【正文】 當(dāng)不合格的檢疫物沒有有效的處理方法，或雖有處理方法，但在經(jīng)濟(jì)上不合算，時(shí)間不允許的，應(yīng)退回或采用焚燒、深埋等方法銷毀?；瘜W(xué)處理是種子、苗木等繁殖材料病害防除的重要手段，也常用于交通工具和貯運(yùn)場(chǎng)所的消毒。因此，要仔細(xì)觀察，測(cè)量較多的數(shù)量，防治把種內(nèi)變異鑒定位不同的種。 ? 卡勃過篩分離法 ―― 本法用于從大量土壤中分離各類線蟲。在發(fā)夾關(guān)閉時(shí)，熒光染料和猝滅劑極端靠近，熒光幾乎完全被猝滅 分子信標(biāo) (Molecular beacon) 變性：“分子信標(biāo)”柄部因高溫變性而呈卷曲狀，熒光染料遠(yuǎn)離淬滅劑，發(fā)出熒光 分子信標(biāo) (Molecular beacon) 退火：“分子信標(biāo)”發(fā)夾環(huán)部因與靶序列互補(bǔ)而雜交，“分子信標(biāo)”發(fā)夾完全展開，發(fā)出熒光：如無靶序列存在“分子信標(biāo)”因柄部序列互補(bǔ)回復(fù)發(fā)夾，無熒光 分子信標(biāo) (Molecular beacon) 延伸：“分子信標(biāo)”因升溫與靶序列脫離，延伸反應(yīng)順利進(jìn)行 分子信標(biāo) (Molecular beacon) 反應(yīng)結(jié)束：“分子信標(biāo)”與擴(kuò)增產(chǎn)物雜交發(fā)出熒光，熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物量成正比 分子信標(biāo) (Molecular beacon) 雜交誘捕 PCRELISA原理 實(shí)時(shí)熒光 PCR原理 核酸斑點(diǎn)雜交技術(shù) ? 原理 ：采用帶有放射性或非放射性物質(zhì)標(biāo)記的已知序列核酸單鏈作為探針， 在一定條件下與靶病毒的核酸單鏈退火形成雜交雙鏈。 非典型肺炎”元兇冠狀病毒 生物學(xué)檢測(cè)技術(shù) ? 鑒別寄主檢測(cè) 以鑒別寄主反應(yīng)或指示植物為依據(jù)的方法。 ? 靈敏度取決于每次分析樣品中目標(biāo)病原菌的最低劑量，以及樣品制備方法對(duì) PCR反應(yīng)的影響。 取 10g稻種，脫下谷殼，剪碎或磨碎， 放入已滅菌處理的燒杯中 取 10g稻種，脫下谷殼，剪碎或磨碎， 放入已滅菌處理的燒杯中 混勻后加入 10ml融化的肉汁胨瓊脂 培養(yǎng)基，搖勻凝成平板 在 2528℃ 溫箱中，培養(yǎng) 1012h 記載各培養(yǎng)皿中的噬菌斑數(shù)，然后再 換算成每克種子的噬菌斑數(shù) 細(xì)菌的?；允删w測(cè)定 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA) 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 (Enzyme linked immunology assay, ELISA)是把抗原、抗體的免疫反應(yīng)和酶的高效催化反應(yīng)有機(jī)結(jié)合而發(fā)展起來的一種綜合技術(shù)。 接種方法 ? 按照柯赫氏法則，從發(fā)病植物上得到的分離物，在健康的寄主植物上接種發(fā)病并與先前癥狀一致，然后再次從發(fā)病部位分離到與先前相同的分離物，才能證明該分離物是引致這種病害的病原物。葉片上病斑常呈水漬狀，上有細(xì)菌溢膿。供試材料種植在經(jīng)過高壓蒸汽滅菌處理或干熱滅菌的沙礫、石英砂中，在隔離場(chǎng)所和適宜條件下栽培，根據(jù)幼苗和成株的癥狀鑒定。 ? 離心管內(nèi)容已形成一層極難沉降的孢子薄膜 。 ? 用于種子、糧谷、豆類中的菌嬰、菌核和病秕籽粒。 ? 有害生物的帶有率越低，檢驗(yàn)方法的靈敏度越低，檢驗(yàn)精度要求越高，所需樣品數(shù)量就越多。 檢驗(yàn)檢疫的樣品 ? 同一國(guó)家和地區(qū)來源，同一運(yùn)輸工具，同一品名（種苗則為同一品種）的貨物統(tǒng)稱為一 批 ，按批進(jìn)行檢驗(yàn)、放行或處理。一般表現(xiàn)為頭痛、痙攣、口吐泡沫，嗜睡，震顫。 鹽酸克倫特羅 ? 俗稱瘦肉精 ? 食用豬肉內(nèi)臟后出現(xiàn)心慌、手腳不由自主抖動(dòng)、頭暈、乏力，心率加速、肌肉顫動(dòng)、頭痛、惡心、發(fā)熱及寒戰(zhàn)。 農(nóng)作物農(nóng)藥殘留 ? 有機(jī)磷殺蟲劑：甲胺磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、久效磷和磷胺（ 2020年 1月 1日禁用），甲拌磷、乙拌磷、甲基異硫磷、氧化樂果等； ? 有機(jī)氯殺蟲劑：六六六、滴滴涕、硫丹、林丹和七氯等； ? 除蟲菊酯 ：聯(lián)苯菊酯、氯氰菊酯、氯氰菊脂、氰戊菊脂等； ? 殺菌劑：惡醚唑等。 