 哺乳動(dòng)物感染抗原后,其體內(nèi)會(huì)形成相應(yīng)的 B淋巴細(xì)胞, B淋巴細(xì)胞能分泌相應(yīng)的抗體凝聚或殺死這些抗原。我們以制備單克隆抗體為例來(lái)說(shuō)明這一問(wèn)題。 知識(shí)拓展 單倍體( haploid)是指具有配子染色體數(shù)目的個(gè)體。單倍體具有很好的應(yīng)用價(jià)值:在植物育種上,單倍體經(jīng)過(guò)加倍可以使后代迅速純合,縮短育種年限;由于單倍體經(jīng)加倍后,在理論上各基因位點(diǎn)應(yīng)處于純合狀態(tài),對(duì)后代進(jìn)行選擇時(shí),選擇到的個(gè)體代表著真實(shí)的變異,避免了雜交育種中雜交優(yōu)勢(shì)對(duì)選擇個(gè)體的干擾,提高了選擇效率;用單倍體作為轉(zhuǎn)基因的受體,獲得的轉(zhuǎn)基因材料經(jīng)加倍后基因即可純合,避免了體細(xì)胞作為受體,會(huì)由于后代分離需
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