【正文】 y242。謝謝觀 看第九十 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。納米孔單分子測(cè)序的特點(diǎn)：準(zhǔn)確度高，納米孔單分子技術(shù)準(zhǔn)確率能達(dá)到 %，且一旦發(fā)現(xiàn)替換錯(cuò)誤也能較容易 (r243。而且納米孔單分子技術(shù)可直接讀取甲基化的胞嘧啶，而不像傳統(tǒng)方法那樣必須要用重亞硫酸鹽處理。由于 dNTP在熒光信號(hào)檢測(cè)區(qū)停留的時(shí)間（毫秒級(jí)）與它進(jìn)入和離開(kāi)的時(shí)間（微秒級(jí)） 相比 (xiānɡ bǐ)會(huì)很長(zhǎng)，所以信號(hào)強(qiáng)度會(huì)很大。在下一個(gè) dNTP被添加到合成鏈之前，這個(gè) dNTP的磷酸基團(tuán)會(huì)被氟聚合物（fluoropolymer）切割并釋放，熒光分子離開(kāi)熒光信號(hào)檢測(cè)區(qū)。Scope的優(yōu)勢(shì)：?jiǎn)畏肿?(fēnzǐ)測(cè)序減少了試劑的使用，測(cè)序成本價(jià)格大大降低。 通過(guò)不斷循環(huán)，將會(huì)在Flow Cell的固相表面上獲得上萬(wàn)條成簇分布的雙鏈待測(cè)片段。表面結(jié)合：Solexa的測(cè)序時(shí)利用微注射系統(tǒng)將已經(jīng) (yǐnk249。用激光掃描反應(yīng)板表面，在讀取每條模板序列第一輪反應(yīng)所聚合上去的核苷酸種類(lèi)后，將這些熒光集團(tuán) (j237。這個(gè)過(guò)程可能產(chǎn)生誤差。nǐ)圖第七十二 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。ngguāng)素氧化 (yǎnghu224。、第二代測(cè)序方法： GS、第一代測(cè)序方法：雙脫氧鏈終止法（ Sanger法）原理：由于 ddNTP（ 雙脫氧核苷三磷酸 ）與 dNTP（ 對(duì)硫磷 ）相比缺乏 3`OH，參與 DNA鏈不能形成下一個(gè)磷酸二脂鍵，因此，被用來(lái)中斷 DNA合成。nj236。uL/min第五十九 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。不同濃度的葡萄糖的響應(yīng) (xiǎngy236。n)焊接后 ,作為電極 ,制成 微流控芯片檢測(cè)池 ,在微流控芯片的通道內(nèi)壁通過(guò)共價(jià)鍵合法固定 葡萄糖氧化酶 ,制成 酶微反應(yīng)器 。原理：基于葡萄糖經(jīng)過(guò)固定有葡萄糖氧化酶的 酶反應(yīng)器 時(shí)產(chǎn)生 過(guò)氧化氫 ,過(guò)氧化氫在一定的正的工作電位下在工作電極表面被氧化 ,釋放出電子 ,產(chǎn)生 氧化電流 。氯化鈉 (分析純 ,天津市博迪化工有限公司 )。戊二酸 (分析純 ,沈陽(yáng)化學(xué)試劑廠 )。試劑：葡萄糖氧化酶 (GOD,石英毛細(xì)管 (河北永年 (yǒnɡ本實(shí)驗(yàn)將 葡萄糖氧化酶 直接 固定 在微流控芯片通道的 內(nèi)壁 上 ,使 酶反應(yīng)和電極反應(yīng) 過(guò)程都集中的微流控芯片通道中進(jìn)行 ,實(shí)現(xiàn)反應(yīng)器的 集成化 ,并由于芯片表面較粗糙 ,可增加酶的擔(dān)載量 ,提高了該生物傳感器的靈敏度 。數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)采集并保存數(shù)據(jù)。uL/min。shuǐ)為分析樣本，進(jìn)行采樣、計(jì)數(shù)、預(yù)處理及檢測(cè)。104Hz的關(guān)系曲線。|Z|作為擾動(dòng)振幅。mV) 下大腸桿菌標(biāo)本 (6Hz，新制大腸桿菌標(biāo)本靜置 將玻璃基片和蓋片對(duì)位粘合，即構(gòu)成復(fù)合式玻璃 PDMSum，寬度為 mm2，增加響應(yīng)靈敏度的同時(shí)提高信號(hào)均勻性和重現(xiàn)性。d2為 20技術(shù)在玻璃基片上沉積的電極，對(duì)電極間距 k大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)合成樣本 :):甘露醇 (日本奧林巴斯公司 )儀器與試劑： VersaSTAT3pi224。mL，檢出限為 的條件下，大腸桿菌的測(cè)試范圍為 優(yōu)化條件：擾動(dòng)振幅 c232。C30s,60采用血球計(jì)數(shù)板 (上海求精生化試剎儀器有限公司 )進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù) ,并調(diào)整細(xì)胞懸液濃度。將細(xì)胞消化后 ,重懸于 1實(shí)時(shí)定量 RTPCR焚光檢測(cè)系統(tǒng) (x236。（圖）第三十二 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。Tokyo,nɡ)系統(tǒng)示意圖第三十 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。（了解 (liǎojiě)）自動(dòng)化液滴生成及操控系統(tǒng)的構(gòu)建：液滴生成及操控系統(tǒng)主要由液滴定量 量取 、液滴 儲(chǔ)存 及樣品儲(chǔ)存平臺(tái)等結(jié)構(gòu)構(gòu)成 ,并采用 mmx13mm的方形芯片。LifeLifeGibco,Switzerland。běi)永年銳洋色譜器件有限公司Tygon（聚乙烯） 由于這種細(xì)胞異質(zhì)性的存在 ,轉(zhuǎn)錄組研究需要在單細(xì)胞水平進(jìn)行。此外 ,該系統(tǒng)可在試劑消耗、檢測(cè)通量及系統(tǒng)集成化微型化等方面進(jìn)一步優(yōu)化改進(jìn) ,有望在大規(guī)模高通量分析領(lǐng)域發(fā)揮重要的作用。玻璃研磨過(guò)程中要帶 防護(hù)眼鏡 以保護(hù)眼睛。C80176。tǒnɡn)上液滴的熒光強(qiáng)度值 ,得到熒光強(qiáng)度隨反應(yīng)循環(huán)數(shù)增加的變化曲線。)程序控制 Japanzh232。