致病微生物 動(dòng)植物、動(dòng)植物產(chǎn)品在養(yǎng)殖、生產(chǎn)、加工、儲(chǔ)藏和運(yùn)輸過程中都有可能感染致人生病的微生物，人類接觸或食用后將導(dǎo)致感病，危害健康，嚴(yán)重的將導(dǎo)致死亡。 國(guó)際植物保護(hù)公約的產(chǎn)生 ? 為了進(jìn)一步發(fā)揮國(guó)際植物檢疫的作用，在《 葡萄根瘤蚜（芽）公約 》 的基礎(chǔ)上，于 1929年在羅馬將其修改為 《 國(guó)際植物保護(hù)公約 》 ，并成立了國(guó)際植物保護(hù)公約組織（ IPPC）。 ? 2020年 10月 1日起，歐盟因中國(guó)部分地區(qū)有松材線蟲的危害，也針對(duì)中國(guó)出口歐盟的貨物木質(zhì)包裝采取了檢疫措施。 松材線蟲 ? 松材線蟲是一種能夠?qū)е箩樔~樹致病和死亡的植物有害生物，原產(chǎn)于北美。 ? 當(dāng)年有 30多個(gè)國(guó)家和地區(qū)（包括中國(guó)）禁止從美國(guó)進(jìn)口水果和蔬菜，給美國(guó)的水果生產(chǎn)商一個(gè)沉重的打擊。為防止外來有害生物傳入和危害，必須實(shí)施動(dòng)植物檢疫。動(dòng)植物檢疫才逐漸演變成現(xiàn)在的模式。到死的時(shí)候，整個(gè)人是黑的。 ? 14世紀(jì)，歐洲發(fā)生了一場(chǎng)非常大的鼠疫流行。 ? 人類在社會(huì)實(shí)踐中逐漸認(rèn)識(shí)到防止外來的動(dòng)植物有害生物傳播和蔓延也可采取檢疫的措施來達(dá)到目的。生物的生存和發(fā)展在當(dāng)?shù)厥艿礁鞣矫嬉蛩氐闹萍s，處于一個(gè)相對(duì)平衡的狀態(tài)，有害生物也不例外。 葡萄根瘤蚜 1860年，法國(guó)從美國(guó)引進(jìn)了葡萄苗，結(jié)果也從美國(guó)傳入了葡萄的害蟲－－葡萄根瘤蚜，結(jié)果在 25年內(nèi)使 250萬英畝葡萄園毀滅，經(jīng)濟(jì)損失達(dá) 200萬法郎。 ? 繼美國(guó)之后，歐盟、加拿大等國(guó)家和地區(qū)也相繼對(duì)我國(guó)出口木質(zhì)包裝提出了嚴(yán)格的檢疫要求，嚴(yán)重阻礙了我國(guó)具木質(zhì)包裝貨物的出口，一是大大增加了出口成本，二是延遲了出口的時(shí)間。發(fā)生面積已超過 8萬公頃，死亡的寄主樹木 2020萬株以上，累計(jì)給中國(guó)造成直接經(jīng)濟(jì)損失近 50億元、對(duì)社會(huì)和生態(tài)等產(chǎn)生的間接損失上百億元。該公約在防止葡萄根瘤蚜的傳播方面起到積極的作用。已苛刻到無法接受的程度，這就是所謂的技術(shù)性貿(mào)易壁壘措施。 ? 以含抗生素的牛奶為例，人類食用含抗生素超標(biāo)的牛奶后，不僅會(huì)增加人體內(nèi)細(xì)菌的耐藥性，一旦患病，很可能無藥可治，而且會(huì)抑制和殺死人體內(nèi)正常的寄生的菌落，破壞腸道內(nèi)細(xì)菌的平衡，降低人體的免疫力，引起感染性疾病。兩大美國(guó)可樂巨頭沒有對(duì)取自印度的地下水做足夠的過濾，沒有應(yīng)用有效的凈化水源技術(shù)。對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有損害。 ? 由于發(fā)現(xiàn)含有蘇丹紅 1號(hào)成分，全國(guó)所有肯德基餐廳停止售賣新奧爾良烤翅和新奧爾良烤雞腿堡兩種產(chǎn)品，同時(shí)銷毀所有剩余調(diào)料。 ? 檢驗(yàn)所要求的精度 。 一、直接檢驗(yàn) ? 是用于檢驗(yàn)檢疫具有明顯癥狀的植物材料，可作初步的診斷 ? 現(xiàn)場(chǎng)快速檢查 ? 肉眼，放大鏡或?qū)嶓w顯微鏡。滴加在血球 計(jì)數(shù)板上，用高倍顯微鏡檢查孢子種類并計(jì)數(shù)，據(jù)此可計(jì) 算出種子的帶菌量。 ? 優(yōu)點(diǎn) ：容易檢查根部和綠色部分，也可避免相互傳染。 瓊脂平皿法： 吸水紙法 ： 培養(yǎng)皿 培養(yǎng)皿 吸水紙 培養(yǎng)皿 蒸餾水 種子 培養(yǎng)皿 日光或 紫外燈 2025℃ 710d 實(shí)體顯微鏡下 逐粒種子檢查 特別注意觀察種子上菌絲體的顏 色、疏密程度和生長(zhǎng)特點(diǎn)、真菌 繁殖結(jié)構(gòu)的類型和特征。 進(jìn)一步診斷 ? 分離培養(yǎng)：選擇新鮮的病斑或病鍵組織交界處 ―― 表面消毒 ―― 清水洗凈 ―― 碾碎稀釋―― 劃線培養(yǎng) ―― 觀察 提取液系列稀釋 在金氏 B（ KB）培養(yǎng)基平板上涂布 在 25℃ 和無光照條件下培養(yǎng) 3d后 紫外光或近紫外光照射下有藍(lán)色熒光的 菌落，為假單胞桿菌，可能是暈?zāi)璨【? 選擇典型菌落作進(jìn)一步的鑒定 菜豆種傳暈?zāi)?