全面組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室及操作技術(shù)(存儲版)
【正文】 蒸汽壓力滅菌鍋 干熱消毒柜 無菌瓶頂過濾裝置 噴霧消毒器 （參考圖） （參考圖） 無菌操作設(shè)備 超凈工作臺 無菌接種箱 細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備 搖 床 培養(yǎng)架 HZC250恒溫振蕩培養(yǎng)箱 150C 250D 光照培養(yǎng)箱 細(xì)胞學(xué)鑒定設(shè)備 光學(xué)研究顯微鏡、實(shí)體顯微鏡、倒置顯微鏡 倒置顯微鏡 光學(xué)顯微鏡 玻璃器皿 三、培養(yǎng)器皿及實(shí)驗(yàn)用具 培養(yǎng)皿 三角瓶 培養(yǎng)瓶 金屬材質(zhì)用具 鑷子 解剖刀 接種針 四、洗滌技術(shù) 玻璃器皿洗滌 新購置玻璃器皿 1%稀 HCl 浸漬 12h 洗衣粉洗滌 清水沖洗 晾干備用 已用過的玻璃器皿 塑料用品洗滌 新的塑料器皿打開即用 已用過的塑料器皿 2%NaOH浸泡12h 清水沖洗 2%— 5%鹽酸浸泡30min 清水沖洗 蒸餾水沖洗 晾干備用 金屬用品洗滌 熱洗衣粉水洗凈 沖洗 擦干 配方成分 弱液 次強(qiáng)液 強(qiáng)液 常用配方 重鉻酸鉀（ g） 濃硫酸（ ml） 蒸餾水（ ml） 50 100 1000 100 200 1000 60 800 200 100 200 800 清潔液配方 五、滅菌技術(shù) 物理方法： 物理滅菌干熱、濕熱、射線處理、物理除菌、過濾、離心、沉淀等 化學(xué)方法： 消毒劑、抗菌素滅菌 滅菌方法 滅菌 （ 1）培養(yǎng)基滅菌： 高溫高壓濕熱滅菌法 壓力在 104— 104Pa 溫度在 121℃ 滅菌 20— 30min （ 2）玻璃器皿滅菌： 蒸汽高壓消毒滅菌 干熱消毒滅菌 飽和蒸汽壓力與其對應(yīng)的溫度 飽和蒸汽壓力 溫度（ ℃ ） 飽和蒸汽壓力 溫度（ ℃ ） kg/cm2 1b/m2 kg/cm2 1b/m2 0 2 4 6 8 10 12 14 100 15 16 18 20 22 24 30 50 （ 3） 塑料器皿滅菌： 多采用 高壓蒸汽消毒滅菌 （ 4）金屬用具滅菌： 灼燒滅菌 浸入 95%酒精，后置于酒精火焰上灼燒，冷卻后使用 （ 5）接種室滅菌 空氣消毒滅菌 接種室 超凈工作臺 紫外燈照射 70%— 75%的酒精擦洗 培養(yǎng)材料的接種 紫外燈照射 （ 6）外植體滅菌 流水沖洗 10— 20min或更長時間 70%— 75%酒精中浸泡30s %— %氯化汞液中浸泡 10min左右 蒸餾水沖洗4— 5次 在 10%的次氯酸鈉、飽和漂白粉浸泡30min左右 備用 常用消毒劑消毒滅菌比較表 消毒劑 使用濃度 （ %） 去除難易 消毒時間 （ min） 效果 次氯酸鈣 次氯酸鈉 漂白粉 溴水 過氧化氫 升汞 酒精 抗生素 硝酸銀 9~10 2 飽和溶液 1~2 10~12 ~1 70~75 4~5（ mg/L 1 易 易 易 易 最易 較難 易 中 較難 5~30 5~30 5~30
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