（了解）第十八 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。)序列來(lái)源于 %NaOH溶液 ,作為光刻顯影液。實(shí)驗(yàn)溶液配制：硅烷化試剩 :將 OTCS與異辛烷混合作為硅烷化試劑 ,體積比為 %1%均可 ,現(xiàn)用現(xiàn)配。氟化銨 (NH4F):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試別有限公司 ,上海。)玻璃 (bō)DNA和 RNA)模板拷貝數(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確定量分析的一種現(xiàn)代分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù) ,已經(jīng)廣泛地用于分子診斷 ,疾病研究 ,臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。 （知道）第十四 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。、納升級(jí) (shēng第十一 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。自然水體中大腸桿菌的檢測(cè)： 由于地表水中細(xì)菌的濃度經(jīng)常 30i)代表含有 CS（殼聚糖）的運(yùn)行緩沖 ,箭頭表示電滲流方向。通過(guò)施加相應(yīng)的電壓對(duì)細(xì)菌細(xì)胞進(jìn)行在線富集和濃縮。ng)預(yù)涂敷處理。隨后 ,用 1um。 近紅外核酸熒光染料 SYTO30coli)購(gòu)買(mǎi)于廣東微生物種質(zhì)資源庫(kù)。材料和儀器三羥基甲基氨基甲燒 (Tris),硼酸 ,乙二胺四乙酸 (EDTA)購(gòu)買(mǎi)于Aldrich公司 (Milwaukee,WI,USA)。由于 CS（殼聚糖） 帶有大量 正電荷 因此常被用于絮凝吸附劑和不同作用的綁定試劑。（了解）第三 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。o)通過(guò)檢測(cè)什么檢測(cè)大腸桿菌第二 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。主要通過(guò)檢測(cè)什么檢測(cè)大腸桿菌 (d224。jūn)：菌落數(shù)量大腸桿菌生成物間接檢測(cè) n)低濃度細(xì)菌微生物超靈敏檢測(cè)ngyu225。)可使其用于細(xì)菌濃縮 ,并且作為掃集試劑可以保持細(xì)胞的活性。nɡ細(xì)菌懸浮液的準(zhǔn)備： 大腸桿菌在 rpm（每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)）離心 5min,上清液去除 ,再次用無(wú)菌水對(duì)細(xì)胞進(jìn)行 清洗 ,離心 ,重復(fù) (ch243。 （了解）第六 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。芯片使用之前需要用 98min。jūn)檢測(cè)： 對(duì)于場(chǎng)放大細(xì)菌堆積 ,與運(yùn)行緩沖溶液相比 ,細(xì)菌細(xì)胞應(yīng)該分散在更低電導(dǎo)率的樣品緩沖溶液中。(B)進(jìn)樣 ,(C)場(chǎng)放大樣品堆集和掃集 ,(D)反轉(zhuǎn)電場(chǎng)富集 ,(E)分離。華東師范大學(xué)，王志芳第九 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。)運(yùn)行緩沖和樣品緩沖中不同的電導(dǎo)率 ,因此必須過(guò)濾水樣以去除水中含有的離子。我們通過(guò)使用微流控芯片展示了多步濃縮方法 (CS掃描、反轉(zhuǎn)電場(chǎng)和場(chǎng)放大樣品堆積 )可以用來(lái)加強(qiáng)細(xì)菌富集 ,實(shí)現(xiàn)低濃度污染的樣品的測(cè)定。PCR歧視及非特異性擴(kuò)增 。)是一類(lèi)非編碼的小 RNA序列 ,其長(zhǎng)度只有 1825個(gè)堿基。 （了解）第十五 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。（知道）第十六 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。環(huán)氧樹(shù)脂 (合眾全透明 AAA超能膠 ):浙江黃巖光華膠點(diǎn)劑廠 ,黃巖。異辛院 :國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試剖有限公司 ,上海。水 g(2%mm的圓形薄片 ,每塊桂片可加工出 7塊13X13mm芯片。將 ITO玻璃罩在芯片上方 ,結(jié)合自制的溫度控制模塊 ,維持溫度恒定 ,以起到熱蓋的作用。,National )，張?jiān)葡迹?第二十一 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。了解）第二十二 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。清洗表面后 ,將芯片置于 2%RNase清除劑中浸泡 5min,以減少 RNA降解 ,避免 PCR污染。芯片最長(zhǎng)使用時(shí)間可達(dá)一年。y242。（了解）第二十六 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。pL,1701NTechnologies,(PH(活細(xì)胞熒光染色別 2024軟件繪制芯片掩膜圖。)芯片AutoCAD掩膜圖第二十八 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。 （圖）第二十九 頁(yè) ，共九十一 頁(yè) 。并在 LED前端安裝窄帶濾光片 (470)的 CCD（電荷耦合器件）照像機(jī) (DHSV1401FC/FM,北京 (běi實(shí)時(shí)定量 RTPCR焚光檢測(cè)系統(tǒng)實(shí)物 (sh237。檢測(cè)：以 培養(yǎng) 的細(xì)胞作為模型樣